氣相色譜法測(cè)定疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量

覃子龍 覃華亮

廣西壯族自治區(qū)柳州市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 柳州 545001

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藥物研究

氣相色譜法測(cè)定疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量

覃子龍 覃華亮*

廣西壯族自治區(qū)柳州市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 柳州 545001

目的：建立疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量測(cè)定方法。方法：采用HP-5毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，0.25μm)，程序升溫，分流比為10∶1，F(xiàn)ID檢測(cè)器。結(jié)果：薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮在同一色譜條件下分離良好，在2～200μg/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，回收率符合要求。結(jié)論：建立的方法重復(fù)性好、靈敏、易操作，適用于疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的質(zhì)量控制。

疏風(fēng)散熱膠囊；薄荷酮；薄荷腦；胡薄荷酮；氣相色譜法

疏風(fēng)散熱膠囊是在銀翹散的基礎(chǔ)上經(jīng)加工制成的中藥膠囊[1]，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊(cè)》，具有清熱解毒，疏風(fēng)散熱的功效，臨床用于風(fēng)熱感冒，發(fā)熱頭痛，咳嗽口干，咽喉疼痛[2]。處方由金銀花、連翹、忍冬藤、桔梗、薄荷、牛蒡子、地黃、淡竹葉、荊芥、梔子、淡豆豉、甘草等十二味中藥組成。其中，薄荷味辛而性涼，疏風(fēng)散熱，且可解毒利咽；荊芥辛而微溫，散發(fā)表邪，透熱外出，二者皆為臣藥。在本制劑的制備工藝中，先提取薄荷和荊芥的揮發(fā)油，最后加到收膏干燥后的粉末中，再裝膠囊。可見(jiàn)上述揮發(fā)油在組方中有重要作用，但現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于揮發(fā)油只有一個(gè)顯色反應(yīng)[2]。王世清等[3]研究了疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷和荊芥的薄層鑒別方法，但該方法仍無(wú)法對(duì)其中薄荷和荊芥揮發(fā)油的主要成分進(jìn)行含量控制，不利于藥品的質(zhì)量控制。薄荷的主要揮發(fā)性成分為薄荷腦，同時(shí)含少量薄荷酮和胡薄荷酮[4]；荊芥主要揮發(fā)性成分為胡薄荷酮和薄荷酮[5]。因此，本研究借鑒霍麗霞等[6]的方法，以薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮為指標(biāo)性成分，采用氣相色譜法，建立適用于疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷和荊芥揮發(fā)性成分的含量測(cè)定方法，為進(jìn)一步完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考依據(jù)。

1 儀器和材料

1.1 儀器 氣相色譜儀(島津GC-2010 plus，配島津AOC-5000plus自動(dòng)進(jìn)樣器，F(xiàn)ID檢測(cè)器)；安捷倫HP-5毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；萬(wàn)分之一電子分析天平(梅特勒AE200)；十萬(wàn)分一電子分析天平(梅特勒XS205DU)；AS7240BT超聲波清洗儀(天津奧特賽恩斯儀器有限公司)。

1.2 材料 薄荷酮(批號(hào)：111705-200602)、薄荷腦(批號(hào)：110728-200506)、胡薄荷酮(批號(hào)：111706-201205，含量99.8%)等對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；疏風(fēng)散熱膠囊(批號(hào)：150302、150303、160801、160802，黑龍江省濟(jì)仁藥業(yè)有限公司；批號(hào):20150601，貴州民族藥業(yè)股份有限公司)；乙酸乙酯(分析純，廣州化學(xué)試劑廠(chǎng))。

2 方法

2.1 色譜條件 色譜柱HP-5毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；色譜柱升溫條件:初始溫度為50℃，保持1min；以15℃/min的速率升溫至100℃，保持10min；以10℃/min的速率升溫至150℃，保持2min；以15℃/min的速率升溫至240℃，保持2min；進(jìn)樣口溫度為200℃；FID檢測(cè)器；檢測(cè)器溫度為250℃；體積流量為1.5mL/min；進(jìn)樣量1μL，分流進(jìn)樣，分流比為10∶1。

2.2 對(duì)照品溶液制備 取薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加乙酸乙酯制成含薄荷酮1.072 mg/mL、薄荷腦1.092 mg/mL和含胡薄荷酮1.209 mg/mL的混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。2.3 供試品溶液制備 本品混勻后，取0.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯20mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲10min，放冷，稱(chēng)定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，以0.45μm濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性樣品溶液制備 參考疏風(fēng)散熱膠囊現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中的制法[2]，制成缺薄荷和荊芥的陰性樣品。

在上述色譜條件下，分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液各1μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，供試品溶液色譜中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮與相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.5 線(xiàn)性試驗(yàn) 分別精密吸取混合對(duì)照品溶液適量，加乙酸乙酯制成濃度分別為2～200μg/mL的梯度混合對(duì)照品溶液。以濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得回歸方程、相關(guān)系數(shù)及線(xiàn)性范圍。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及線(xiàn)性范圍

2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取濃度為10μg/mL的混合對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次。結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮峰面積的RSD值分別為0.47%、0.48%、0.68%，表明儀器精密度良好。2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12h進(jìn)樣6次。結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮峰面積的RSD分別為0.99%、0.79%、0.89%，表明供試品溶液在12h內(nèi)基本穩(wěn)定。2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 同時(shí)取6份樣品(批號(hào)：20150601)，依法制備供試品溶液，測(cè)定并計(jì)算含量，結(jié)果樣品中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量RSD值分別為0.25%、0.91%、0.23%表明測(cè)定方法的重復(fù)性良好。2.9 回收率試驗(yàn) 取樣品(批號(hào)：20150601)6份，每份加入薄荷酮濃度為0.05360mg/mL、薄荷腦0.05460 mg/mL和含胡薄荷酮0.06045 mg/mL的混合對(duì)照品溶液各1.0mL，依法測(cè)定其含量，計(jì)算回收率，結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的平均回收率分別為102.4%、97.0%、103.2%。見(jiàn)表2～4。

表2 薄荷酮回收率試驗(yàn)結(jié)果

表3 薄荷腦回收率試驗(yàn)結(jié)果

表4 胡薄荷酮回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10 樣品測(cè)定 取疏風(fēng)散熱膠囊5批(標(biāo)示量均為0.25g/粒)，依法制備供試品溶液，測(cè)定并計(jì)算其中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量。結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

研究考察了提取時(shí)間(5min、10min、20min)和提取溶劑的用量(10mL、20mL、30mL)，確定以0.5g取樣時(shí)，用20mL乙酸乙酯超聲10min，即可完全提取樣品中的薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮，且在本實(shí)驗(yàn)的色譜條件下，分離良好。

從樣品測(cè)定結(jié)果也可知，薄荷酮和薄荷腦的含量相對(duì)較為穩(wěn)定，但胡薄荷酮的含量差異較大，或許與生產(chǎn)投料有關(guān)。故研究以薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮為指標(biāo)性成分建立的色譜方法可用于疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷與荊芥的含量測(cè)定，為準(zhǔn)確評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量提供參考依據(jù)。

[1]貴州省衛(wèi)生廳.貴州省藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].貴陽(yáng)：貴州科技出版社,1989：98.

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第十二冊(cè))[M].北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì)，1997:197.

[3]王世清,彭英.疏風(fēng)散熱膠囊的TLC鑒別[J].中國(guó)藥業(yè),1999,8(9):11.

[4]沈梅芳,李小萌,單琪媛.薄荷化學(xué)成分與藥理作用研究新進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2012,30(7):1484-1486.

[5]趙立子,魏建和.中藥荊芥最新研究進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2013,29(4):39-43.

[6]霍麗霞,魯寅生,郭青,等.GC法測(cè)定銀翹解毒系列制劑中薄荷腦、薄荷酮和胡薄荷酮[J].藥物評(píng)價(jià)研究,2015,38(1):66-70.

The Determination of Menthone,Menthol and Pulegone in Shufengsanre Capsule by GC

QIN Zilong QIN Hualiang*

Liuzhou Institute of Food and Drug Control of Guamgxi，Liuzhou 545001,China

Objective To develop a quality method of menthone、menthol and pulegone in shufengsanre capsule. Methods Analyzed samples on HP-5 column(30m×0.32mm，0.25μm)with temperature programmed,and the splitting ratio was 1∶10,detected by FID. Results menthone、menthol and pulegonehave been separated well under the same chromatographic condition, and have a good relationship within the range of 2～200μg/mL, and recoveryrate of the determination method all corresponded to the experimental standard.Conclusion The method developed was in good repeatability, sensitive and easy operation, can be applied in quality control of menthone,menthol and pulegone in shufengsanre capsule.

Shufengsanre Capsule；Menthone；Menthol；Pulegone；GC

覃子龍(1984-),男,漢族，在職研究生，主管藥師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。E-mail:125490357@qq.com

覃華亮(1981-),男，壯族,在職研究生，主管中藥師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。E-mail:23033415@qq.com

R284.2

A

1007-8517(2017)08-0011-03

2017-02-11 編輯：梁志慶)