級聯(lián)激活的免疫細(xì)胞聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌效果觀察

孫銀萍，王福立

(淄博市中心醫(yī)院，山東淄博255000)

級聯(lián)激活的免疫細(xì)胞聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌效果觀察

孫銀萍，王福立

(淄博市中心醫(yī)院，山東淄博255000)

目的 觀察級聯(lián)激活的免疫細(xì)胞(CAPRI細(xì)胞)聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的療效與安全性。方法 將60例晚期NSCLC患者隨機(jī)分為治療組31例和對照組29例，治療組給予化療+CAPRI細(xì)胞治療，對照組僅給予化療。觀察兩組臨床療效和不良反應(yīng)，比較治療前后血清腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原(CEA)、鱗狀上皮細(xì)胞相關(guān)抗原(SCC)、細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的變化。結(jié)果 治療組和對照組的客觀有效率分別為54.8%和41.4%，組間比較P>0.05；兩組疾病控制率分別為90.3%和72.4%，組間比較P<0.05。兩組腺癌患者血清CEA及鱗癌患者血清SCC、CYFRA21-1與治療前比較均下降，組內(nèi)比較P<0.05；治療組中腺癌患者治療后血清CEA及鱗癌患者治療后血清SCC、CYFRA21-1與對照組治療后血清CEA、SCC、CYFRA21-1比較均下降，組間比較P<0.05。兩組白細(xì)胞下降、貧血、血小板下降、惡心嘔吐、肝腎功能損傷的發(fā)生率比較，P均>0.05。結(jié)論 CAPRI細(xì)胞聯(lián)合化療能夠提高晚期NSCLC患者的疾病控制率，降低腫瘤標(biāo)志物水平，安全性好。

非小細(xì)胞肺癌；級聯(lián)激活的免疫細(xì)胞；癌胚抗原；鱗狀上皮細(xì)胞相關(guān)抗原；細(xì)胞角蛋白19片段

化療是晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的主要治療手段之一[1]。近年來，腫瘤免疫治療逐漸受到人們的關(guān)注，免疫治療在肺癌治療中的應(yīng)用逐漸增多[2，3]。級聯(lián)激活的免疫細(xì)胞(CAPRI細(xì)胞)是一種新型的腫瘤免疫治療方法，它是應(yīng)用患者的外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)活化刺激后獲得，對腫瘤細(xì)胞具有特異性殺傷功能[4]。目前CAPRI細(xì)胞在肺癌治療中的應(yīng)用較少。本研究對晚期NSCLC患者給予化療聯(lián)合CAPRI細(xì)胞治療，觀察其療效與不良反應(yīng)，并觀察治療前后血清腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原(CEA)、鱗狀上皮細(xì)胞相關(guān)抗原(SCC)、細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的變化。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 入選標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)纖維支氣管鏡或穿刺活檢病理檢查證實(shí)為鱗癌或腺癌；②根據(jù)美國腫瘤研究聯(lián)合委員會(AJCC)制定的第7版癌癥分期標(biāo)準(zhǔn)，符合Ⅲ～Ⅳ期；③初治；④CT和(或)MRI顯示的可測量病灶直徑≥10 mm；⑤治療前血常規(guī)、腎功能、肝功能及心電圖正常；⑥KPS評分≥70分，預(yù)計生存時間≥6個月。選取淄博市中心醫(yī)院2014年4月～2016年3月收治的晚期NSCLC患者60例，男33例、女27例,年齡35～69歲。采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為治療組31例和對照組29例，兩組性別、年齡、KPS評分、病理類型及臨床分期具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。

1.2 治療方法 治療組給予CAPRI細(xì)胞聯(lián)合化療治療，對照組僅給予化療。

1.2.1 化療方法 鱗癌患者采用吉西他濱+順鉑方案。吉西他濱1 000 mg/m2靜滴30 min，第1、8天；順鉑25 mg/m2，第1～3天；21 d為一周期。腺癌患者采用培美曲塞+順鉑方案。培美曲塞500 mg/m2靜滴超過10 min，第1天；順鉑75 mg/m2，培美曲塞滴注結(jié)束后30 min開始滴注，滴注時間超過2 h，第1天；21 d為一周期。

1.2.2 CAPRI細(xì)胞治療方法 應(yīng)用COBE Spectra血細(xì)胞分離機(jī)(美國COBE公司)采集患者外周血單個核細(xì)胞40 mL，將其稀釋至200 mL，平均分配到8個離心管中，反復(fù)離心，將得到的細(xì)胞裝入培養(yǎng)瓶，加入12 mL淋巴細(xì)胞懸液，置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 h，后在培養(yǎng)物中加入CAPRI專利試劑后繼續(xù)培養(yǎng)3 h，完成CAPRI細(xì)胞的第一步激活；在激活的培養(yǎng)物中再加入淋巴細(xì)胞懸液12 mL，在上述相同條件下培養(yǎng)16 h，完成第二步激活。然后將得到的細(xì)胞計數(shù)、離心后再加入CAPRI專利試劑培養(yǎng)72 h，離心，去上清，得到CAPRI細(xì)胞。將CAPRI細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞表型、病毒、細(xì)菌學(xué)及真菌檢測無異常后，-80 ℃保存待用。于化療結(jié)束后1周進(jìn)行CAPRI細(xì)胞回輸，回輸前再次進(jìn)行細(xì)胞表型、病毒、細(xì)菌學(xué)及真菌檢測，無異常后采用靜滴方式回輸，隔日1次，每個療程共回輸12次。

1.3 近期療效評價方法 治療前及治療結(jié)束后2個月行強(qiáng)化CT觀察瘤體變化，按照RECIST標(biāo)準(zhǔn)[5]評價近期療效。完全緩解(CR)：全部病灶消失，維持4周以上；部分緩解(PR)：病灶縮小至少30%，維持4周以上；穩(wěn)定(SD)：介于PR和PD之間；進(jìn)展(PD)：病灶增加超過20%，或出現(xiàn)新病灶。如初步評價為PR或CR，則于4周后再次評價確認(rèn)。以CR+PR計算客觀有效率，以CR+PR+SD計算疾病控制率。不良反應(yīng)評價按照美國國立癌癥研究所通用毒性標(biāo)準(zhǔn)(NCI-CTC)3.0版[6]。輸注CAPRI細(xì)胞過程中及回輸后觀察有無發(fā)熱、皮疹、過敏等不良反應(yīng)。

1.4 腫瘤標(biāo)志物檢測方法 治療前及治療結(jié)束后采集患者靜脈血，分離血清，采用E170電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒檢測血清CEA、SCC、CYFRA21-1水平。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。組間計量資料比較采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組近期療效比較 治療組共完成化療168個周期，對照組共完成化療165個周期。治療組CR 0例，PR 17例，SD 11例，PD 3例，客觀有效率為54.8%，疾病控制率為90.3%；對照組CR 0例，PR 12例，SD 9例，PD 8例，客觀有效率為41.4%，疾病控制率為72.4%。兩組客觀有效率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，治療組疾病控制率高于對照組(P<0.05)。

2.2 兩組治療前后血清腫瘤標(biāo)志物水平比較 治療組腺癌患者治療前后血清CEA水平分別為(44.12±35.47)、(18.40±12.25)ng/mL，對照組分別為(43.09±30.73)、(29.25±10.51)ng/mL，兩組治療后血清CEA水平均顯著下降(P均<0.05)，且治療組低于對照組(P<0.05)。兩組鱗癌患者治療前后血清SCC、CYFRA21-1水平比較見表1。

2.3 兩組不良反應(yīng)比較 治療組出現(xiàn)白細(xì)胞下降15例(48.4%)、貧血10例(32.3%)、血小板下降5例(16.1%)、惡心嘔吐16例(51.6%)、肝腎功能損傷5例(16.1%)；對照組分別為16例(55.2%)、8例(27.6%)、4例(13.8%)、18例(62.1%)、4例(13.8%)。兩組白細(xì)胞下降、貧血、血小板下降、惡心嘔吐、肝腎功能損傷的發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。治療組應(yīng)用CAPRI細(xì)胞治療過程中未出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)及過敏等不良反應(yīng)。

表1 兩組鱗癌患者治療前后血清SCC、CYFRA21-1水平比較

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，△P<0.05。

3 討論

生物免疫治療是繼手術(shù)、放療和化療后的第四種腫瘤治療模式，廣泛用于晚期腫瘤的治療[7]。生物免疫治療常與放化療聯(lián)合使用，可以提高放化療的療效，降低放化療的不良反應(yīng)。CAPRI細(xì)胞是過繼性細(xì)胞免疫治療(ACI)的常用方法[8]，其利用抗原遞呈細(xì)胞結(jié)合抗CD3單克隆抗體及特定細(xì)胞因子,然后經(jīng)兩步法鏈?zhǔn)椒磻?yīng)激活后獲得。CAPRI細(xì)胞的殺傷范圍幾乎涵蓋所有腫瘤細(xì)胞，其效應(yīng)細(xì)胞不僅包括NK樣T細(xì)胞、NK細(xì)胞和少量DC細(xì)胞，還包括大量CD4+和CD8+T輔助細(xì)胞(Th)和細(xì)胞毒T細(xì)胞(CTL)，其中NK樣T細(xì)胞能殺傷占人類腫瘤細(xì)胞20%的非MHC限制型腫瘤細(xì)胞，而Th和CTL細(xì)胞的殺傷是一種典型的特異性殺傷，能殺傷占人類腫瘤細(xì)胞80%的MHC限制型腫瘤細(xì)胞。

CAPRI細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的作用機(jī)制包括：CAPRI細(xì)胞可以分泌腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN-γ)及IL-2、IL-6等多種抗腫瘤的細(xì)胞因子;誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡；通過NK樣T細(xì)胞和Th、CTL的殺傷作用誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞裂解[9]。研究顯示，CAPRI細(xì)胞可以恢復(fù)腫瘤細(xì)胞表面隱藏的抗原，使其更容易被CAPRI細(xì)胞識別和殺傷[10]。國外研究發(fā)現(xiàn)，CAPRI細(xì)胞能夠提高化療的效果，同時增強(qiáng)患者對放化療的耐受能力，提高其生存質(zhì)量[11]。國內(nèi)研究顯示，三陰性乳腺癌術(shù)后患者[12]、結(jié)腸癌術(shù)后患者[13]采取化療聯(lián)合CAPRI治療后，復(fù)發(fā)率明顯降低，生存率明顯升高。桑圣剛等[14]報道，CAPRI治療可減少惡性胸腔積液患者的胸水量。本研究中，治療組的客觀有效率與對照組相近，而疾病控制率顯著高于對照組，表明CAPRI可以提高晚期NSCLC的近期療效。兩組客觀有效率沒有統(tǒng)計學(xué)差異的原因可能與樣本量少有關(guān)。

肺癌標(biāo)志物CEA、SCC及CYFRA21-1是由肺癌細(xì)胞異常產(chǎn)生或是機(jī)體對腫瘤的刺激反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)。CEA是肺腺癌的特異性血清標(biāo)志物，對晚期肺癌的療效評價和監(jiān)測NSCLC的復(fù)發(fā)具有重要作用[15]；CYFRA21-1是鱗癌的血清腫瘤標(biāo)志物,也是NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素之一[16]；血清SCC水平可用于鱗癌的鑒別診斷，與CYFRA21-1聯(lián)合應(yīng)用可判斷肺鱗癌預(yù)后和監(jiān)測疾病進(jìn)展[17]。本研究顯示，治療組和對照組中腺癌患者治療后血清CEA、鱗癌患者治療后血清SCC和CYFRA21-1均較治療前下降，且治療組較對照組更低。分析腫瘤標(biāo)志物下降的原因可能與患者經(jīng)治療后腫瘤縮小，產(chǎn)生肺癌標(biāo)志物的癌細(xì)胞減少有關(guān)。

綜上所述，CAPRI細(xì)胞聯(lián)合化療能夠提高晚期NSCLC患者的疾病控制率，降低腫瘤標(biāo)志物水平，安全性好。

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山東省淄博市科學(xué)技術(shù)發(fā)展計劃資助項目(2014kj010217)。

王福立(E-mail: 1262223640@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.06.016

R734.2

B

1002-266X(2017)06-0048-03

2016-10-08)