毛細(xì)管色譜柱檢測(cè)糧食中15種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量

劉 敏

(嘉峪關(guān)市糧食質(zhì)量安全檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)站，甘肅 嘉峪關(guān) 735100)

毛細(xì)管色譜柱檢測(cè)糧食中15種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量

劉 敏

(嘉峪關(guān)市糧食質(zhì)量安全檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)站，甘肅 嘉峪關(guān) 735100)

建立了用氣相色譜法毛細(xì)管柱檢測(cè)糧食中多種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，采用層析柱凈化提取，通過改進(jìn)淋洗液和定容試劑，優(yōu)化了樣品的提取凈化效果。用電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)程序的升溫條件進(jìn)行了改進(jìn)，縮短了檢測(cè)時(shí)間，外標(biāo)法定量，32 min內(nèi)完成了檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果呈較好的線性關(guān)系，15種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率在92.3%～101.2%，最低檢出限為0.8～2.5 μg/kg，符合國家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)農(nóng)藥殘留量的規(guī)定。

氣相色譜；糧食；有機(jī)氯農(nóng)藥；回收率

由于在種植過程中農(nóng)藥的大量使用；追求產(chǎn)量造成的不合理利用；儲(chǔ)藏時(shí)為了延長(zhǎng)儲(chǔ)存時(shí)間，過量應(yīng)用巨毒農(nóng)藥，糧食中農(nóng)藥殘留問題越來越引起人們的重視，特別是原糧中的農(nóng)藥殘留。提高檢測(cè)技術(shù)水平，從源頭把好食品安全關(guān)，確保食品消費(fèi)安全對(duì)糧食管理工作有重要意義。

有機(jī)氯農(nóng)藥是一類高效廣譜的殺蟲劑，用于防治植物病和蟲害的發(fā)生。主要分為以苯和以環(huán)戊二烯為原料兩大類。前者使用最早、應(yīng)用最廣泛的如六六六、DDT等；后者作為殺蟲劑的如氯丹、七氯、艾氏劑等。

該類化合物蒸氣壓低，揮發(fā)性小，使用后消失緩慢，氯苯架構(gòu)穩(wěn)定，難氧化、難分解、毒性大，易溶于有機(jī)溶劑，尤其是脂肪組織中，并且不易為體內(nèi)酶降解，因此在生物體內(nèi)消失緩慢。土壤中存在的殘留經(jīng)微生物作用的產(chǎn)物，也象親體一樣存在著殘留毒性，因此它是高效、高毒和高殘留農(nóng)藥，極易在環(huán)境中積累。六六六在土壤中被分解95%所需的最長(zhǎng)時(shí)間為20年，DDT達(dá)30年之久。

有機(jī)氯農(nóng)藥通過生物富集和食物鏈進(jìn)入人體和動(dòng)物體，能在肝腎等組織中蓄積，干擾體內(nèi)正常分泌物的合成、釋放、運(yùn)轉(zhuǎn)、代謝、結(jié)合等過程，從而破壞其維持機(jī)體穩(wěn)定性和調(diào)控作用的物質(zhì)[1]。這類中毒多發(fā)于球神經(jīng)和內(nèi)臟器官，慢性中毒常表現(xiàn)為神經(jīng)衰弱綜合征，部分患者出現(xiàn)多發(fā)性神經(jīng)病及中毒性肝病，并且可以致癌。因此為了從食物源頭保證食品安全，能讓老百姓吃上放心糧，建立糧食中多成分農(nóng)藥殘留的高效檢測(cè)方法非常必要。

由于糧食成分復(fù)雜，簡(jiǎn)單的凈化分析結(jié)果不太理想，經(jīng)過用5%乙酸乙酯淋洗和丙酮定容，達(dá)到了較好的提取和分離效果。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

Aglient 7890B氣相色譜儀配ECD檢測(cè)器；層析柱:長(zhǎng)30 cm,內(nèi)徑2.5 cm,下具玻璃活塞的玻璃管，柱底墊少許經(jīng)處理的脫脂棉。依次從上至下加入1 cm的無水硫酸鈉，3 cm的中性氧化鋁(處理玉米和玉米粉樣品時(shí)，需在中性氧化鋁上層加入0.01 g的活性炭脫色)，2 cm的無水硫酸鈉；RV10旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；HY-4調(diào)速多用振蕩器；250 ml具塞三角瓶；玻璃漏斗；10 μl注射器；定性濾紙。

1.2 儀器工作條件

1.完善促進(jìn)民營經(jīng)濟(jì)發(fā)展的法律法規(guī)制度。樹立平等保護(hù)、促進(jìn)發(fā)展的立法理念，重點(diǎn)圍繞民營企業(yè)在市場(chǎng)準(zhǔn)入、產(chǎn)權(quán)保護(hù)、投融資、公平競(jìng)爭(zhēng)等方面遇到的困難問題，確立民營企業(yè)“法無禁止即可準(zhǔn)入”原則，加快推動(dòng)修改制定相關(guān)法律法規(guī)。進(jìn)一步落實(shí)民營企業(yè)的投資主體地位，全面保護(hù)民營企業(yè)物權(quán)、債權(quán)、股權(quán)、知識(shí)產(chǎn)權(quán)等各種類型的財(cái)產(chǎn)權(quán)。充分保障民營企業(yè)平等獲取投資補(bǔ)助、貸款貼息等政府投資資金，有效緩解民營企業(yè)融資難融資貴，實(shí)現(xiàn)各類市場(chǎng)主體訴訟地位平等、法律適用平等、法律責(zé)任平等，保障民營企業(yè)與其他市場(chǎng)主體公平競(jìng)爭(zhēng)。通過立法加強(qiáng)政府政務(wù)誠信建設(shè)，確保政府守約踐諾，防止隨意違約毀約、“新官不理舊賬”等問題。

色譜柱：安捷倫HP-5毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.32 mm,0.25 μm)；柱溫：程序升溫(升溫控制條件和時(shí)間見表1)。進(jìn)樣口：溫度280℃，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μl[2]；檢測(cè)器:電子捕獲檢測(cè)器，溫度：280℃；載氣：氮?dú)猓魉伲?.5 ml/min;尾吹：30 ml/min。

升溫控制條件和時(shí)間見表1。

1.3 試劑

石油醚：30～60℃，重蒸；丙酮：重蒸；無水硫酸鈉、活性炭，550℃灼燒4 h后備用；中性氧化鋁：550℃灼燒4 h后備用，用前140℃烘烤1 h,加3%水脫活；脫脂棉：用正己烷洗滌后干燥備用；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：中國計(jì)量科學(xué)院定值的15種含氯農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品(濃度298～303 ng/g，名稱和對(duì)應(yīng)濃度見表2)。

1.4 試驗(yàn)部分

1.4.1 樣品的制備

1.4.2 樣品的提取

準(zhǔn)確稱取制備好的樣品10 g(精確至0.01 g)于具塞三角瓶中，加入20 ml的石油醚，于調(diào)速振蕩器上振搖30 min，靜置分層后過濾。

1.4.3 樣品的凈化

于層析柱中加入石油醚20 ml淋洗，待石油醚層下降至下層無水硫酸鈉層時(shí)，迅速移取過濾后的樣品上清液4 ml加入層析柱，待其下降至下層無水硫酸鈉層時(shí)，先用15 ml石油醚淋洗，再用10 ml 5%的乙酸乙酯溶液淋洗，濾液和2次的淋洗液皆收集于濃縮瓶中。

1.4.4 濃縮定容

用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于45℃蒸發(fā)濃縮凈化后的樣品，待蒸發(fā)至干時(shí)，冷卻后用丙酮定容到2 ml。

1.4.5 檢定

按儀器工作條件，進(jìn)樣量1 μl進(jìn)行檢測(cè)，用低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，按儀器操作程序測(cè)定最低限；重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)得各成分的檢出限和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差，加標(biāo)后重復(fù)3次進(jìn)行回收率檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品檢測(cè)的色譜圖

標(biāo)準(zhǔn)樣品檢測(cè)的色譜圖見圖1。

圖1 檢測(cè)色譜圖1.α-HCH;2.六氯苯;3.β-HCH;4.γ-HCH; 5.δ-HCH;6.七氯;7.艾氏劑;8.環(huán)氧七氯; 9.p,p’-DDE;10.狄氏劑;11.異狄氏劑; 12.p,p’-DDD;13.o,p’-DDT;14.p,p’-DDT;15.滅蚊靈

2.2 相關(guān)系數(shù)、檢出限和回收率

15種含氯農(nóng)藥的名稱、質(zhì)量分?jǐn)?shù)、保留時(shí)間、檢測(cè)的相關(guān)系數(shù)、檢出限和加標(biāo)回收率見表2。

2.3 樣品測(cè)定結(jié)果及檢測(cè)精密度

本次檢測(cè)樣品為2批次小麥、2批次玉米，皆為嘉峪關(guān)鄉(xiāng)2016年種植，從農(nóng)戶家里直接用隨機(jī)抽樣法抽取的樣品，每5戶樣品混合成為一個(gè)檢測(cè)樣品。檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。

圖2 玉米檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)定量計(jì)算，樣品中β-HCH含量見表3。

表2 15種含氯農(nóng)藥的名稱、質(zhì)量分?jǐn)?shù)、保留時(shí)間、檢測(cè)的相關(guān)系數(shù)、檢出限和加標(biāo)回收率

表3 樣品中β-HCH含量

其余14種含氯農(nóng)藥皆未檢出。

3 討論

石油醚對(duì)糧食中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的提取效果很好 ，但是檢測(cè)時(shí)丙酮作為溶劑能取得較好的基線，并且加標(biāo)回收率也比較理想，因此濃縮時(shí)蒸干石油醚，用丙酮作為定容溶劑，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的回歸曲線取得了較好的線性關(guān)系；淋洗時(shí)采用5%乙酸乙酯，達(dá)到了很好的淋洗效果，提高了回收率；檢測(cè)時(shí)程序升溫進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化，提高了柱效和分離度，縮短了檢測(cè)時(shí)間，提高了工作效率。

由于本法在處理樣品時(shí)優(yōu)化了淋洗液，濃縮定容時(shí)采用了分離度較好的丙酮，因此取得了理想的回收率；檢測(cè)時(shí)程序升溫縮短了檢測(cè)時(shí)間，并且處理步驟簡(jiǎn)單，試劑用量小。農(nóng)藥殘留檢測(cè)是一種微量檢測(cè)，本法檢出限低，能滿足樣品中待檢成分濃度方面的要求；從樣品檢測(cè)結(jié)果可以看出，本地種植糧食中15種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留在GB2763所規(guī)定的安全范圍之內(nèi)。

[1] 常 娜，袁聚祥.有機(jī)氯農(nóng)藥對(duì)人體健康的危害及其研究進(jìn)展[J].華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，10(2)：174-176.

[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 5009.19-2008，食品中有機(jī)氯農(nóng)藥多組分殘留量的測(cè)定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

(責(zé)任編輯：梅 竹)

Determination of 15 kinds of organochlorine pesticide residues in grain by capillary Chromatorgraphic column

LIU Min

(Jiayuguan Grain Quality and Safety Inspection Stations,Jiayuguan 735100,China)

Capillary column gas chromatography detection method was established for detection of organochlorine pesticide residues in grain,using column chromatography to purify the extract,by improving the eluent and constant volume reagent,to optimize the extraction and purification of the sample programs.With electron capture detector,we improved the detector temperature conditions of test procedure,and shortened the testing time,by external standard method of quantitative,completed the test in 32 min.Test results showed good linear relationship,15 kinds of pesticide standard addition recovery rate were in the range of 92.3%-101.2%,the lowest detection limit was 0.8 to 2.5 μg/kg,which complied with the provisions of the national standards on pesticide residues.

gas chromatography;grain;organochlorine pesticides;recovery rate

2016-12-03；

2017-02-03

劉 敏(1971-)，女，工程師，主要研究方向?yàn)槭称芳庸ず蜋z驗(yàn)。

10.7633/j.issn.1003-6202.2017.04.015

TS210.7

A

1003-6202(2017)04-0058-03