分光光度法測(cè)定豆芽中尿素含量

張 君，祝 軍，鄭鳳娥

（沈陽(yáng)食品檢驗(yàn)所，沈陽(yáng) 110136）

豆芽是大眾經(jīng)常食用的食品，但許多不法商家為了經(jīng)濟(jì)利益，在豆芽生長(zhǎng)過(guò)程中非法添加尿素。人食用這種豆芽后，會(huì)在體內(nèi)產(chǎn)生致癌物質(zhì)亞硝酸鹽。由于我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中未收錄豆芽中尿素的檢測(cè)方法，因此，在參考相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)多年工作經(jīng)驗(yàn)，建立豆芽中尿素含量的檢驗(yàn)方法，旨在為精確檢測(cè)豆芽中的尿素含量提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

豆芽為市售；試劑均為分析純，水為蒸餾水。

活性炭：在120℃烘箱中活化4 h。

磷酸鹽緩沖溶液（pH＝7.0）：稱取 3.40 g 無(wú)水磷酸二氫鉀和4.35 g無(wú)水磷酸氫二鉀，溶于100 mL水中，并用水定容至1 000 mL。

尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.2000 g經(jīng)105℃干燥2 h的尿素，用磷酸鹽緩沖溶液溶解并稀釋至1 000 mL，濃度為 0.2 mg/mL，室溫下貯存 10 d。

對(duì)二甲基苯甲醛 （DMAB）溶液：稱取0.80 g DMAB，溶解于50 mL95%乙醇中，再加入5 mL鹽酸，置于棕色瓶中，于室溫下貯存1個(gè)月。

1.2 儀器與設(shè)備

TU-1810紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；AL204-IC電子天平：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；HY-4振蕩機(jī)：常州翔天實(shí)驗(yàn)儀器廠；DHG-9145A電熱鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品前處理 將樣品打碎后稱取 20 g（精確至0.01 g），置于 100 mL 容量瓶中，加入 2.5 g（精確至0.01 g）活性炭，搖勻，加水至 80 mL 左右；在振蕩機(jī)中振蕩30 min，加水至刻度，搖勻；靜置片刻后，用中速濾紙過(guò)濾，棄去最初約10 mL濾液，余下濾液作為試樣溶液。同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 準(zhǔn)確吸取 0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，、5.00 mL 尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于 25 mL比色管中，加入磷酸鹽緩沖溶液至5 mL，再加入5 mL DMAB，搖勻。室溫下放置15 min后，用1 cm比色皿在波長(zhǎng)430 nm處測(cè)定吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.3 樣品測(cè)定 吸取試劑空白濾液和試樣濾液各5 mL，加入5 mLDMAB顯色劑，在室溫下放置15 min后，以試劑空白為參比，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)為430 nm處測(cè)定吸光度。

1.3.4 尿素含量計(jì)算

尿素含量的計(jì)算公式為：

式中：X為品中尿素含量，mg/kg；C為尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mg/mL；V為從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的尿毒體積，mL；m 為樣品質(zhì)量，g；V1為比色時(shí)吸取體積，mL；V2為樣品定容體積，mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍與檢出限

2.1.1 線性范圍 以尿素體積為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，確定線性方程和線性相關(guān)系數(shù)，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 尿素標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure 1 The standard curve of urea

根據(jù)圖 1確定的線性方程為：Y＝0.092 7X-0.001 5；線性相關(guān)系數(shù)為 R2＝0.999 4，表明尿素體積與吸光度有很好的相關(guān)性。

2.1.2 檢出限 分別做20次試劑空白，按上述樣品處理方法處理后測(cè)定吸光度。根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差，以3倍標(biāo)準(zhǔn)差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率作為檢出限，確定方法的檢出限為20 mg/kg。

2.2 回收率與精密度

2.2.1 回收率 采用加標(biāo)測(cè)定回收率的方法計(jì)算回收率，測(cè)定結(jié)果如表1所示。

表1 回收率測(cè)試結(jié)果Table 1 Test results of the recovery rate

由表1中的數(shù)據(jù)可知，回收率的范圍在91.7%～103.0%之間。

2.2.2 精密度 按照樣品處理方法分別對(duì)2個(gè)樣品平行測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果如表2所示。

表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Test results of precision

由表 2可知，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.83%～2.72%。

3 結(jié)論

通過(guò)試驗(yàn)建立分光光度法測(cè)定豆芽中尿素含量的方法。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明：該方法的檢出限為20 mg/kg，回收率為 91.7%～103.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.83%～73.00%。此方法分析速度快，樣品前處理簡(jiǎn)單，精確度和檢出限均滿足試驗(yàn)要求，可用于豆芽中尿素含量的測(cè)定。

［1］朱止利，羅彥莉.超濾前處理分光光度法測(cè)定含黃腐酸尿素中縮二脲［J］.實(shí)驗(yàn)室與分析，2015，12（5）：50-52.

［2］申世剛，李國(guó)輝，鐘其頂，等.高效液相色譜-熒光檢測(cè)器法測(cè)定白酒中尿素含量方法研究［J］.釀酒科技，2015，12（3）：111-114.

［3］崔慶安.豆芽質(zhì)量安全，誰(shuí)來(lái)監(jiān)管［J］.機(jī)構(gòu)與行政，2014，24（10）：45-47.