補(bǔ)骨脂抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀

張郴++張小東++趙佳

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.07.193

[摘要] 補(bǔ)骨脂為豆科補(bǔ)骨脂屬植物，具有多種藥理活性，其在抗腫瘤作用方面逐漸被人們關(guān)注。該文從細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞遷移和侵襲、逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性等方面揭示補(bǔ)骨脂的抗腫瘤作用，為進(jìn)一步開發(fā)補(bǔ)骨脂作為抗腫瘤藥物提供依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 補(bǔ)骨脂；腫瘤；天然植物

[中圖分類號] R282 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）03（a）-0193-03

Research Status of Semen Psoraleae Anti-tumor Effect

ZHANG Chen， ZHANG Xiao-dong， ZHAO Jia

Honghe Health Vocational College， Mengzi， Yunnan Province， 661100 China

[Abstract] Semen psoraleae， as the plant in the leguminosae， has many pharmacological activities， gradually concerned by people， and the paper reveals the anti-tumor effect of semen psoraleae from the aspects of cell proliferation， cell cycle， apoptosis， cell migration and invasion and tolerance of reversed tumors thus providing basis for the further development of semen psoraleae as the anti-tumor drugs.

[Key words] Semen psoraleae； Tumor； Natural plant

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將腫瘤分為良性和惡性腫瘤，惡性腫瘤常稱為癌癥，是嚴(yán)重威脅人類健康的常見多發(fā)慢性病。目前對于惡性腫瘤的三大主要治療方法分別是藥物治療、放射治療和外科手術(shù)治療[1]，雖然抗腫瘤藥或抗癌藥在腫瘤的綜合治療中占有非常重要的地位，但存在兩大主要障礙：毒性反應(yīng)和產(chǎn)生耐藥性[2-3]。其中毒性反應(yīng)是由于抗腫瘤藥對腫瘤細(xì)胞缺乏足夠的選擇性，在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，對正常組織的細(xì)胞也產(chǎn)生不同程度的損傷，因此毒性反應(yīng)成為化療藥物用量受限的主要因素[4-5]；此外，化學(xué)治療過程當(dāng)中腫瘤細(xì)胞對藥物產(chǎn)生了耐藥性是化療失敗的重要原因，因此是目前臨床上腫瘤化療急需解決的難題[6-8]。

近些年來天然藥用植物以其毒性低、安全范圍廣、資源豐富等優(yōu)點(diǎn)越來越受到人們的關(guān)注[9-10]，從天然藥用植物中尋找高效低毒的活性成分已成為抗腫瘤藥物研發(fā)的熱點(diǎn)之一[11-12]。其中補(bǔ)骨脂在抗腫瘤方面因其潛在的抗腫瘤活性而被進(jìn)一步研究，該文著重介紹補(bǔ)骨脂在腫瘤治療方面的研究進(jìn)展及其可能的機(jī)制，為其進(jìn)一步的研究提供線索和科學(xué)依據(jù)。

1 抑制腫瘤細(xì)胞的增殖

腫瘤作為機(jī)體細(xì)胞異常增殖而形成的新生物，最常見的表現(xiàn)是機(jī)體局部的異常腫塊；而細(xì)胞的異常增殖是腫瘤的重要特征之一，從而導(dǎo)致機(jī)體的不協(xié)調(diào)，損害機(jī)體的各大系統(tǒng)。郭江寧等[13]對補(bǔ)骨脂通過前期處理并用不同比例石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫后，分離得到補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素，然后通過MTT法測定它們對人胃癌細(xì)胞BGG-823的毒性作用，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素可抑制BGG-823的增殖，且抑制作用和藥物濃度呈正相關(guān)。補(bǔ)骨脂酚（bakuchiol）作為補(bǔ)骨脂的單萜類成分，近年來在抗腫瘤作用方面?zhèn)涫荜P(guān)注，周昆等[14]將不同濃度的補(bǔ)骨脂酚作用于肝癌細(xì)胞HepG2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)藥物的作用時(shí)間為2 h時(shí)，對細(xì)胞增殖的影響并不顯著；但隨著作用時(shí)間的延長，補(bǔ)骨脂酚呈現(xiàn)明顯的增殖抑制作用，且在62.5-187.5 μmol/L的藥物濃度范圍內(nèi)呈一定的量效關(guān)系。同樣是從補(bǔ)骨脂中分離的化合物補(bǔ)骨脂乙素（isobavachalcone， IBC）也具有較好的抗腫瘤活性，有研究報(bào)道，隨著IBC濃度的遞增和給藥時(shí)間的延長，其對舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞的增殖抑制作用逐漸加強(qiáng)，增殖抑制率逐漸增加，呈時(shí)間-濃度依賴性[15]。

2 干擾腫瘤細(xì)胞的周期

腫瘤細(xì)胞從一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束的過程稱為細(xì)胞周期，此間經(jīng)歷G1期 （DNA合成前期）、S期 （DNA合成期）、G2期 （DNA合成后期）和M期 （有絲分裂期）4個(gè)時(shí)相，抗腫瘤藥物通過影響或調(diào)控細(xì)胞周期而使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒作用從而延緩細(xì)胞周期的時(shí)相過渡。補(bǔ)骨脂可作用于腫瘤的細(xì)胞周期從而抑制或延緩腫瘤細(xì)胞的增殖。譚敏等[16-17]運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測補(bǔ)骨脂素對乳腺癌MCF-7細(xì)胞的周期變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比，不同濃度的補(bǔ)骨脂素作用24 h后，S期細(xì)胞的比例均減少，G1期和G2期細(xì)胞的比例增加。同樣是補(bǔ)骨脂素作用于乳腺癌MCF-7細(xì)胞，沈麗霞等[18]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，10 μmol/L和30 μmol/L的補(bǔ)骨脂素可顯著增加S期細(xì)胞的比例（P<0.05），表明補(bǔ)骨脂素將MCF-7細(xì)胞周期由G1期向S期推進(jìn)。補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素是一對同分異構(gòu)體，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測二者對肝癌細(xì)胞HepG2周期的影響，觀察給藥組和對照組各時(shí)期的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比，發(fā)現(xiàn)濃度為50 μg/mL的補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對HepG2細(xì)胞的G2期―M期有明顯的阻滯作用[19]。

3 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡

實(shí)體腫瘤的細(xì)胞主要有壞死和凋亡兩種死亡形式，從細(xì)胞生物學(xué)的角度講，藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡可發(fā)揮抗腫瘤作用。目前認(rèn)為，抑制細(xì)胞凋亡比抑制細(xì)胞過度增殖在惡性腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用更為重要。閆偉偉等[20]用不同濃度（50、30、25、20 μg/mL）的補(bǔ)骨脂素作用于人胃癌BGC-803細(xì)胞48 h后，通過流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡的情況，隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞早期凋亡率分別是8.34%、9.47%、28.13%、60.16%，且與空白對照組的3.11%相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），究其作用機(jī)制可能是引起了BGC-803細(xì)胞骨架蛋白F-actin的解聚。袁小芬等[21]在異補(bǔ)骨脂素對人急性早幼粒細(xì)胞HL-60周期的影響實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，發(fā)現(xiàn)異補(bǔ)骨脂素并不會引起細(xì)胞周期的阻滯，而是誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞的早期凋亡，通過RT-PCR和蛋白印跡法的檢測結(jié)果表明，異補(bǔ)骨脂素可以導(dǎo)致促凋亡蛋白Bax上調(diào)和抗凋亡蛋白Bcl-2下調(diào)，從而影響mRNA和蛋白水平的表達(dá)。此外，補(bǔ)骨脂乙素可誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞的凋亡[22-23]，且藥物濃度和凋亡率呈一定的量效關(guān)系，當(dāng)濃度為7 mg/mL時(shí)凋亡率達(dá)到了94.57%，最后通過Western印跡法檢測促凋亡蛋白Bax和Bid、抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl的蛋白表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著給藥濃度的遞增Bax和Bid的表達(dá)明顯增加，Bcl-2的表達(dá)減少，而Bcl-xl無顯著差異。

4 抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲

侵襲與轉(zhuǎn)移是腫瘤最致命的特征，占到了腫瘤相關(guān)死亡率的90 %以上，而遷移又是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程中的重要一環(huán)[24]。據(jù)報(bào)道，胞質(zhì)蛋白（如MMP-2、MMP-9）可被異?；罨腁kt信號通路激活，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲[25]。史毅等[26]研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂乙素能以濃度相關(guān)性下調(diào)MMP-2、MMP-9蛋白及其上游磷酸化Akt的蛋白表達(dá)從而抑制了舌癌細(xì)胞Tca8113的遷移和侵襲能力，為進(jìn)一步的藥物研發(fā)和臨床應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。此外，高、中、低劑量（0.75、0.5、0.25 mg/mL）的補(bǔ)骨脂和蔻仁組成的復(fù)方作用于胃癌SGC7901細(xì)胞24 h后，其侵襲抑制率分別為60.79%、38.81%、8.7%；其中高、中濃度的侵襲細(xì)胞數(shù)都低于對照組（P<0.01）[27]。

5 降低腫瘤細(xì)胞的粘附能力

腫瘤細(xì)胞的粘附特性在維持細(xì)胞的外形、調(diào)節(jié)細(xì)胞的分裂等功能中起著非常重要的作用，而粘附又是腫瘤細(xì)胞侵襲的開始步驟[28]。吳堅(jiān)等[29]將補(bǔ)骨脂復(fù)方設(shè)成高（0.75 mg/mL）、中（0.5 mg/mL）、低（0.25 mg/mL）三個(gè)劑量組，作用于胃癌SGC7901細(xì)胞30、60、90、120 min后，用MTT法檢測其對腫瘤細(xì)胞的粘附能力的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高濃度的補(bǔ)骨脂復(fù)方在每個(gè)時(shí)段均有明顯的腫瘤粘附抑制作用（P<0.05），中濃度的補(bǔ)骨脂復(fù)方在90 min后有抑制腫瘤細(xì)胞粘附的作用（P<0.05），而低濃度的抑制作用出現(xiàn)在120 min的給藥時(shí)間（P<0.05），實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明補(bǔ)骨脂復(fù)方可明顯降低胃癌細(xì)胞SGC7901的粘附能力。

目前一系列的研究結(jié)果證實(shí)，補(bǔ)骨脂在抗腫瘤方面具有良好的功效。其抗腫瘤的作用廣泛且具有多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，涉及到腫瘤生長繁殖的多個(gè)過程，無論是單獨(dú)使用還是聯(lián)合用藥，都表現(xiàn)出很好的抗腫瘤活性。但是，其明確的作用機(jī)制和作用靶點(diǎn)仍未完全闡明，目前的研究報(bào)道多局限于體外的腫瘤細(xì)胞，缺乏大量的臨床實(shí)際研究。因此，有必要對其確切的作用機(jī)制、作用靶點(diǎn)及臨床應(yīng)用做進(jìn)一步研究。此外，除了補(bǔ)骨脂最常見的抗腫瘤活性成分補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂乙素、異補(bǔ)骨脂素外，其他化學(xué)成分的抗腫瘤作用的研究甚少，研究者可以對補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂乙素、異補(bǔ)骨脂素進(jìn)行衍生物的合成和抗腫瘤活性的研究，以期發(fā)現(xiàn)活性更好、專一性更強(qiáng)、毒副作用和耐藥性更小的化合物，為補(bǔ)骨脂在抗腫瘤作用方面提供更多更有說服力的研究。

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（收稿日期：2016-12-09）