銀杏葉中銀杏內(nèi)酯的提取工藝優(yōu)化

張晴晴，喻明軍，曹 帥，顧晶晶

（亳州學(xué)院 生物與化學(xué)工程系，安徽亳州 236800）

銀杏葉中銀杏內(nèi)酯的提取工藝優(yōu)化

張晴晴，喻明軍，曹 帥，顧晶晶

（亳州學(xué)院 生物與化學(xué)工程系，安徽亳州 236800）

采用超臨界流體CO2萃取銀杏葉中銀杏內(nèi)酯，并對(duì)其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化?？疾炝溯腿毫?、萃取溫度、萃取時(shí)間對(duì)萃取率的影響。結(jié)果表明：最佳工藝為萃取壓力25MPa，萃取溫度47℃，分離溫度51℃，分離壓力8MPa，萃取時(shí)間90min。在此工藝條件下的萃取率可達(dá)5.14%。此方法操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、穩(wěn)定性高，具有很高的實(shí)用價(jià)值。

銀杏葉；銀杏內(nèi)酯；超臨界流體CO2；萃取率

銀杏葉，為銀杏科植物銀杏（Ginkgo bilobaL.）的干燥葉，具有較高的藥用價(jià)值?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明，銀杏葉具有斂肺、平喘、活血化瘀、止痛等功效[1]。銀杏葉中主要有效成分為黃酮類(lèi)物質(zhì)和萜內(nèi)酯。由于銀杏葉的有效成分在質(zhì)量冠心病、腦缺血、腦功能障礙、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的清除氧自由基等方面的療效確切，已成為世界醫(yī)藥界研究的熱點(diǎn)[2]。目前銀杏葉內(nèi)酯的提取方法主要是索氏提取法、超聲提取法、微波輔助提取法、超臨界流體CO2萃取法等[3]。其中，超臨界流體CO2萃取法是現(xiàn)代較先進(jìn)的中藥提取方法之一，具有萃取條件易于達(dá)到、選擇性高、無(wú)溶劑殘留且CO2可以循環(huán)使用等優(yōu)點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)采用超臨界流體CO2萃取法對(duì)銀杏葉中的內(nèi)酯進(jìn)行提取，通過(guò)單因素試驗(yàn)對(duì)其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，為進(jìn)一步深入開(kāi)發(fā)利用銀杏內(nèi)酯提供理論基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

HA220-50-06型超臨界萃取裝置：江蘇南通華安超臨界萃取有限公司；DFY-400型多功能粉碎機(jī)：溫嶺市林大機(jī)械有限公司；FA2104B型電子天平：上海越平科學(xué)儀器有限公司；高效液相色譜儀：島津LC-10AT；N2000色譜數(shù)據(jù)工作站；蒸發(fā)光檢測(cè)器ELSD800：美國(guó)Waters公司；JK-200DB型數(shù)控超聲波清洗器：合肥金尼克機(jī)械制造有限公司；TG16-WS/ TG16WS臺(tái)式高速離心機(jī)：湖南湘儀離心機(jī)有限公司；銀杏葉：華佗國(guó)藥股份有限公司；食品級(jí)CO2（純度＞99.9%）：安徽亳州福利氣體有限公司；銀杏內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品：中國(guó)藥品生物制品檢定所；甲醇：TELD色譜純；無(wú)水乙醇（分析純，純度≥99.7%）；其余試劑均為分析純。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 萃取率的計(jì)算

1.2.2 銀杏內(nèi)酯的萃取

將干燥的銀杏葉用多功能粉碎機(jī)粉碎后過(guò)30目篩后置于1L萃取釜I中，設(shè)定儀器參數(shù)，循環(huán)萃取一定時(shí)間后收集分離釜中的萃取物。

1.2.3 銀杏內(nèi)酯測(cè)定方法

參照潘炘等的HPLC方法進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 考察萃取壓力的影響

稱(chēng)取銀杏葉粉末300g，設(shè)定萃取釜I溫度50℃、分離釜I壓力8MPa、分離I溫度51℃，考察不同萃取壓力（10MPa、15MPa、20MPa、25MPa、30MPa、35MPa）對(duì)銀杏內(nèi)酯萃取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 萃取壓力對(duì)萃取率的影響

圖2 萃取溫度對(duì)萃取率的影響

由圖2可知46℃時(shí)銀杏內(nèi)酯的萃取率最大。溫度低于46℃時(shí)，萃取率隨著溫度的增加而增大，溫度高于46℃時(shí)，萃取率隨著溫度的增加而下降。這是由于隨著溫度的增加，CO2的溶解能力增強(qiáng)，因此萃取率增大。同時(shí)溫度太高會(huì)影響CO2的密度，使其對(duì)銀杏內(nèi)酯的溶解能力下降。因此萃取溫度選

由圖1可以看出，隨著壓力增加，銀杏內(nèi)酯的萃取率增大，在35MPa達(dá)到最大。但壓力過(guò)大不利于操作安全（設(shè)備最大壓力35MPa），故萃取壓力選擇25MPa。

2.2 考察萃取溫度的影響

稱(chēng)取銀杏葉粉末300g，設(shè)定萃取釜I壓力25MPa、分離釜I壓力8MPa、分離I溫度51℃，考察不同萃取溫度（40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、53℃）對(duì)銀杏內(nèi)酯萃取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖2。擇46℃。

2.3 考察萃取時(shí)間的影響

稱(chēng)取銀杏葉粉末300g，設(shè)定萃取釜I壓力25MPa、萃取釜I溫度46℃、分離釜I壓力8MPa、分離I溫度51℃，考察不同萃取時(shí)間（20min、30min、60min、90min、120min、150min）對(duì)萃取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 萃取時(shí)間對(duì)萃取率的影響

由圖3 可知銀杏內(nèi)酯的萃取率隨著萃取時(shí)間的增加而增大。在20～90min增長(zhǎng)趨勢(shì)較大，時(shí)間超過(guò)90min后增長(zhǎng)趨勢(shì)較緩。這是由于萃取時(shí)間的延長(zhǎng)有利于銀杏內(nèi)酯與CO2流體間的溶解平衡，使萃取率提高，但是萃取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，CO2流體的選擇性會(huì)降低同時(shí)會(huì)劇烈增加能耗，增大成本。因此選擇萃取時(shí)間為90min。

3 結(jié)束語(yǔ)

我國(guó)銀杏葉資源豐富，價(jià)格低廉。通過(guò)對(duì)銀杏葉內(nèi)酯的超臨界萃取工藝進(jìn)行了研究，篩選出最佳的工藝條件：萃取壓力為25MPa，萃取溫度為46℃，萃取時(shí)間為90min。在此最佳工藝條件下的萃取率為5.14%。說(shuō)明該法穩(wěn)定可行，且操作簡(jiǎn)便，具有推廣意義。

[1] 中華人民共和國(guó)藥典[S].2015：316.

[2] 楊義芳，孔德云.中藥提取分離手冊(cè)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009：204.

[3] 田青壓，鞏麗麗.銀杏內(nèi)酯研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué).2016，14（8）：838-840.

Optimization of Extraction Process of Ginkgolides from Ginkgo Leaves

Zhang Qing-qing，Yu Ming-jun，Cao Shuai，Gu Jing-Jing

Supercritical fluid CO2was used to extract ginkgolides from Ginkgo biloba leaves and its extraction process was optimized.The effects of extraction pressure，extraction temperature and extraction time on the extraction rate were investigated.The results showed that the optimum extraction conditions were extraction pressure 25MPa，extraction temperature 47 ℃，separation temperature 51 ℃，separation pressure 8MPa，extraction time 90min The extraction rate in this process can reach 5.14%.This method is simple，reproducible，high stability，with high practical value.

Ginkgo biloba；Ginkgolide；Supercritical fl uid CO2；Extraction rate

R284.2

：A

：1003–6490（2017）04–0115–02

2017–04–11

安徽省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（KJ2017A707）；校級(jí)項(xiàng)目（BSKY201526）；校級(jí)項(xiàng)目（BSHX1505）。

張晴晴（1988—），女，安徽阜陽(yáng)人，助教，主要研究方向?yàn)橹兴幪崛∨c分離。