油茶籽油及枯餅提取物的抗腫瘤活性研究

葉洲辰　吳友根　張軍鋒　胡新文　于靖　周開兵　林尤奮　王健　陳健妙

摘 要 采用噻唑藍(lán)（MTT）法測(cè)定7種油茶籽油（茶油）及枯餅提取物的抗腫瘤活性，并通過福林-酚法和三氯化鋁法對(duì)提取物中總酚和總黃酮的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，7種茶油中瓊海茶油（炒）總酚（151.04 μg/g）和總黃酮（1.37 mg/g）含量最高，7種枯餅中總酚含量差異不顯著，莆田枯餅（蒸）中總黃酮含量（5.55 mg/g）高于其他6種枯餅；7種茶油及枯餅提取物均具有明顯的抗腫瘤活性，且在1～50 μg/mL的劑量范圍內(nèi)，對(duì)人肺癌細(xì)胞株（Lewis）、黑色素瘤細(xì)胞株（B16）及乳腺癌細(xì)胞株（SCC891）的增殖有不同程度的抑制作用，呈明顯的劑量依賴關(guān)系。因此，開發(fā)利用油茶抗癌活性具有潛在的醫(yī)用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效益。

關(guān)鍵詞 油茶；總酚；總黃酮；抗腫瘤活性

中圖分類號(hào) R979.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract The anticancer activities of oils and cakes of Camellia spp. were detected by MTT in this paper. And the total phenolics and total flavonoids were measured by Folin-Ciocalteu reagent and aluminium chloride reagent， respectively. The results showed that the content of total phenolic（151.04 μg/g）and total flavonoid（1.37 mg/g）of the oil produced by stir-frying and squeezing from Qionghai exceeded those of the other samples. The total phenol content in seven cakes of Camellia spp. had no significant difference， and the total flavonoid content of the cake produced by steaming and squeezing from Putian was higher than other samples. The specific anticancer activities were clear from the oils and cakes of Camellia spp.. And their antiproliferative activities to lung cancer（Lewis）， melanoma（B16）and breast cancer（SCC891）cells in a range of concentrations from 1 to 50 μg/mL were increased in dose-dependent manner. Therefore， it had potential medical values and economic benefits to develop the anticancer effect of Camellia spp..

Key words Camellia spp.； total phenolics； total flavonoids； anticancer activities

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.07.007

油茶（Camellia spp.）隸屬山茶科（Theaceae）山茶屬（Camellia），是我國(guó)重要的木本油料作物，世界四大木本油料樹種之一，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)效益[1]。油茶在中國(guó)有2300多年的栽培和利用歷史，主要分布在我國(guó)的長(zhǎng)江流域及其以南地區(qū)，資源非常豐富[2-3]。油茶籽經(jīng)浸出或壓榨即可得到茶油，是一種綠色、生態(tài)和高營(yíng)養(yǎng)的保健油，是食用油中的珍品，富含不飽和脂肪酸、角鯊烯和生育酚等，具有清熱化濕，殺蟲解毒的功效，有“東方橄欖油”之稱[4-5]；枯餅為茶籽榨油后的副產(chǎn)物，其利用率相對(duì)較低，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，枯餅中富含茶皂素、黃酮、多糖及多酚等成分，具有減肥、降血糖、抑菌、消炎、抗衰老及預(yù)防癌癥等功效，若能對(duì)枯餅加以有效利用，將大大提高油茶利用率并產(chǎn)生很高的經(jīng)濟(jì)效益[6-7]。

油茶在海南經(jīng)過長(zhǎng)期的引種馴化，產(chǎn)生了本地特有的栽培種[8]，其所產(chǎn)的茶油一般被當(dāng)?shù)鼐用裼脕碇委煙齻?、燙傷、胃病及口腔潰瘍等疾病。但目前關(guān)于該栽培種的研究報(bào)道較少，特別是抗腫瘤活性。因此，筆者通過體外觀察海南瓊海油茶及大陸其他優(yōu)良品種油茶的茶油及枯餅提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞株（Lewis）、黑色素瘤細(xì)胞株（B16）和乳腺癌細(xì)胞株（SCC891）增殖的影響，旨在為評(píng)價(jià)茶油藥用價(jià)值提供理論依據(jù)，并為發(fā)掘枯餅等油茶副產(chǎn)品的新用途奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 植物材料 實(shí)驗(yàn)所用油茶果分別采自海南瓊海、廣西岑溪、江西宜春、福建莆田和湖南岳陽(yáng)5個(gè)市區(qū)，每個(gè)市區(qū)選擇3個(gè)具有代表性且種植面積較大的采樣點(diǎn)，選取長(zhǎng)勢(shì)、樹齡以及果實(shí)大小比較一致的油茶樹作為采樣株，由海南大學(xué)楊好偉教授鑒定為Camellia spp.。采集時(shí)間為2015年10～12月，各市區(qū)混合樣品均約為2.00 kg，經(jīng)自然風(fēng)干，脫蒲，去殼后，將油茶籽烘干至恒重（60 ℃，48 h），統(tǒng)一在瓊海白石山榨油廠進(jìn)行加工處理。其中瓊海油茶與岑溪油茶分別采用炒制—壓榨法和熱蒸—壓榨法兩種加工方法各得兩種不同的茶油及茶枯餅，而宜春油茶、岳陽(yáng)油茶、莆田油茶的加工工藝統(tǒng)一為熱蒸—壓榨法，樣品來源及加工工藝見表1。熱蒸—壓榨工藝和炒制—壓榨工藝是目前加工廠或作坊較為常用的生產(chǎn)食用油的方法，也是市場(chǎng)所銷售茶油的主要加工工藝，具有一定代表性。

1.1.2 細(xì)胞株 人肺癌細(xì)胞株（Lewis）、黑色素瘤細(xì)胞株（B16）以及乳腺癌細(xì)胞株（SCC891）由中國(guó)藥科大學(xué)酶工程實(shí)驗(yàn)室提供，5% CO2，37 ℃恒濕條件下培養(yǎng)。

1.1.3 藥物與試劑 刀豆蛋白（美國(guó)Sigma公司），四噻唑藍(lán)（MTT，美國(guó)Sigma公司），RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基（美國(guó)Gibco公司），臺(tái)盼藍(lán)染色液（美國(guó)Beckman coulter公司），二甲基亞楓（DMSO，上海阿拉丁生化科技有限公司），福林-酚（上海阿拉丁生化科技有限公司），沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品和蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（成都Herbpurify有限公司），乙醇，三氯甲烷，乙酸乙酯，碳酸鈉，亞硝酸鈉和硝酸鋁（分析純，南京化學(xué)試劑有限公司）。

1.1.4 主要儀器和設(shè)備 細(xì)胞培養(yǎng)瓶，96孔細(xì)胞培養(yǎng)板和二氧化碳培養(yǎng)箱（美國(guó)Thermo Scientific公司），Bio-Rad 550型酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Rad公司），GL-21M高速冷凍離心機(jī)（湘儀離心機(jī)有限公司），冷凍干燥機(jī)（北京松源華興科技有限公司），超聲波清洗機(jī)（北京六一儀器廠），BS214S電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司），真空干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器總廠），倒置相差顯微鏡（上海光學(xué)儀器有限公司），超凈工作臺(tái)（蘇州凈化設(shè)備有限公司），UV-2100紫外分光光度計(jì)（上海UNICO儀器有限公司），SI-T256渦旋振蕩器（美國(guó)Scientific Industries公司）。

1.2 方法

1.2.1 茶油提取物的制備 在500 mL燒杯中按體積比為5 ∶ 1的比例加入氫氧化鉀溶液和茶油樣品，振蕩反應(yīng)20 min，靜置10 min，待分層后棄去上層溶液，下層溶液經(jīng)0.22 μm孔徑濾膜過濾；濾液加入5倍體積的60%乙醇溶液，過濾；40 ℃水浴減壓濃縮后，將濃縮液移入分液漏斗中，加入等體積的三氯甲烷，萃取2次；合并水層后用等體積乙酸乙酯萃取，收集萃取液，40 ℃水浴減壓濃縮；將樣品移入-50 ℃冷凍干燥機(jī)中凍干18 h，收集凍干粉末。

1.2.2 枯餅提取物的制備 在500 mL燒杯中按體積質(zhì)量比為10 ∶ 1的比例加入60%乙醇溶液和枯餅粉末，40 ℃水浴下超聲（功率500 W，間隔4 s，持續(xù)15 s，超聲20 min，重復(fù)3次），三層紗布粗濾后，用8 μm孔徑濾膜過濾，殘?jiān)瓷鲜龇椒ㄓ?倍體積的60%乙醇溶液提取20 min，過濾；40 ℃水浴減壓濃縮后，將濃縮液移入分液漏斗中，加入等體積三氯甲烷，萃取2次；合并水層后用等體積乙酸乙酯萃取，收集萃取液，40 ℃水浴減壓濃縮；將樣品移入-50 ℃冷凍干燥機(jī)中凍干18 h，收集凍干粉末。

所有的凍干粉藥物均溶于RPMI-1640培養(yǎng)基配成母液，經(jīng)0.22 μm孔徑濾膜過濾后，在超凈工作臺(tái)內(nèi)紫外照射20 min，備用。

1.2.3 總酚含量測(cè)定 采用福林-酚法，以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品來測(cè)定油茶樣品中的酚類化合物含量[9]。分別吸取3 mL待測(cè)樣品液至25 mL容量瓶中，加入20 mL蒸餾水和1 mL福林-酚試劑，在渦旋振蕩器上充分混勻，室溫反應(yīng)3 min后，再加入1 mL 20% Na2CO3溶液，50 ℃水浴反應(yīng)30 min，于765 nm處測(cè)定吸光值。沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0.188 1 X-0.009 4（R2=0.998 7），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算總酚含量，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.2.4 總黃酮含量測(cè)定 采用Gorinstein等[10]所描述的三氯化鋁法測(cè)定黃酮含量。分別吸取3 mL待測(cè)樣品液至具塞比色管中，用60%乙醇溶液補(bǔ)足體積至5 mL，在渦旋振蕩器上充分混勻后各加入0.3 mL 5% NaNO2溶液，混勻后靜置5 min，加入0.3 mL 10% Al（NO3）3溶液，混勻后靜置6 min，最后加入4 mL 1 mol/L NaOH溶液和0.4 mL 30%乙醇溶液使總體積為10 mL，混勻后靜置10 min，在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定吸光值。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0.010 4 X + 0.020 3（R2=0.998 5），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算總黃酮含量，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.2.5 細(xì)胞培養(yǎng) 按藥理實(shí)驗(yàn)[11]方法復(fù)蘇細(xì)胞，常規(guī)傳代培養(yǎng)。肺癌細(xì)胞（Lewis）、黑色素瘤（B16）及乳腺癌細(xì)胞株（SCC89）分別培養(yǎng)于含1 mg/mL刀豆蛋白的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置于37 ℃，5% CO2及恒濕條件下細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。視具體情況，每2～3 d傳代培養(yǎng)1次，使細(xì)胞保持在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/mL，最后，取狀態(tài)良好，增殖旺盛的細(xì)胞用于本實(shí)驗(yàn)。

1.2.6 噻唑藍(lán)（MTT）法測(cè)定細(xì)胞的抑制率及IC50值 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，以細(xì)胞密度1×104個(gè)/孔100 μL接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，于37 ℃，5% CO2及恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，待細(xì)胞完全貼壁后，吸去原有培養(yǎng)液，加入油茶各提取物，使腫瘤細(xì)胞（Lewis、B16及SCC89）懸液中茶油和枯餅提取物的終濃度都分別為50、40、20、15、10、5、2和1 μg/mL，每組3復(fù)孔，以RPMI-1640培養(yǎng)基為本底對(duì)照組。各提取物與細(xì)胞在含37 ℃、5% CO2條件下共同孵育24 h后，于每孔中加入MTT溶液（5 mg/mL）20 μL，繼續(xù)培養(yǎng)4 h后，2 500 r/min離心10 min，棄去上清液，加入100% DMSO溶液100 μL，經(jīng)渦旋振蕩器振蕩10 min，待每孔中甲瓚結(jié)晶完全溶解后，用空白孔調(diào)零，在酶標(biāo)儀波長(zhǎng)570 nm處測(cè)定各孔吸光度（OD）。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，計(jì)算細(xì)胞存活率和IC50值。

抑制率=（1-OD實(shí)驗(yàn)/OD對(duì)照）×100%

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

采用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各組數(shù)據(jù)以x±s表示。樣品比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），再用LSD檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩組間比較。p< 0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶油及枯餅提取物總酚、總黃酮含量

茶油提取物中總酚和總黃酮的含量見表2，結(jié)果顯示各組分兩兩之間差異顯著（p<0.05），總酚含量高低依次為瓊海（炒）>岳陽(yáng)（蒸）>宜春（蒸）>岑溪（炒）>莆田（蒸）>岑溪（蒸）>瓊海（蒸）；總黃酮含量高低依次為瓊海（炒）>岳陽(yáng)（蒸）>宜春（蒸）>岑溪（炒）>岑溪（蒸）>莆田（蒸）>瓊海（蒸）。其中，瓊海茶油（炒）中總酚及總黃酮含量顯著高于瓊海茶油（蒸），而岑溪茶油（炒）也略高于岑溪茶油（蒸），可推測(cè)加工工藝對(duì)茶油總酚及總黃酮含量影響較大，且炒制加工方法優(yōu)于熱蒸加工方法。瓊海茶油（炒）中總酚及總黃酮含量顯著高于其他6種茶油，原因可能是植物活性成分含量會(huì)受到產(chǎn)區(qū)環(huán)境條件的影響。

枯餅提取物中總酚和總黃酮的含量見表3，結(jié)果顯示各組分兩兩之間差異顯著（p<0.05），其中總酚含量最高的是瓊?？蒿灒ǔ矗?.10 mg/g），含量最低的是宜春枯餅（蒸）（2.66 mg/g）；而總黃酮在莆田枯餅（蒸）中含量（5.55 mg/g）顯著高于瓊?？蒿灒ㄕ簦?.96 mg/g）。

2.2 茶油提取物體外對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用

不同種茶油提取物對(duì)Lewis、B16及SCC891細(xì)胞增殖的影響見圖1～3。結(jié)果表明，茶油提取物在1～50 μg/mL的劑量范圍內(nèi)，對(duì)Lewi、B16及SCC891細(xì)胞的增殖有不同程度的抑制作用，且呈明顯的劑量依賴關(guān)系。不同種茶油提取物抑制Lewis、B16及SCC891細(xì)胞增殖的IC50值見表4，其中岑溪茶油（蒸）對(duì)Lewis細(xì)胞抑制作用的IC50值最低為75.56 μg/mL，可見岑溪茶油（蒸）對(duì)該腫瘤細(xì)胞的抑制能力最強(qiáng)；莆田茶油（蒸）抑制B16細(xì)胞增殖的IC50值最低（114.35 μg/mL），顯著低于岳陽(yáng)茶油（蒸）IC50值（316.77 μg/mL），可見莆田茶油（蒸）對(duì)B16細(xì)胞增殖的影響最大，而岳陽(yáng)茶油（蒸）對(duì)該腫瘤細(xì)胞的抑制能力較弱；7種茶油對(duì)SCC891細(xì)胞抑制能力的IC50值大小順序?yàn)獒ǔ矗?瓊海（炒）>瓊海（蒸）>莆田（蒸）>岳陽(yáng)（蒸）>岑溪（蒸）>宜春（蒸），宜春茶油（蒸）對(duì)SCC891細(xì)胞抑制作用最強(qiáng)，其IC50值為98.96 μg/mL，顯著低于其他6種茶油。

2.3 枯餅提取物體外對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用

不同種枯餅提取物對(duì)Lewis、B16及SCC891細(xì)胞增殖的影響見圖4～6，結(jié)果表明，1～50 μg/mL枯餅提取物對(duì)Lewis、B16及SCC891 3種腫瘤細(xì)胞的增殖均具有抑制作用，且隨提取物濃度升高對(duì)細(xì)胞的抑制作用增加。與對(duì)照組相比較，各給藥組細(xì)胞存活率顯著降低（p<0.05），可見枯餅提取物能抑制Lewis、B16及SCC891腫瘤細(xì)胞的增殖，且呈濃度依賴性。不同種枯餅提取物對(duì)Lewis、B16及SCC891細(xì)胞抑制能力的IC50值見表5，其中岳陽(yáng)枯餅（蒸）對(duì)Lewis腫瘤細(xì)胞的抑制能力最弱，其IC50值為131.28 μg/mL，其余6種枯餅對(duì)該腫瘤細(xì)胞抑制作用均較強(qiáng)，莆田枯餅（蒸）對(duì)Lewis腫瘤細(xì)胞增殖的影響最大，IC50值56.55 μg/mL；岑溪枯餅（炒）表現(xiàn)出對(duì)B16腫瘤細(xì)胞較強(qiáng)的抑制作用，IC50值為68.31 μg/mL，而瓊?？蒿灒ǔ矗┮种艬16腫瘤細(xì)胞增殖的IC50值為275.97 μg/mL，差異十分顯著；7種枯餅對(duì)SCC891腫瘤細(xì)胞增殖的抑制能力相當(dāng)。

2.4 油茶提取物體中活性成分含量與其抗腫瘤活性的相關(guān)性分析

茶油及枯餅提取物中總酚和總黃酮含量與抗腫瘤活性的相關(guān)性分析見表6和表7，結(jié)果表明，茶油提取物中總酚的含量與對(duì)Lewis細(xì)胞的抑制能力呈極顯著正相關(guān)，而總黃酮含量與對(duì)Lewis和B16細(xì)胞的抑制能力呈極顯著正相關(guān)；枯餅提取物中總酚含量與對(duì)B16細(xì)胞的抑制能力呈極顯著正相關(guān)，而總黃酮含量與對(duì)SCC891細(xì)胞的抑制能力呈極顯著正相關(guān)，且相關(guān)系數(shù)可達(dá)0.858。由此可見，總酚和總黃酮等活性物質(zhì)是油茶提取物抗腫瘤活性能力的主要成分，在生物體系中相關(guān)性明顯，但茶油提取物和枯餅提取物中同一活性成分與對(duì)相同腫瘤細(xì)胞抑制作用的相關(guān)性程度不同，原因可能是茶油與枯餅中相同活性物質(zhì)的組成成分不同，因而其活性能力存在差異。因此，在今后的研究中，不能僅局限于評(píng)價(jià)化合物體外抗腫瘤效果，還應(yīng)該對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)、抗腫瘤機(jī)理以及多組分協(xié)同作用等進(jìn)行深入探討，確切抗腫瘤活性還有待在動(dòng)物水平上做進(jìn)一步研究，這將有利于天然藥物的開發(fā)和利用，并為先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)以及天然化學(xué)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)修飾和合成提供理論依據(jù)。

3 討論

惡性腫瘤是機(jī)體在各種致癌因子作用下，局部組織細(xì)胞增生所形成的新生物，其普遍性與危害性嚴(yán)重危及人們的健康和生命，是當(dāng)今世界最大的醫(yī)學(xué)難題之一[12]。目前對(duì)腫瘤的各種治療方法和手段尚不能從根本上杜絕腫瘤，切除手術(shù)又難以避免惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散，且大部分抗腫瘤化學(xué)藥物在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也嚴(yán)重?fù)p傷了正常細(xì)胞，故從傳統(tǒng)植物中藥資源中開發(fā)高效低毒的抗腫瘤藥物已成為當(dāng)今研究的一個(gè)熱點(diǎn)[13]。

本文綜合分析了茶油及枯餅提取物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用，結(jié)果表明，瓊海茶油（炒）中總酚含量為151.035 μg/g，總黃酮含量為1.369 mg/g，顯著高于其他茶油，尤其是瓊海茶油（蒸），而岑溪茶油（炒）也略高于岑溪茶油（蒸），故推測(cè)加工工藝對(duì)茶油中總酚和總黃酮的含量存在一定的影響。周晴芬等[14]對(duì)4種茶油的總酚含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明毛油中的多酚含量高于精煉油。呂杰[15]認(rèn)為活性物質(zhì)在從油茶籽到油脂的轉(zhuǎn)移過程中會(huì)發(fā)生損失，且其程度與加工工藝有關(guān)。此外，總酚和總黃酮的含量在岳陽(yáng)茶油（蒸）、宜春茶油（蒸）、莆田茶油（蒸）、岑溪茶油（蒸）和瓊海茶油（蒸）這5種茶油中均不相同，這說明相同加工技術(shù)，不同產(chǎn)區(qū)茶油間的總酚和總黃酮含量也存在差異，推測(cè)茶油中含有的活性成分也可能會(huì)受到環(huán)境氣候，收獲時(shí)間以及貯藏條件等的影響，這與Moghaddam等[16]的研究結(jié)論相一致。瓊?？蒿灒ǔ矗┲锌偡雍浚?.096 mg/g）也是7種枯餅中最高的，莆田枯餅（蒸）中的總黃酮含量（5.548 mg/g）顯著高于瓊海枯餅（蒸）（0.958 mg/g），可見同一產(chǎn)地品種在不同加工工藝條件下所得到的枯餅，其活性成分含量存在差異，且同種加工工藝下的不同產(chǎn)地油茶枯餅活性成分含量也不盡相同。曹耀強(qiáng)等[17]采用不同提取方法對(duì)油茶餅中酚類物質(zhì)進(jìn)行提取，結(jié)果差異較大。謝鳳等[18]表明溶劑種類對(duì)所提酚類物質(zhì)的種類和含量具有一定的影響，且不同品種的油茶多酚含量也存在一定的差異，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)論一致。

茶油及枯餅提取物在1～50 μg/mL的劑量范圍內(nèi)，對(duì)Lewi、B16及SCC891細(xì)胞的增殖有不同程度的抑制作用，呈明顯的劑量依賴關(guān)系，這與淦永鑒等[19]所得出的結(jié)果相一致。7種茶油中，岑溪茶油（炒）對(duì)Lewis細(xì)胞增殖的抑制能力最強(qiáng)，莆田茶油（蒸）對(duì)B16細(xì)胞的影響最大，而宜春茶油（蒸）對(duì)SCC891細(xì)胞增殖的抑制率顯著高于其他6種茶油；相對(duì)應(yīng)的7種枯餅中，莆田枯餅（蒸）對(duì)Lewis細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用，岑溪枯餅（炒）抑制B16細(xì)胞增殖的IC50值最小，7種枯餅對(duì)SCC891細(xì)胞增殖的抑制作用能力均較弱。另外，茶油及枯餅提取物中總酚、總黃酮含量與抗腫瘤活性間相關(guān)性明顯，故推測(cè)茶油抗腫瘤活性能力的強(qiáng)弱可能主要取決于其所含有的次生代謝產(chǎn)物，但究竟哪些活性物質(zhì)對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制效果最好，及其作用機(jī)理仍須進(jìn)一步研究與探討。唐玲等[20]測(cè)得油茶籽醇提取物對(duì)人體乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）的IC50值低于油茶籽水提取物的IC50值，推測(cè)不同提取劑所得到的提取物活性成分含量及組成存在差異。馬麗媛等[21]測(cè)得油茶粕提取物對(duì)人肺癌細(xì)胞（A549）和人乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）的IC50值分別為77.56 μg/mL和81.51 μg/mL，且提取物的主要成分為皂苷。Kweon等[22]研究表明多酚類物質(zhì)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞能夠發(fā)揮其抑制腫瘤和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。Lu等[23]發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有潛在的抑制人體肺癌腫瘤細(xì)胞（A549）生長(zhǎng)的潛力。因此可推測(cè)皂苷類、多酚類及黃酮類成分在枯餅的抗腫瘤療效中發(fā)揮著重要作用，且活性成分之間相互協(xié)同或者拮抗作用可能也會(huì)對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖造成一定的影響。

海南瓊海油茶與大陸其他優(yōu)良品系油茶提取物的抗腫瘤活性能力相當(dāng)，故此栽培種具有一定的推廣價(jià)值[24]。整體而言，茶油及枯餅提取物有明顯的抗腫瘤活性，且其總酚、總黃酮的含量與抗腫瘤活性存在一定的相關(guān)性。因此，油茶可作為潛在的天然抗腫瘤藥物來源，應(yīng)用于食品或醫(yī)藥行業(yè)。

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