酶解條件對(duì)麥麩低聚木糖含量及其性質(zhì)的影響

王偉旭，汪麗萍，于 雷，譚 斌，韓 偉，劉艷香，田曉紅

(1.國(guó)家糧食局科學(xué)研究院，北京 100037；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林 長(zhǎng)春 130118)

低聚木糖是植物細(xì)胞壁中阿拉伯木聚糖的分解產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)一般是由2～7個(gè)木糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成的聚合性糖，又稱為木寡糖[1]。低聚木糖作為國(guó)際上頗受關(guān)注的低聚糖具有諸多的功能特性，例如，能夠調(diào)節(jié)腸道菌群，有助于有益腸道菌群增長(zhǎng)；有利于糖尿病者，肥胖者等“三高人群”食用；具有抗氧化，提高免疫力等作用，因此被廣泛應(yīng)用于食品、飼料以及醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中[2-3]。然而諸多的功能特性通常由低聚木糖的結(jié)構(gòu)所決定，其中木二糖、木三糖是低聚木糖的有效成分[4]，同時(shí)低聚木糖的聚合度對(duì)其產(chǎn)品的理化性質(zhì)和功能特性具有很大的影響[5]。

目前國(guó)內(nèi)對(duì)于低聚木糖的研究主要集中于酶解條件變化對(duì)其含量和平均聚合度的影響，或以低聚木糖含量和平均聚合度為指標(biāo)制備出的低聚木糖進(jìn)行功能性評(píng)價(jià)[6-7]，而不同酶解條件對(duì)低聚木糖功能特性的影響未見報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)采用木聚糖酶酶解麥麩水不溶性阿拉伯木聚糖制備低聚木糖，探討酶解溫度、酶解時(shí)間和加酶量對(duì)低聚木糖含量、平均聚合度、糖組成以及益生元活性的影響，為低聚木糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

小麥麩皮水不溶性阿拉伯木聚糖：本實(shí)驗(yàn)室堿法提取制得，阿拉伯木聚糖含量67.1%。

木糖、木二糖、木三糖、木四糖、木五糖、木六糖和木七糖標(biāo)準(zhǔn)品：SIGMA公司；乳酸、乙酸、丙酸、丁酸標(biāo)準(zhǔn)品：北京蘭博利德公司；木聚糖酶：諾維信生物科技有限公司；青春雙歧桿菌(Bifidobacteriumadolescentis)ATCC 15703：中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院工業(yè)微生物菌種保藏中心；其他試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

SHZ-88A水浴恒溫振蕩器：太倉(cāng)市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠；低速離心機(jī)：安慰中科中佳科學(xué)儀器有限公司；3-18K低溫高速離心機(jī)：德國(guó)SIGMA公司； DGG-9000型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海森信試驗(yàn)儀器有限公司；T6紫外可見分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；LGJ-10D冷凍干燥機(jī)：北京四環(huán)科學(xué)儀器廠有限公司；PL3002-IC電子天平：梅特勒—托利多儀器有限公司；ICS-3000離子色譜：美國(guó)戴安公司；YQX-II型厭氧培養(yǎng)箱：上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司；MLS-3781L高壓滅菌器：日本Panasonic公司；超凈工作臺(tái)：美國(guó)Thermo Scientific公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 低聚木糖制備工藝[8]

準(zhǔn)確稱取一定量的麩皮水不溶性阿拉伯木聚糖，均勻分散于pH為5.0，0.1 mol/L的NaAC緩沖溶液中，配制成底物濃度為4%的懸浮液，加入定量的木聚糖酶后在一定溫度下水浴振蕩一定時(shí)間后，在沸水浴中滅酶10 min，冷卻后離心(4 000 r/min，20 min)，收集上清液。搖勻后一部分上清液測(cè)定還原糖和可溶性總糖含量，另一部分上清液冷凍干燥制成粉末狀。

1.3.2 酶解條件設(shè)定

設(shè)置酶解時(shí)間2 h，加酶量0.50 g/L，在酶解溫度分別為40、45、50、55、60 ℃的條件下水浴振蕩。研究酶解溫度對(duì)低聚木糖性質(zhì)的影響。

設(shè)置酶解溫度50 ℃，加酶量0.50 g/L,在酶解時(shí)間分別為1、1.5、2、2.5、3 h的條件下水浴振蕩。研究酶解時(shí)間對(duì)低聚木糖性質(zhì)的影響。

設(shè)置酶解時(shí)間2 h，酶解溫度50 ℃，在加酶量分別為0.125、0.250、0.50、1、2 g/L的條件下水浴振蕩。研究加酶量對(duì)低聚木糖性質(zhì)的影響。

1.3.3 木聚糖酶活力測(cè)定[9]

參考飼料添加劑木聚糖酶活力的測(cè)定分光光度計(jì)法，GB/T 23874—2009。

1.3.4 低聚木糖含量測(cè)定

AXOs含量測(cè)定參考晁正[10]方法，以酶解液中還原糖含量表示。采用3,5-二硝基水楊酸法(DNS)測(cè)定(以木糖計(jì)，mg/mL)。

1.3.5 總還原糖含量測(cè)定

參考張軍華[11]方法稍作修改。取一定量的樣品溶液加入同體積濃度為8%的H2SO4于121 ℃下反應(yīng)1 h，冷卻后用15%的NaOH溶液中和反應(yīng)液，過濾后采用DNS法測(cè)定。

平均聚合度(DP)=可溶性還原糖的含量/還原糖的含量

1.3.6 低聚木糖糖組成測(cè)定

參考Swennen[12]方法稍作修改。準(zhǔn)確稱取5 mg待測(cè)樣品溶于5 mL超純水中，經(jīng)離心、過濾后，進(jìn)樣10 μL。

色譜條件：色譜柱：Carbopac PA100分析柱(4×250 mm)，Carbopac PA100保護(hù)住(4×50 mm)；流速1 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：30 ℃；檢測(cè)器：脈沖安培檢測(cè)器，AgCl；淋洗液：100 mmol/L NaOH(A)和500 mmol/L NaOAC(B)進(jìn)行二元梯度洗脫；洗脫程序：0～30 min時(shí)B相濃度由0 mmol/L線性增至120 mmol/L,30～40 min時(shí)以100%A沖洗系統(tǒng)。

1.3.7 厭氧培養(yǎng)

1.3.7.1 培養(yǎng)基制備[6]

混合0.2 g無水CaCl2和0.48 g MgSO4在300 mL蒸餾水中直到溶解，加500 mL蒸餾水邊攪拌邊緩慢加入1 g K2HPO4、1 g KH2PO4、10 g NaHCO3、2 g NaCl，繼續(xù)攪拌直到所有鹽全部溶解，加入200 mL蒸餾水，混勻配制成鹽溶液。分別稱取2.5 g蛋白胨、2.5 g胰胨、5 g酵母粉、5 g葡萄糖、20 mL鹽溶液、0.25 g L-半胱氨酸鹽酸鹽，500 mL蒸餾水于1 000 mL燒杯中配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基，經(jīng)過煮沸驅(qū)氧后，分裝，滅菌，轉(zhuǎn)入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱中，添加還原劑和調(diào)節(jié)pH值為7.0，最后接種。

增殖培養(yǎng)時(shí)將適量樣品加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中代替葡萄糖，滅菌，添加還原劑和調(diào)節(jié)pH值，分別在6、12、24 h定時(shí)取樣分析檢測(cè)。

1.3.7.2 菌體濃度測(cè)定[6]

比濁法和干重法相結(jié)合測(cè)定發(fā)酵液中菌體濃度。吸取10 mL菌體母液進(jìn)行離心，菌體經(jīng)生理鹽水洗滌3次后用生理鹽水定容至10 mL，按一定梯度吸取上述經(jīng)搖勻的菌液，用生理鹽水稀釋至5 mL，以生理鹽水為空白，用分光光度計(jì)在 620 nm測(cè)定吸光度，同時(shí)測(cè)定上述一定體積菌液的固含量，根據(jù)吸光度和固含量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。分別在6、12、24 h取一定量的發(fā)酵液離心后(3 000 r/min，15 min)，菌體經(jīng)生理鹽水洗滌3次，用生理鹽水稀釋至同等體積后搖勻，以生理鹽水為空白測(cè)定吸光值。

1.3.7.3 有機(jī)酸含量測(cè)定

參考趙夢(mèng)麗[13]方法稍作改動(dòng)。分別取6、12、24 h發(fā)酵液經(jīng)10 000 r/min離心10 min，上清液經(jīng)超純水適當(dāng)稀釋后過濾，用離子色譜進(jìn)行測(cè)定。

色譜條件：色譜柱：IonPac AS11-HC(4×250 mm)分析柱，IonPac AG11-HC(4×50 mm)保護(hù)柱；流速：0.5mL/min；進(jìn)樣量：25 μL；柱溫：30 ℃；檢測(cè)器：電導(dǎo)檢測(cè)器；抑制器型號(hào)：ASRs-4mm；淋洗液：A為100 mmol/L NaOH，B為超純水，0～7 min 4%A，7.1～15 min 20%A，15.1～22 min 40%A，22.1～33 min 4%A。

1.3.8 數(shù)據(jù)處理

所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，數(shù)據(jù)處理采用Excel和SPSS 17進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 酶解條件對(duì)低聚木糖含量的影響

不同酶解條件對(duì)低聚木糖含量影響見圖1。由圖1a可知，酶解溫度對(duì)低聚木糖含量影響較大，隨著溫度的升高低聚木糖含量顯著增加，當(dāng)酶解溫度從40 ℃升高至50 ℃時(shí)，低聚木糖含量從74 mg/g增至95 mg/g，提高了約28%，可能由于隨著酶解溫度的增加，使酶與底物中間體轉(zhuǎn)化為目標(biāo)物的速度加快，在最適溫度50 ℃下木聚糖酶能夠長(zhǎng)時(shí)間發(fā)揮作用而不失活；繼續(xù)增加溫度低聚木糖含量反而降低，由于酶是蛋白體，溫度升高會(huì)降低酶的穩(wěn)定性，使一部分酶失活。由圖1b可看出，酶解時(shí)間由1 h延長(zhǎng)至2 h時(shí)，低聚木糖含量緩慢增加，當(dāng)繼續(xù)增加酶解時(shí)間含量反而下降，可能由于隨著時(shí)間的延長(zhǎng)酶與底物接觸漸漸充分使得更易獲取目標(biāo)物，但隨著時(shí)間的推移酶的活性降低導(dǎo)致低聚木糖含量下降。由圖1c顯示，加酶量由0.125 g/L增至1.0 g/L時(shí)，低聚木糖含量迅速增加，當(dāng)超過1 g/L時(shí)，含量下降?？赡苡捎谳^小的加酶量不能夠充分的降解底物導(dǎo)致低聚木糖含量低，隨著加酶量的增加單位體積水解液中酶分子數(shù)量提高，使得酶分子與底物充分結(jié)合，提高反應(yīng)效率。綜上所述，酶解溫度約50 ℃，酶解時(shí)間約2 h和加酶量約1 g/L時(shí)，低聚木糖含量最大。

圖1 酶解條件對(duì)低聚木糖含量的影響

2.2 酶解條件對(duì)低聚木糖糖組成的影響

表1～表3顯示了不同酶解條件對(duì)AXOs糖組成的影響。由表可知不同酶解溫度、酶解時(shí)間和加酶量獲得的AXOs其糖組成主要由木糖、木二糖、木三糖和木四糖組成，其中木二糖和木三糖為主要成分。文獻(xiàn)表明[14]木二糖、木三糖和木四糖混和組分的培養(yǎng)基對(duì)雙歧桿菌的增值效果最好。由表1可知，木糖和木四糖的含量隨著酶解溫度的增加而增加，當(dāng)酶解溫度為50 ℃時(shí)木四糖相對(duì)含量達(dá)到最大；木三糖含量隨著酶解溫度由40 ℃增加至50 ℃時(shí)沒有明顯變化，繼續(xù)增加酶解溫度，木三糖含量減小；酶解溫度的變化對(duì)木二糖相對(duì)含量影響較小。由表2可看出，木糖和木四糖含量隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，當(dāng)酶解時(shí)間為2 h時(shí)，木四糖相對(duì)含量達(dá)到最大；當(dāng)酶解時(shí)間由1 h延長(zhǎng)至2 h時(shí)木二糖相對(duì)含量緩慢增加，而木三糖相對(duì)含量大幅度下降，可能由于隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，木三糖之間的1,4-β糖苷鍵被內(nèi)切型木聚糖甘酶斷裂，被分解為木糖和木二糖。由表2可知，加酶量對(duì)木糖和木三糖相對(duì)含量影響較明顯，隨著加酶量的增加，木三糖相對(duì)含量大幅度下降，而木糖相對(duì)含量明顯增加；木二糖和木四糖相對(duì)含量隨著加酶量的增加而增加。綜上所述，酶解時(shí)間和加酶量對(duì)木三糖的產(chǎn)生具有很大影響，在短時(shí)間和低加酶量條件下有利于木三糖的產(chǎn)生，當(dāng)酶解時(shí)間和加酶量越大時(shí)木三糖越易分解為木糖或木二糖，導(dǎo)致木三糖相對(duì)含量減小；酶解溫度、酶解時(shí)間和加酶量的增加均有利于木四糖的產(chǎn)生，當(dāng)酶解溫度為50 ℃，酶解時(shí)間為2 h和加酶量為1 g/L時(shí)木四糖相對(duì)含量達(dá)到最大，而且木二糖：木三糖：木四糖的比值最小。

表1 酶解溫度對(duì)低聚木糖糖組成的影響

表2 酶解時(shí)間對(duì)低聚木糖糖組成的影響

表3 加酶量對(duì)低聚木糖糖組成的影響

注：a,b和c表示不同酶解條件下制備的低聚木糖糖組成的差異性，不同小寫字母表示處理在P<0.05水平差異顯著。

2.3 酶解條件對(duì)低聚木糖平均聚合度的影響

酶解條件對(duì)低聚木糖平均聚合度的影響見圖2。由圖2可知，通過不同酶解條件得到的低聚木糖平均聚合度均小于5。由圖2a顯示，隨著酶解溫度的增加，總還原糖和還原糖的含量均增加，而平均聚合度呈下降趨勢(shì)，當(dāng)酶解溫度為50 ℃時(shí)，總還原糖濃度和還原糖濃度達(dá)到最大，在此條件下的低聚木糖平均聚合度趨于最?。挥蓤D2b可看出，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)總還原糖含量無明顯變化，還原糖含量逐漸增加，平均聚合度減小，當(dāng)酶解時(shí)間增加至2 h時(shí)，還原糖含量達(dá)到最大，低聚木糖平均聚合度最?。挥蓤D2c可知，加酶量對(duì)總還原糖含量影響作用小，而對(duì)還原糖含量影響較大，當(dāng)加酶量由0.125 g/L增至1 g/L時(shí)，還原糖含量達(dá)到最大，總還原糖含量趨于平穩(wěn)，此時(shí)低聚木糖平均聚合度最小?？傊?，不同酶解條件對(duì)低聚木糖平均聚合度影響較大，當(dāng)酶解溫度50 ℃，酶解時(shí)間2 h和加酶量1 g/L時(shí)低聚木糖平均聚合度趨于最小。

圖2 酶解條件變化對(duì)低聚木糖平均聚合度的影響注：平均聚合度=可溶性還原糖含量/還原糖含量。

2.4 不同酶解條件制得低聚木糖對(duì)益生元活性的影響

2.4.1 不同酶解條件制得低聚木糖對(duì)菌體濃度的影響

不同酶解溫度、酶解時(shí)間和加酶量制得的低聚木糖對(duì)青春雙歧桿菌增值情況的影響見圖3。由圖3可知，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)不同酶解條件下制得的低聚木糖對(duì)菌種增值變化規(guī)律均相似，其中發(fā)酵時(shí)間由0 h增至6 h時(shí)呈對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)，隨后由6 h延長(zhǎng)至24 h時(shí)呈平穩(wěn)或緩慢生長(zhǎng)的趨勢(shì)。不同酶解條件下制得的低聚木糖對(duì)菌種均有增值作用，但菌體濃度增加量不盡相同，由圖3a可知，酶解溫度越高得到的低聚木糖用于增值菌體的效果越好，當(dāng)溫度達(dá)到50 ℃時(shí)，菌體濃度自0.07 g/L增至最大值0.219 g/L,增加了3.1倍。由圖3b可看出，WUAX經(jīng)不同酶解時(shí)間處理得到的低聚木糖培養(yǎng)菌種時(shí)發(fā)酵液中起始菌體濃度為0.07g/L，當(dāng)代謝由酶解時(shí)間1 h延長(zhǎng)至2 h制備的低聚木糖時(shí)，菌體濃度呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，當(dāng)酶解時(shí)間為2 h時(shí)，菌體濃度達(dá)到最大，繼續(xù)增加酶解時(shí)間制備AXO將不利于菌體增值。圖3c可知，添加不同加酶量制得的低聚木糖作為碳源培養(yǎng)青春雙歧桿菌時(shí)發(fā)酵液中初始菌體濃度為0.06 g/L，隨著加酶量的增加，發(fā)酵液中菌體濃度呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，當(dāng)菌體代謝加酶量為1 g/L制備的低聚木糖時(shí)，發(fā)酵液中菌體濃度達(dá)到最大，其值為0.339 g/L，增加到5.65倍，此結(jié)果與徐勇[15]實(shí)驗(yàn)中菌體增長(zhǎng)倍數(shù)相一致。綜上所述，當(dāng)酶解溫度50 ℃，酶解時(shí)間2 h和加酶量1 g/L條件下得到的低聚木糖用于增值青春雙歧桿菌的效果最好。結(jié)合前述研究結(jié)果可得出：當(dāng)在一定酶解條件下得到的低聚木糖含量最高，平均聚合度最小，木二糖，木三糖和木四糖的含量比值最小時(shí)，低聚木糖增值青春雙歧桿菌的效果最佳。

圖3 不同酶解條件制得低聚木糖對(duì)發(fā)酵液中菌體濃度的影響 注：在發(fā)酵0 h時(shí)，不同酶解溫度和酶解時(shí)間制備的低聚木糖培養(yǎng)菌種時(shí)發(fā)酵液中菌體濃度均為0.07 g/L；在發(fā)酵0 h時(shí)，不同加酶量制備的低聚木糖培養(yǎng)菌種時(shí)發(fā)酵液中菌體濃度均為0.06 g/L；a,b和c表示在相同發(fā)酵時(shí)間時(shí)，不同酶解條件下制備的低聚木糖培養(yǎng)菌種時(shí)菌體濃度差異性, 不同小寫字母表示處理在P<0.05水平差異顯著。

2.4.2 不同酶解條件得到的低聚木糖對(duì)菌種代謝產(chǎn)物的影響

青春雙歧桿菌代謝低聚木糖后發(fā)酵液的pH值均有明顯下降，這是因?yàn)殡p歧桿菌代謝糖類化合物時(shí)產(chǎn)生有機(jī)酸的影響。表4顯示了不同酶解條件得到的低聚木糖培養(yǎng)青春雙歧桿菌時(shí)對(duì)發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的影響。由表4～表6可知，以不同酶解溫度、酶解時(shí)間和加酶量產(chǎn)生的低聚木糖作為碳源培養(yǎng)青春雙歧桿菌時(shí)代謝產(chǎn)物主要為乳酸、乙酸和丙酸，其中乙酸含量最多；所有碳源發(fā)酵時(shí)，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，乳酸、乙酸和丙酸的含量均有明顯增加，當(dāng)發(fā)酵時(shí)間為24 h時(shí)乙酸和丙酸含量達(dá)到最大，乳酸含量趨于平穩(wěn)或稍有降低，這與發(fā)酵液中pH值的變化趨勢(shì)相一致。表4表明了青春雙歧桿菌代謝經(jīng)不同酶解溫度處理獲得的低聚木糖時(shí)發(fā)酵液中代謝物含量變化，在發(fā)酵12 h時(shí)，菌種代謝酶解溫度由40 ℃升高至50 ℃制備的低聚木糖時(shí)發(fā)酵液中總有機(jī)酸含量逐漸上升，繼續(xù)增加酶解溫度制備低聚木糖培養(yǎng)青春雙歧桿菌時(shí)發(fā)酵液中的總有機(jī)酸含量逐漸下降；由酶解溫度為45 ℃得到的低聚木糖，當(dāng)培養(yǎng)24 h時(shí)發(fā)酵液中乙酸含量最大，占總有機(jī)酸的54.81%，酶解溫度為50 ℃的次之，占總有機(jī)酸含量的52.60%，當(dāng)代謝酶解溫度為50 ℃制備的低聚木糖時(shí)丙酸含量最大，占總有機(jī)酸含量的41.42%。青春雙歧桿菌代謝經(jīng)不同酶解時(shí)間處理得到的低聚木糖產(chǎn)生的代謝物含量。由表5可見，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)得到的低聚木糖培養(yǎng)菌種時(shí)發(fā)酵液中總有機(jī)酸含量逐漸增加，當(dāng)酶解時(shí)間為2 h時(shí)總有機(jī)酸含量達(dá)到最大為3.08 g/L；酶解時(shí)間為1.5 h得到的低聚木糖在發(fā)酵24 h時(shí)產(chǎn)生的乙酸含量最多，酶解時(shí)間為2 h的次之，丙酸含量在發(fā)酵酶解時(shí)間為2 h得到的低聚木糖時(shí)達(dá)到最大。表6顯示青春雙歧桿菌代謝經(jīng)添加不同加酶量得到的低聚木糖產(chǎn)生代謝物的含量，當(dāng)加酶量由0.125 g/L增至0.25 g/L所得到的低聚木糖培養(yǎng)24 h時(shí)，發(fā)酵液中總有機(jī)酸、乙酸和丙酸含量均達(dá)到最大，當(dāng)繼續(xù)增加加酶量時(shí)乙酸和丙酸含量均無明顯變化。因此結(jié)合不同酶解條件下得到的低聚木糖對(duì)青春雙歧桿菌增值影響結(jié)果可得出，酶解條件對(duì)青春雙歧桿菌產(chǎn)生代謝物含量的影響與菌種增值變化趨勢(shì)相一致。

表4 不同酶解溫度下得到的低聚木糖對(duì)發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的影響

表5 不同酶解時(shí)間下得到的低聚木糖對(duì)發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的影響

表6 不同加酶量下得到的低聚木糖對(duì)發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的影響

注： a,b和c表示在相同發(fā)酵時(shí)間時(shí)，不同酶解條件制備的低聚木糖培養(yǎng)菌種時(shí)代謝產(chǎn)物含量的差異性，不同小寫字母表示處理在P<0.05水平差異顯著。

3 結(jié)論

通過研究不同酶解條件對(duì)麥麩低聚木糖含量、平均聚合度、糖組成和益生元活性的影響可得出，在一定的范圍內(nèi)隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)、酶解溫度和加酶量的增加，低聚木糖含量增加，平均聚合度降低，木二糖，木三糖和木四糖含量比值減??；不同酶解條件下得到的低聚木糖培養(yǎng)青春雙歧桿菌的菌體濃度含量均有不同程度的增加，青春雙歧桿菌代謝不同酶解條件下得到的低聚木糖發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物均包含乳酸、乙酸和丙酸，乙酸含量最高，其產(chǎn)酸量變化趨勢(shì)與菌體濃度和低聚木糖含量相一致，與低聚木糖平均聚合度相反；當(dāng)酶解溫度50 ℃，酶解時(shí)間2 h和加酶量1 g/L時(shí)，低聚木糖含量達(dá)到最大為101 mg/g，平均聚合度降至最小3.23，菌體濃度增值倍數(shù)達(dá)到最大為5.65倍；可得出低聚木糖結(jié)構(gòu)和益生元活性兩者之間的關(guān)系：隨著酶解條件的變化，低聚木糖含量最大時(shí)，平均聚合度趨于最小，木二糖、木三糖和木四糖的相對(duì)含量比值趨于最小，低聚木糖的益生元活性最佳。

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