苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞抗氧化能力、脂質(zhì)代謝及相關(guān)基因表達(dá)的影響

楊 玉 孫 煜 孫寶盛 盧營(yíng)杰 李建慧 苗志強(qiáng) 張俊珍

(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，太谷030801)

苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞抗氧化能力、脂質(zhì)代謝及相關(guān)基因表達(dá)的影響

楊 玉 孫 煜 孫寶盛 盧營(yíng)杰 李建慧 苗志強(qiáng) 張俊珍

(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，太谷030801)

本試驗(yàn)旨在研究不同水平苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞抗氧化能力、脂質(zhì)代謝及相關(guān)基因表達(dá)的影響。選用69周齡、健康海蘭褐蛋雞324只，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)18只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加500和1 000 mg/kg苜草素。試驗(yàn)預(yù)試期2周，正試期8周。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比：1)試驗(yàn)組蛋雞產(chǎn)蛋率顯著升高(P<0.05)，料蛋比顯著降低(P<0.05)。2)500 mg/kg苜草素顯著增加了蛋殼強(qiáng)度(P<0.05)，極顯著降低了肝臟甘油三酯含量(P<0.01)，顯著降低了肝臟總膽固醇含量(P<0.05)。3)1 000 mg/kg苜草素極顯著提高了血漿谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)及肝臟GSH-Px活性(P<0.01)，顯著提高了血漿總抗氧化能力(T-AOC)、降低了丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)，極顯著降低了肝臟與蛋黃總膽固醇和甘油三酯含量(P<0.01)，極顯著提高了肝臟硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)、膽固醇-7α羥化酶(CYP7A1)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)mRNA表達(dá)量(P<0.01)，極顯著降低了3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)mRNA表達(dá)量(P<0.01)，而對(duì)GSH-PxmRNA表達(dá)量無(wú)顯著影響(P>0.05)。由此可見(jiàn)，飼糧中添加苜草素可降低產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋黃膽固醇和甘油三酯含量，提高生產(chǎn)性能、蛋殼強(qiáng)度、機(jī)體抗氧化和膽固醇代謝能力，且以添加1 000 mg/kg苜草素效果較好。

苜草素；產(chǎn)蛋后期蛋雞；抗氧化；脂質(zhì)代謝；基因表達(dá)

雞蛋是最普通的日常食品，但由于其膽固醇含量較高，嚴(yán)重影響著人們對(duì)蛋與蛋制品的消費(fèi)心理[1]。苜草素中主要有效成分為黃酮(≥5%)、多糖(≥15%)和皂苷(≥5%)，具有降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、提高機(jī)體抗氧化和免疫功能作用[2-3]。研究表明，飼糧添加不同水平的苜?？傔翱梢栽鰪?qiáng)肉雞肝臟和血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性，降低血清丙二醛(MDA)含量，使動(dòng)物機(jī)體不被脂質(zhì)過(guò)氧化物傷害[4]。Deng等[5]研究發(fā)現(xiàn)，含水苜蓿提取物能夠顯著降低血清和肝臟的總膽固醇(TC)以及蛋黃、血清和肝臟的脂質(zhì)含量，但對(duì)血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量無(wú)顯著影響。Zhou等[6]進(jìn)一步利用數(shù)字基因表達(dá)分析了苜蓿皂苷提取物降低蛋雞膽固醇的效果，發(fā)現(xiàn)添加120 mg/kg效果最好。另外發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加苜草素可以顯著降低全蛋中的膽固醇和甘油三酯(TG)含量[7]，其促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)以前期抑制、后期促進(jìn)的規(guī)律出現(xiàn)[8]，所以推測(cè)苜草素應(yīng)該在生長(zhǎng)周期長(zhǎng)或有嚴(yán)重疾病隱患的情況下應(yīng)用效果更為理想。苜草素兼有抗氧化與降低膽固醇的功效，但其研究主要集中在應(yīng)用方面，對(duì)其抗氧化與降脂機(jī)理方面的研究較少。因此，本試驗(yàn)通過(guò)在飼糧中添加不同水平的苜草素，探討其對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能、抗氧化能力、膽固醇代謝及相關(guān)基因表達(dá)的影響，并對(duì)其分子機(jī)理做初步探討，旨在確定其適宜添加水平，為開(kāi)發(fā)飼料資源和蛋雞產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

試驗(yàn)于2015年6月11日至2015年8月21日在山西省大同市大同縣建鑫養(yǎng)殖場(chǎng)和山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物遺傳育種與動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì)

試驗(yàn)用苜草素是一種從紫花苜蓿中提取的天然植物提取物，其有效成分為15%多糖、5%黃酮、5%三萜皂苷，購(gòu)自四川德陽(yáng)三豐原科技股份有限公司。試驗(yàn)選用69周齡、健康的海蘭褐蛋雞324只，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)18只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上分別添加500和1 000 mg/kg苜草素。試驗(yàn)預(yù)試期2周，正試期8周?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采用3層階梯式籠養(yǎng)，每籠3只雞，每天飼喂4次，自由采食和飲水，自然光照補(bǔ)充人工光照到16 h，自然通風(fēng)結(jié)合縱向負(fù)壓通風(fēng)，其他均按養(yǎng)殖場(chǎng)常規(guī)方法進(jìn)行。

1.4 樣品采集與制備

1.4.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間每日記錄各重復(fù)的產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋總重量，每7 d結(jié)料，記錄各重復(fù)耗料重，計(jì)算各組平均日采食量，然后以組為單位統(tǒng)計(jì)產(chǎn)蛋率和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)

試驗(yàn)第14、28、42和55天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3枚雞蛋測(cè)定蛋重、蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋殼厚度，取其平均值。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每重復(fù)選取2枚雞蛋稱(chēng)重，破殼后分離蛋清蛋黃，使用試劑盒測(cè)定蛋黃TC和TG的含量，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程有限公司。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)每千克維生素預(yù)混料含One kg of vitamin premix contains：維生素A乙酸酯 retinol acetate 55 000 000 IU，VD313 500 000 IU，VE 50 000 mg，VK35 000 mg，VB15 000 mg，VB225 000 mg，VB614 000 mg，VB1265 mg，葉酸 folic acid 4 000 mg，煙酰胺 nicotinamide 90 000 mg，D-泛酸鈣D-calcium pantothenate 32 000 mg，生物素 biotin 100 mg。

2)每千克微量元素預(yù)混料含One kg of trace mineral premix contains：Mn (as manganese sulfate) 60 g，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 60 g,Cu (as copper sulfate) 8 g,Se (as sodium selenite) 100 mg,Zn (as zinc sulfate) 60 g,I (as potassium iodide) 130 mg。

3)計(jì)算值 Calculated values。

1.4.3 血漿及組織相關(guān)指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每重復(fù)隨機(jī)選取1只健康狀況良好且體重接近的蛋雞，空腹翅靜脈采血5 mL，3 500 r/min離心10 min制備血漿，分裝后-20 ℃保存。隨后頸靜脈放血致死，采用無(wú)菌操作迅速取出同一部位肝臟放入液氮中，置于-80 ℃待測(cè)。按照相應(yīng)試劑盒測(cè)定血漿GSH-Px和總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，總抗氧化能力(T-AOC)，MDA、TC、TG含量以及肝臟GSH-Px活性、TC和TG含量，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.4.4 肝臟總RNA提取和反轉(zhuǎn)錄

采用Trizol法提取肝臟組織總RNA。用1%瓊脂糖凝膠電泳、核酸蛋白儀測(cè)定RNA完整性、濃度和純度。按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明合成cDNA，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.5 引物設(shè)計(jì)

根據(jù)測(cè)序數(shù)據(jù)庫(kù)中GSH-Px、膽固醇-7α羥化酶(CYP7A1)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)、硫氧還蛋白還原酶(TrxR)1、3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)的序列，設(shè)計(jì)其引物(表2)，并由華大基因(北京)合成。

表2 引物序列

1.4.6 實(shí)時(shí)定量PCR

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)。所有數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用Duncan氏法比較各組之間指標(biāo)差異的顯著性，采用LSD法對(duì)差異顯著的數(shù)據(jù)進(jìn)行極顯著差異比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，飼糧中添加苜草素顯著提高了產(chǎn)蛋率、降低了料蛋比(P<0.05)，其中以1 000 mg/kg組產(chǎn)蛋率最高(比對(duì)照組增加了9.13%)，料蛋比最低(比對(duì)照組降低了5.98%)，而各組平均蛋重與平均日采食量無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.2 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表4可知，飼糧中添加苜草素對(duì)蛋白高度、哈氏單位、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色及蛋殼厚度無(wú)顯著影響(P>0.05)，但對(duì)蛋殼強(qiáng)度有一定影響，其中以500 mg/kg組蛋殼強(qiáng)度最高且顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表3 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)，無(wú)字母或相同小寫(xiě)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with no letter or the same small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表4 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞抗氧化能力的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加1 000 mg/kg苜草素極顯著提高了血漿中GSH-Px、T-SOD及肝臟GSH-Px的活性(P<0.01)，顯著提高了血漿中T-AOC、降低了MDA的含量(P<0.05)；添加500 mg/kg苜草素對(duì)血漿中GSH-Px活性、T-AOC、MDA含量以及肝臟中GSH-Px活性無(wú)顯著影響(P>0.05)，但極顯著提高了血漿T-SOD活性(P<0.01)。

表5 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞抗氧化能力的影響

2.4 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞脂質(zhì)代謝的影響

由表6可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加1 000 mg/kg苜草素極顯著降低了肝臟與蛋黃中TC和TG含量(P<0.01)，添加500 mg/kg苜草素極顯著降低了肝臟TG含量(P<0.01)，顯著降低了肝臟TC含量(P<0.05)。飼糧添加苜草素對(duì)血漿TC和TG含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

2.5 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞肝臟抗氧化、脂質(zhì)代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)量的影響

由表7可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加1 000 mg/kg苜草素極顯著提高了肝臟TrxR1、CYP7A1、SREBP-1c的mRNA表達(dá)量(P<0.01)，極顯著降低了HMGCR的mRNA表達(dá)量(P<0.01)，而對(duì)GSH-Px的mRNA表達(dá)量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表6 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞脂質(zhì)代謝的影響

表7 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞肝臟抗氧化、脂質(zhì)代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)量的影響

3 討 論

3.1 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能的影響

苜草素中主要活性成分為黃酮、多糖和皂苷。研究表明，飼糧中添加600 mg/kg苜草素可顯著降低料蛋比[9]。Mansoub[10]選用500只海蘭W-36蛋雞在其飼糧中添加100、150和200 mg/kg苜草素，發(fā)現(xiàn)200 mg/kg組產(chǎn)蛋率和產(chǎn)蛋量最高，而150 mg/kg組飼料轉(zhuǎn)化率最高。謝泰華[11]分別在產(chǎn)蛋前期和產(chǎn)蛋后期蛋雞飼糧中添加500和1 000 mg/kg苜草素，發(fā)現(xiàn)可顯著提高產(chǎn)蛋前期蛋雞產(chǎn)蛋率和平均蛋重，降低平均日采食量和料蛋比，提高產(chǎn)蛋后期蛋雞產(chǎn)蛋率、降低料蛋比，但對(duì)平均蛋重和平均日采食量無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加苜草素顯著提高了蛋雞的產(chǎn)蛋率，降低了料蛋比，與上述結(jié)果基本一致，并且延緩了71周齡以后蛋雞產(chǎn)蛋率下降趨勢(shì)。原因可能是苜蓿中的黃酮刺激腺垂體釋放卵泡刺激素和黃體生成素，繼而促進(jìn)了卵泡的生長(zhǎng)和成熟及卵巢顆粒細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，進(jìn)而提高了產(chǎn)蛋率[12]。

3.2 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋品質(zhì)的影響

評(píng)價(jià)蛋品質(zhì)的主要指標(biāo)包括蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋形指數(shù)、蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色等。蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度直接影響雞蛋的破損率，哈氏單位直接反映雞蛋新鮮程度及蛋白品質(zhì)[13]。研究表明，試驗(yàn)后期苜草素可顯著提高蛋殼強(qiáng)度，而蛋殼厚度幾乎不受影響[11]。侯永剛等[14]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加60 mg/kg苜蓿皂苷，除了降低蛋黃和全蛋膽固醇含量外，還顯著提高蛋殼厚度、且哈氏單位最高。梁軒等[15]的研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加苜草素對(duì)蛋品質(zhì)各指標(biāo)產(chǎn)生影響，但沒(méi)有一定規(guī)律性。本研究結(jié)果表明，添加苜草素后蛋殼強(qiáng)度有不同程度增強(qiáng)，但蛋殼厚度無(wú)規(guī)律性變化，原因可能是苜草素中的苜蓿皂苷促進(jìn)了蛋殼腺的分泌，多糖可能通過(guò)調(diào)節(jié)鈣離子濃度，促進(jìn)了腸道鈣離子的吸收[16]。雖然哈氏單位無(wú)顯著變化但有增高趨勢(shì)，說(shuō)明苜草素中的活性物質(zhì)增強(qiáng)了雞蛋蛋白質(zhì)代謝，從而提高了蛋白質(zhì)的沉積[17]。

3.3 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞血漿、肝臟抗氧化能力及相關(guān)基因表達(dá)的影響

機(jī)體抗氧化能力是影響動(dòng)物健康的重要因素，而體內(nèi)GSH-Px、T-SOD、T-AOC、MDA、TrxR等指標(biāo)均反映機(jī)體抗氧化能力。研究表明，苜蓿中的活性物質(zhì)有增強(qiáng)血清抗氧化性、降低MDA含量以及預(yù)防心血管疾病等作用，添加不同水平的苜?？傔翱梢栽鰪?qiáng)肉雞肝臟和血清GSH-Px活性，降低MDA含量，使動(dòng)物機(jī)體不被脂質(zhì)過(guò)氧化物傷害[4]。本研究結(jié)果表明，飼糧中添加1 000 mg/kg苜草素極顯著或顯著提高了血漿GSH-Px、T-SOD活性和T-AOC以及肝臟GSH-Px活性和TrxR1 mRNA表達(dá)量，降低了血漿MDA的含量，具有提高肝臟GSH-PxmRNA表達(dá)量的趨勢(shì)，表明飼糧中添加苜草素可通過(guò)提高抗氧化基因在機(jī)體中的表達(dá)量增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。

3.4 苜草素對(duì)產(chǎn)蛋后期蛋雞脂質(zhì)代謝的影響

禽類(lèi)的膽固醇主要在肝臟合成，蛋黃幾乎包含了雞蛋中的全部膽固醇。研究表明，皂苷作為苜草素中主要活性物質(zhì)，可降低膽汁在腸道中的吸收，隨著膽固醇排泄量增加，雞蛋中膽固醇沉積量隨之下降[18]。在飼糧中添加1 000 mg/kg苜草素可顯著降低58～65周齡海蘭褐蛋雞蛋黃TG含量[7]，添加500 mg/kg苜草素，肉仔雞血清TG和TC含量顯著降低[3]。本研究表明，飼糧中添加1 000 mg/kg苜草素極顯著降低了蛋黃中TC和TG含量，而對(duì)血漿TC和TG含量無(wú)顯著影響，說(shuō)明苜草素對(duì)蛋雞血液TC與蛋黃膽固醇的作用沒(méi)有必然相關(guān)關(guān)系[19]。其原因可能是雞蛋膽固醇含量由蛋黃中的脂蛋白含量決定，而不是由血液膽固醇含量決定，因此血液中膽固醇含量的增加或降低，并不影響蛋中膽固醇含量的變化趨勢(shì)[20]。

研究表明，CYP7A1是膽汁酸合成的限速酶，對(duì)維持機(jī)體膽固醇穩(wěn)定具有重要作用。SREBP-1c基因?qū)儆诠檀颊{(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白家族，當(dāng)體內(nèi)膽固醇含量較高時(shí)，可促進(jìn)脂肪酸生成并與膽固醇合成膽固醇酯，從而消耗膽固醇[21]。HMGCR是內(nèi)源膽固醇合成過(guò)程中的限速酶[22-23]，如果抑制了HMGCR活性，機(jī)體內(nèi)源性膽固醇合成則減少。Zhou等[6]通過(guò)數(shù)字基因表達(dá)譜技術(shù)評(píng)估苜蓿皂苷提取物降低雞蛋膽固醇含量的分子機(jī)理，發(fā)現(xiàn)飼喂120 mg/kg苜蓿皂苷60 d后蛋黃膽固醇含量持續(xù)下降，且上調(diào)了蛋雞肝臟CYP7A1基因表達(dá)量。李寧等[1]在飼糧中添加苜草素，發(fā)現(xiàn)添加600、900、1 200 mg/kg苜草素顯著降低了蛋雞肝臟HMGCRmRNA表達(dá)量，通過(guò)調(diào)控HMGCRmRNA的表達(dá)可以控制血清和蛋黃中的膽固醇含量。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加苜草素顯著提高了蛋雞肝臟CYP7A1與SREBP-1cmRNA表達(dá)量，降低了HMGCRmRNA表達(dá)量，從而推測(cè)苜草素降低肝臟TC和TG含量、導(dǎo)致蛋黃TC和TG含量降低，可能是通過(guò)促進(jìn)膽固醇排泄、抑制膽固醇合成及影響膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)這幾種途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

4 結(jié) 論

飼糧中添加苜草素可降低產(chǎn)蛋后期蛋雞蛋黃TC和TG含量，提高生產(chǎn)性能、蛋殼強(qiáng)度、機(jī)體抗氧化和膽固醇代謝能力，其適宜添加水平為1 000 mg/kg。

[1] 李寧,劉鑫,曲正祥,等.苜草素對(duì)蛋雞膽固醇代謝的影響及其基因調(diào)控機(jī)制[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(5):1558-1565.

[2] 趙武述,張玉琴,任麗娟,等.苜蓿多糖的免疫增強(qiáng)效應(yīng)[J].中國(guó)藥理學(xué)報(bào),1993,14(3):273-276.

[3] 董曉芳,江勇,高微微,等.苜草素對(duì)肉仔雞免疫、內(nèi)分泌和脂類(lèi)代謝的一些指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,19(4):407-410.

[4] 張勇.苜?？傔皩?duì)肉仔雞胴體品質(zhì)、血脂及抗氧化性能的影響[D].碩士學(xué)位論文.鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2003:1-33.

[5] DENG W,DONG X F,TONG J M,et al.Effects of an aqueous alfalfa extract on production performance,egg quality and lipid metabolism of laying hens[J].Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition,2012,96(1):85-94.

[6] ZHOU L,SHI Y H,GUO R,et al.Digital gene-expression profiling analysis of the cholesterol-lowering effects of alfalfa saponin extract on laying hens[J].PLoS One,2014,9(6):e98578.

[7] 張麗娜.苜草素對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能及其雞蛋與組織脂質(zhì)的影響[D].碩士學(xué)位論文.揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2010.

[8] 佟建明,董曉芳,鄧文.家禽免疫營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究熱點(diǎn)與展望[J].中國(guó)家禽,2008,30(3):1-4.

[9] 楊長(zhǎng)進(jìn),董曉芳,佟建明,等.苜草素對(duì)產(chǎn)蛋高峰期蛋雞脂肪肝出血綜合征預(yù)防作用研究[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(7):2184-2192.

[10] MANSOUB N H.Effect of different level of alfalfa extract on performance,egg quality and some blood parameters of laying hens[J].Annals of Biological Research,2011,2(6):384-388.

[11] 謝泰華.苜草素對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血脂指標(biāo)的影響[D].碩士學(xué)位論文.福州:福建農(nóng)林大學(xué),2009.

[12] PALMER S S,BAHR J M.Follicle stimulating hormone increases serum oestradial-17β concentrations,number of growing follicles and yolk deposition in aging hens (Gallusgallusdomesticus) with decreased egg production[J].British Poultry Science,1992,33(2):403-414.

[13] 劉紅南,滕楠,李垚,等.飼糧添加槲皮素對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)和蛋組分的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2014,26(8):2246-2252.

[14] 侯永剛.苜蓿皂甙對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、膽固醇及腸道主要菌群的影響[D].碩士學(xué)位論文.保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.

[15] 梁軒,劉福柱,沈偉.家禽營(yíng)養(yǎng)與微量元素硒[J].飼料博覽,2000(9):22-23.

[16] 辛小青,董曉芳,佟建明.飼糧添加不同水平苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(8):2465-2475.

[17] 陳秋麗,鄧偉國(guó),王毅.紅景天皂苷對(duì)雌性大鼠蛋白質(zhì)和脂肪代謝的影響[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2003,29(4):411-413.

[18] FRANCIS G,KEREM Z,MAKKAR H P S,et al.The biological action of saponins in animal systems:a review[J].British Journal of Nutrition,2002,88(6):587-605.

[19] XU X J,HU Y B,XIAO W J,et al.Effects of fermentedCamillasinensis,Fuzhuan tea,on egg cholesterol and production performance in laying hens[J].Herald Journal of Agriculture and Food Science,2012,1(1):5-10.

[20] GRIFFIN H D,WHITEHEAD C C,BROADBENT L A.The relationship between plasma triglyceride concentrations and body fat content in male and female broilers-a basis for selection?[J].British Poultry Science,1982,23(1):15-23.

[21] 魏寧波,劉紅云,汪海峰,等.固醇調(diào)控元件結(jié)合蛋白在膽固醇代謝中作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧雜志,2013,49(5):80-84.

[22] BJARNADOTTIR O,ROMERO Q,BENDAHL P O,et al.Targeting HMG-CoA reductase with statins in a window-of-opportunity breast cancer trial[J].Breast Cancer Research and Treatment,2013,138(2):449-508.

[23] YEGANEH B,WIECHEC E,ANDE S R,et al.Targeting the mevalonate cascade as a new therapeutic approach in heart disease,cancer and pulmonary disease[J].Pharmacology & Therapeutics,2014,143(1):87-110.

Author, YANG Yu, professor, E-mail: sxauywd@126.com

(責(zé)任編輯 田艷明)

Effects of Polysavone on Antioxidant Ability, Lipid Metabolism and Related Gene Expression of Laying Hens during Later Period of Laying

YANG Yu SUN Yu SUN Baosheng LU Yingjie LI Jianhui MIAO Zhiqiang ZHANG Junzhen

(CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu030801,China)

This experiment was to investigate the effects of different polysavone supplemental levels on the antioxidant ability, lipid metabolism and related gene expression of laying hens during later period of laying. Totally, three hundred and twenty-four Hy-Line Brown hens at 69-week old were randomly divided into 3 groups with 6 replicates and there were 18 hens for each replication. The hens in control group were fed a basal diet, and the two others were fed the basal diet supplemented with polysavone at the levels of 500 and 1 000 mg/kg, respectively. The preliminary experiment lasted for 2 weeks and the formal experiment lasted for 8 weeks. The results showed that compared with the control group, 1) diet supplemented with polysavone significantly increased the laying rate and reduced the feed to egg ratio (P<0.05). 2) Diet supplemented with 500 mg/kg polysavone significantly increased the eggshell strength (P<0.05), significantly decreased the liver triglyceride content (P<0.01) and the cholesterol content (P<0.05). 3) Diet supplemented with 1 000 mg/kg polysavone extremely significantly increased the activities of plasma glutathion peroxidase (GSH-Px), total superoxide dismutase (T-SOD) and liver GSH-Px activity, as well as the expression quantity of thioredoxin reductase (TrxR1), cholesterol alpha-hydroxylase (CYP7A1) and sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c) (P<0.01) and the plasma total antioxidant capacity (T-AOC) (P<0.05), also significantly reduced the malondialdehyde (MDA) content in plasma (P<0.05), contents of total cholesterol and triglyceride in liver and egg yolk and the expression quantity of 3-hydroxy-3-methyl glutaric acid acyl coenzyme A reductase (HMGCR) (P<0.01). However, the addition of polysavone at the level of 1 000 mg/kg had no effects on the expression quantity ofGSH-Px(P>0.05). It can be concluded that diet supplemented with polysavone can reduce the cholesterol and triglyceride content in egg yolk, increase the growth performance, eggshell strength, antioxidant and lipid metabolism capacity of Hy-Line Brown hens during late period of laying and the 1 000 mg/kg polysavone is suggested as the optimal dosage in this study.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(4)：1233-1240]

laying hens; polysavone; antioxidant; lipid metabolism; gene expression

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.04.019

2016-10-19

山西省科學(xué)技術(shù)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(201603D221033-1)；山西省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(20161102)；山西農(nóng)業(yè)大學(xué)博士科研啟動(dòng)基金(412559)

楊 玉(1963—)，女，山西新絳人，教授，博士，主要從事家禽營(yíng)養(yǎng)研究。E-mail: sxauywd@126.com

S816.7

A

1006-267X(2017)04-1233-08