膠體鈀化學(xué)改進(jìn)劑石墨爐原子吸收光譜法測定血中鉛

溫賢運(yùn) 成都市青白江區(qū)疾病預(yù)防控制中心 （四川 成都 610300）

膠體鈀化學(xué)改進(jìn)劑石墨爐原子吸收光譜法測定血中鉛

溫賢運(yùn) 成都市青白江區(qū)疾病預(yù)防控制中心 （四川 成都 610300）

目的：觀察膠體鈀化學(xué)改進(jìn)劑石墨爐原子吸收光譜法測定血中鉛的效果。方法：用5%硝酸沉淀血樣中蛋白質(zhì)，選用膠體鈀化學(xué)改進(jìn)劑，進(jìn)行石墨爐原子吸收光譜法測定。結(jié)果：該方法線性范圍是0～100μg/L，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9996，檢出限為0.7μg/L，樣品加標(biāo)回收率是97.3%～100.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差1.4%～1.7%。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測定結(jié)果為（123±12）μg/L和（314±13）μg/L，符合證書值范圍。結(jié)論：該方法方便快速、準(zhǔn)確度高，可以用于血液中鉛含量測定。

膠體鈀 石墨爐原子吸收光譜法 血液 鉛

鉛是一種生活中接觸較多，污染環(huán)境的同時(shí)危害人體健康的常見重金屬物質(zhì)[1]。鉛和鉛化合物可通呼吸道、消化道、直接接觸等方式進(jìn)入人體，對人體神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、造血系統(tǒng)造成損傷[2]。血中鉛可直接反應(yīng)近期接觸鉛的水平，目前國際上測定血鉛方法較多，石墨爐原子吸收光譜法應(yīng)用較為廣泛，但不同基體改進(jìn)劑和消解方法都會影響檢測過程[3～5]。本研究采用5%硝酸溶液處理樣品，膠體鈀為基體改進(jìn)劑，進(jìn)行石墨爐原子吸收光譜法檢測血中鉛，該方法檢測準(zhǔn)確、快速、靈敏。

1.資料與方法

1.1 一般資料

儀器與試劑：原子吸收分光光度計(jì)（PinAAcle900T PE公司），配鉛空心陰極燈和自動進(jìn)樣器，熱解涂層石墨管（PE公司），鉛標(biāo)準(zhǔn)儲備液1000mg/L（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，GBWO8619），凍干牛血鉛、鎘成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（國家以及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，GBW09139和GBW09140），膠體鈀（專利號：ZL201010028121.9），BV-III級硝酸（北京翰隆達(dá)科技發(fā)展有限公司）。

1.2 方法

儀器設(shè)置條件：燈電流5mA，波長283.3nm，狹縫0.6nm，樣品進(jìn)樣體積15μL，膠體鈀體積3μL，Zeeman 2磁場模式背景校正，石墨爐升溫程序設(shè)定如下：干燥100?C，升溫速率10?C/s，維持20s；干燥130?C，升溫速率10?C/s，維持20s；灰化1000?C，升溫速率40?C/s，維持20s；原子化2000?C，維持3s；清除2500?C，維持10s。

樣品收集與處理：采集職業(yè)體檢人群空腹靜脈血3～4mL，抗凝處理后吸取0.5mL全血于5mL離心管中，然后每管加入1.5mL硝酸溶液（5%），旋渦混合器上強(qiáng)力振搖3～5min，12000r/min離心10min，取上清。標(biāo)準(zhǔn)樣品制備：檢測前采用硝酸（1%）配置100μg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)液，采用儀器將標(biāo)準(zhǔn)液自動稀釋為0.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、40.0μg/L、80.0μg/L、100.0μg/L等6個(gè)梯度作為標(biāo)準(zhǔn)系列。

2.結(jié)果

2.1 硝酸酸度選擇

實(shí)驗(yàn)中分別采用1%、3%、5%、8%、10%不同濃度硝酸作為萃取劑沉淀血樣蛋白，結(jié)果顯示硝酸濃度為1%和3%時(shí)，樣品分層不完全，硝酸濃度為8%、10%時(shí)，樣品易出現(xiàn)血凝現(xiàn)象，且高酸度會影響石墨管使用壽命，故最后選擇5%硝酸溶液處理血液樣品。

2.2 灰化溫度和時(shí)間選擇

灰化作用是在不損失待測元素情況下減少甚至基本排除基體影響。灰化溫度過高會損失待測元素，使重復(fù)測量數(shù)據(jù)可靠性變差，溫度過低產(chǎn)生較大背景值，影響最終檢測結(jié)果?；一瘯r(shí)間與樣品體積和性質(zhì)有關(guān)，通過實(shí)驗(yàn)，本文選擇1000?C，維持20s灰化。

2.3 原子化溫度和時(shí)間選擇

原子化是指在一定溫度下分解元素為自由原子的過程，待測元素性質(zhì)不同，所需原子化溫度不同，不同樣品中檢測同一元素，可能所需原子化溫度也不同。原子化時(shí)間為吸收信號降低至基線所用時(shí)間，在保證完全原子化同時(shí)，原子化時(shí)間越短越好，經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定，原子化溫度為2000?C時(shí)，維持時(shí)間只需3s，故本文選擇設(shè)定原子化溫度為2000?C。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

在測定條件下，鉛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行GF-AAS分析，樣品空白進(jìn)行10次測定，鉛的線性范圍是0～100μg/L，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9996，檢出限為0.7μg/L。

2.5 精密度與回收率

將正常人血樣分別加入20.0μg/L、40.0μg/L、80.0μg/L的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過儀器進(jìn)行測定，精密度與回收率見表1。2.6標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測定

采用同樣方法檢測凍干牛血鉛、鎘成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，檢測結(jié)果符合證書值范圍，見表2。

表1.精密度與回收率檢測結(jié)果(n=6)

3.討論

鉛進(jìn)入人體之后，只有少量經(jīng)尿液或汗液排除，數(shù)小時(shí)后鉛會融入血液，對人體血液功能造成嚴(yán)重影響，從而引發(fā)貧血，表現(xiàn)為頭暈、困乏、無力、便秘等現(xiàn)象，嚴(yán)重者會出現(xiàn)消化道潰瘍、動脈硬化。兒童鉛中毒會出現(xiàn)失眠、食欲下降、發(fā)育延遲現(xiàn)象，有的還會伴隨聽覺障礙、智力低下。對于處于生長發(fā)育階段的兒童，鉛吸收率和吸收量都遠(yuǎn)高于成人[6]。

表2.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)鉛含量測定結(jié)果(n=6，±s，μg/L)

表2.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)鉛含量測定結(jié)果(n=6，±s，μg/L)

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號 標(biāo)準(zhǔn)值 檢測值GBW09139 124±14 123±12 GBW09140 310±13 314±13

目前檢測血中鉛含量的常見方法是石墨爐原子吸收光譜法，該方法將石墨材料制成管形或杯形原子化器，電流加熱原子化后分析原子吸收情況，有效避免原子濃度被火焰氣體所稀釋，提高分析靈敏度和準(zhǔn)確性，在痕量金屬元素檢測方面具有較大優(yōu)勢。然而不同化學(xué)改進(jìn)劑和消解方式會影響檢測過程，本研究選取膠體鈀化學(xué)改進(jìn)劑，進(jìn)行石墨爐原子吸收光譜法檢測。

鈀是一種常用無機(jī)化學(xué)改進(jìn)劑，普通鈀鹽因其化學(xué)形態(tài)、作用受樣品基體影響，檢測靈敏度較低。膠體鈀在干燥階段可通過“晶體嵌套效應(yīng)”避免待測元素?fù)p失，提高灰化溫度，降低或消除基體干擾，減少背景值。元素保持穩(wěn)定利于原子吸收檢測，提高檢測準(zhǔn)確度和靈敏度。本研究經(jīng)實(shí)驗(yàn)選定5%硝酸溶液作為萃取液，有效沉淀血樣中蛋白質(zhì)，將鉛釋放入硝酸溶液，減少基體干擾，操作相對于微波消解技術(shù)更為簡單方便。有研究報(bào)道，可用TritionX-100直接稀釋法處理樣品，但對于連續(xù)大批樣品檢測，存在稀釋樣品粘稠度較大、樣品在進(jìn)樣管粘附致使體積不準(zhǔn)等缺陷。本研究還對灰化和原子化溫度和時(shí)間進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)灰化溫度為1000?C，維持時(shí)間20s時(shí)，基體干擾相對最小，原子化溫度為2000?C，維持時(shí)間3s，可完全原子化。在設(shè)定條件下，該方法檢測樣品加標(biāo)回收受率為97.3%～100.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%～1.7%，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測定結(jié)果符合證書值范圍。

綜上所述，血樣經(jīng)5%硝酸溶液處理，以膠體鈀作為化學(xué)改進(jìn)劑，石墨爐原子吸收光譜法檢測血液中鉛含量，具有簡便快速、精確靈敏等有點(diǎn)，可用于大批量樣品檢測。

[1] 張英, 周長民.重金屬鉛污染對人體的危害[J].遼寧化工, 2007, 36(6)395-397.

[2] 勞哲, 江恩源, 韋麗麗.膠體鈀基體改進(jìn)劑對石墨爐原子吸收光譜法測定尿中的鉛的應(yīng)用研究[J].醫(yī)藥前沿, 2015,28(15):13-14.

[3] 錢國英, 李綱.以磷酸二氫銨為基體改進(jìn)劑的石墨爐原子吸收光譜法直接測定全血中的鉛[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2013,23(5):1100-1103.

[4] 張斯恩, 張貝基, 譚紅麗.石墨爐原子吸收法測定全血標(biāo)本鉛含量的3種前處理方法[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床, 2014,11(13):1778-1780.

[5] 周學(xué)猛, 段江平, 孫仕萍.氯化鈀-磷酸二氫銨基體改進(jìn)劑石墨爐原子吸收法測定血鉛[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2010,20(6):1331-1332.

[6] 蘇長征, 陳宏大, 隆興國, 等.尿中鎘石墨爐檢測法及其影響因素的探討[J].微量元素與健康研究, 2007,24(2):39-41.

1006-6586(2017)04-0026-02

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