黃春燕 楊 鵬 萬魯長(zhǎng) 張海蘭 李 瑾 宮志遠(yuǎn)
(山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所/農(nóng)業(yè)部廢棄物基質(zhì)化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/山東省農(nóng)業(yè)面源污染防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,濟(jì)南 250100)
平菇是繼香菇、木耳之后的第三大菇種,也是消費(fèi)者接受度最高的菇種之一。目前生產(chǎn)中使用的平菇品種多而雜,且相互引種、過度傳代現(xiàn)象嚴(yán)重,因菌種退化導(dǎo)致的畸形菇和大面積減產(chǎn)給生產(chǎn)者造成重大經(jīng)濟(jì)損失。因此選育新的平菇優(yōu)良品種具有重要的意義[1-3]。試驗(yàn)對(duì)分離野生平菇菌株進(jìn)行了栽培比較試驗(yàn),以期選育出適合大面積推廣的優(yōu)良平菇菌株[4,5]。現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。
1.1 供試菌株為了擴(kuò)大種質(zhì)資源,筆者先后在濟(jì)南周邊及魯山地區(qū)進(jìn)行了采集、分離野生平菇,共獲得20余份分離株,經(jīng)拮抗試驗(yàn)獲得4組相互拮抗的菌株,由各組中選出菌絲生長(zhǎng)旺盛、菌落圓正無角變的菌株進(jìn)行栽培出菇試驗(yàn),分別命名為國(guó)槐1號(hào)、明湖2號(hào)、黃臺(tái)3號(hào)、魯山平1-2。以國(guó)審品種豐5作為春秋季栽培的對(duì)照品種,以夏優(yōu)1號(hào)作為夏季栽培的對(duì)照品種。
1.2 培養(yǎng)基質(zhì)PDA復(fù)合培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g(去皮),麩皮40 g(煮汁),磷酸二氫鉀2 g,硫酸鎂1 g,蔗糖20 g,瓊脂20 g,水1 L。栽培料配方:棉子殼88%,麩皮10%,石膏1%,石灰1%,料水比1∶1.3。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 拮抗試驗(yàn) 于PDA復(fù)合培養(yǎng)基平板上,分別接種不同菌株,對(duì)峙培養(yǎng),重復(fù)3次。25℃恒溫培養(yǎng),于8、15 d時(shí)分別檢查有無拮抗反應(yīng)。
1.3.2 菌絲生長(zhǎng)速度比較 PDA復(fù)合培養(yǎng)基平板上菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定:取供試保藏菌種,挑取一小塊轉(zhuǎn)接至PDA復(fù)合培養(yǎng)基平板上,置于25℃下培養(yǎng)至第3天時(shí)在菌落邊緣劃一條起始生長(zhǎng)線,繼續(xù)培養(yǎng)至菌落邊緣距培養(yǎng)皿邊緣約0.5~1 cm時(shí),在菌落邊緣再劃一條終止線,量取兩線之間的距離,計(jì)算菌絲日均生長(zhǎng)速度并觀察記載菌落形態(tài)及菌絲長(zhǎng)勢(shì)。試驗(yàn)處理均重復(fù)5次,采用Duncan法對(duì)各處理進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。
栽培培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度比較:選取接種后的試驗(yàn)用栽培菌包置于25℃培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。待菌絲長(zhǎng)至袋肩下2 cm左右時(shí),在菌絲生長(zhǎng)邊緣劃起始線,于7 d后在菌絲生長(zhǎng)邊緣劃終止線,量取兩條線之間的距離,計(jì)算菌絲日均生長(zhǎng)速度。每品種測(cè)定10袋,取其平均值。
1.3.3 栽培出菇試驗(yàn) 裝料、接種:采用聚丙烯栽培袋,規(guī)格18 cm×35 cm×0.005 cm,每袋裝折干料0.45 kg。料袋高壓蒸汽滅菌2 h,待料溫降至25℃以下時(shí)無菌條件下接種試管斜面菌種(菌種菌齡和接種量盡量一致)。
發(fā)菌管理:接種后料袋放入溫度20~25℃、相對(duì)濕度低于70%培養(yǎng)室內(nèi)避光培養(yǎng),保持環(huán)境清潔和通風(fēng)良好,發(fā)現(xiàn)雜菌感染的袋及時(shí)清理。
出菇管理:出菇房?jī)?nèi)墻式排袋一端開口出菇,保證管理?xiàng)l件一致,出菇期內(nèi)不施用任何農(nóng)藥。
栽培試驗(yàn)共3批次,分別于春、夏、秋三季進(jìn)行,每批次設(shè)三個(gè)重復(fù),隨機(jī)排列,每個(gè)菌株以12袋為一個(gè)重復(fù)。統(tǒng)計(jì)各菌株前四潮菇產(chǎn)量,常規(guī)方法計(jì)算各菌株生物學(xué)轉(zhuǎn)化率。
2.1 拮抗試驗(yàn)于PDA復(fù)合培養(yǎng)基平板上,分別接種6個(gè)菌株菌絲片,對(duì)峙培養(yǎng)8 d后,均產(chǎn)生明顯的拮抗線,隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),拮抗線更為明顯。表明6個(gè)菌株為不同的菌株。
表1 供試平菇菌株間相互拮抗情況
表2 供試平菇平菇菌株菌絲生長(zhǎng)情況比較
表3 供試平菇菌株春季栽培結(jié)果
表4 供試平菇菌株夏季栽培結(jié)果
表5 供試平菇菌株秋季栽培結(jié)果
2.2 供試平菇菌株菌絲生長(zhǎng)速度由表2可以看出,供試菌株無論在PDA復(fù)合培養(yǎng)基上還是在栽培料上均長(zhǎng)勢(shì)良好,菌絲濃白粗壯。在PDA復(fù)合培養(yǎng)基平板上與栽培料上生長(zhǎng)速度表現(xiàn)不一致,在PDA復(fù)合培養(yǎng)基上,明湖2號(hào)日均長(zhǎng)速最慢,夏優(yōu)1號(hào)最快,在栽培料上黃臺(tái)3號(hào)最慢,夏優(yōu)1號(hào)最快。豐5、魯山平1-2、國(guó)槐1號(hào)菌絲易變黃,不抗老化。
2.3 供試平菇菌株出菇試驗(yàn)結(jié)果在2016年春、夏、秋三季進(jìn)行了栽培試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果詳見表3-表5。由栽培試驗(yàn)結(jié)果可以看出供試野生菌株在春秋兩季栽培時(shí)均表現(xiàn)較好,其中明湖2號(hào)子實(shí)體顏色為灰黑色至瓦灰色,生物轉(zhuǎn)化率比對(duì)照提高3.01%~3.46%,出菇期比對(duì)照豐5提前5~7 d,屬于早熟品種;魯山平1-2與國(guó)槐1號(hào)子實(shí)體顏色偏褐色,產(chǎn)量表現(xiàn)一般,均略低于對(duì)照;黃臺(tái)3號(hào)子實(shí)體顏色最深,呈黑灰色單菇朵形較大,但出菇晚,出菇不整齊,部分出現(xiàn)球形菇(圖1)。
供試野生平菇菌株夏季栽培均表現(xiàn)不佳,產(chǎn)量大幅降低、顏色變淺,魯山平1-2子實(shí)體菌蓋邊緣上卷有瘤狀突起,黃臺(tái)3號(hào)只有零星出菇,大部分菌包未出菇。
圖1 部分供試平菇菌株子實(shí)體
由栽培試驗(yàn)結(jié)果可以看出供試野生分離平菇菌株在春秋兩季栽培時(shí)均表現(xiàn)較好,其中明湖2號(hào)子實(shí)體顏色為灰黑色至瓦灰色,是山東地區(qū)消費(fèi)者喜好菇色,同時(shí)生物轉(zhuǎn)化率較對(duì)照高;明湖2號(hào)在PDA復(fù)合培養(yǎng)基上,其菌絲日均生長(zhǎng)速度最慢,在栽培料上菌絲生長(zhǎng)速度也比夏優(yōu)1號(hào)和魯山平1-2慢,但出菇期除比夏優(yōu)1號(hào)稍晚外,均比其它菌株大幅提前,具有較好的推廣前景;魯山平1-2與國(guó)槐1號(hào)子實(shí)體顏色偏褐色,產(chǎn)量表現(xiàn)一般,均略低于對(duì)照,可作為搭配品種;黃臺(tái)3號(hào)子實(shí)體顏色最深,呈黑灰色單菇朵形較大,但出菇晚、不整齊,穩(wěn)定性差,部分出現(xiàn)球形菇,不適合推廣。供試野生平菇菌株夏季栽培均表現(xiàn)不佳,產(chǎn)量低、顏色變淺,不適合夏季高溫栽培。
試驗(yàn)為熟料袋栽,單邊接種試管種,發(fā)菌期較長(zhǎng),若為栽培種多層接種,發(fā)菌期應(yīng)大幅縮短;供試野生菌株是否適合多種原料、多種栽培方式以及最佳栽培原料與栽培方式還需進(jìn)一步試驗(yàn)篩選。