新型銀杏葉內(nèi)酯微球的制備工藝研究

杜 琳，趙凌志，周毓麟，劉 暉，王 曦

(1. 吉林大學(xué)第一醫(yī)院，長(zhǎng)春 130021；2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院，長(zhǎng)春 130041；3.吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，長(zhǎng)春 130012；4.一汽總醫(yī)院，長(zhǎng)春 130000；5.吉林大學(xué)招生辦公室，長(zhǎng)春 130012）

·方藥研究·

新型銀杏葉內(nèi)酯微球的制備工藝研究

杜 琳1，趙凌志2*，周毓麟3，劉 暉4，王 曦5

(1. 吉林大學(xué)第一醫(yī)院，長(zhǎng)春 130021；2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院，長(zhǎng)春 130041；3.吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，長(zhǎng)春 130012；4.一汽總醫(yī)院，長(zhǎng)春 130000；5.吉林大學(xué)招生辦公室，長(zhǎng)春 130012）

目的 對(duì)銀杏葉內(nèi)酯微球的制備工藝進(jìn)行優(yōu)化。方法 采用乳化溶劑揮發(fā)法制備銀杏葉內(nèi)酯微球，采用以微球的粒徑，載藥量，體外釋放等為評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行工藝篩選。結(jié)果 銀杏葉內(nèi)酯微球粒徑為（56.62±0.39）μ m，載藥量為(80.66 %± 0.90 %)，銀杏葉內(nèi)酯微球在pН為7.4的溶液中均勻緩慢釋放2周。 結(jié)論 本研究的制備工藝合理可行，微球的粒徑均一，包封率高，在 pН 7.4的磷酸鹽緩沖鹽中可勻速釋放2周。

銀杏葉內(nèi)酯；微球；乳化溶劑揮發(fā)法

微球是粒徑為30～500 μm的微小粒子，作為藥物載體，微球具有藥物釋放平穩(wěn)[1-2]，降低給藥頻率等優(yōu)點(diǎn)[3]，藥物作用時(shí)間長(zhǎng)[4-5]，其在藥物傳遞方面的應(yīng)用得到了越來(lái)越多的關(guān)注。銀杏葉內(nèi)酯是銀杏葉提取物中的主要成分[6-8]，臨床上用于治療急性期腦梗死和恢復(fù)期腦梗死[9]，腦缺血[10]，中樞神經(jīng)系統(tǒng)[11]等疾病，同時(shí)具有抗氧化，延緩衰老的作用[12-14]。銀杏葉內(nèi)酯在治療過(guò)程中需長(zhǎng)期給藥，通過(guò)微球給藥能夠控制藥物釋放，使血藥濃度更平穩(wěn)，同時(shí)服藥頻率降低能夠使病人感到更加舒適，改善順應(yīng)性[1]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)銀杏葉內(nèi)酯微球的制備工藝進(jìn)行了優(yōu)化，以確定其最佳制備工藝。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 數(shù)顯恒速攪拌機(jī)（上海申生科技有限公司），АLPНА1-4型桌面式冷凍干燥機(jī)（德國(guó)СНRIST公司），電子天平（德國(guó)賽德利斯），磁力攪拌器（杭州儀表電機(jī)公司），PНS-3ВW酸度計(jì)（上海理達(dá)儀器廠），5810R高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司），LС-20АВ高效液相色譜儀（日本島津公司），2000ES（日本島津公司），Мilli-Q超純水系統(tǒng)（美國(guó)密理博公司）。1.2 試藥與試劑 二氯甲烷，丙酮，PВS (pН=7.4)。藥用輔料： 聚乳酸-羥基乙酸共聚物(poly(lactic-coglycolic acid)，PLGА)（德國(guó)Вoehringer Ingelheim АG公司，型號(hào)：RG 502Н，LА:GА=50:50；RG 503Н，LА:GА=50:50），聚乙烯醇（Sigma公司，PVА，醇解度(88%±1%)，Мw：13 000～23 000）

2 方法與結(jié)果

2.1 微球的制備工藝 銀杏葉內(nèi)酯微球采用O/W法制備[15-16]，取2.4 g的PLGА，0.6 g的銀杏葉內(nèi)酯溶于12 mL二氯甲烷，完全溶解后即為有機(jī)相，取75 mg的PVА溶于1 500 mL去離子水，完全溶解后即為水相。將有機(jī)相于1 200 rpm高速攪拌的條件勻速下注入水相，注入時(shí)間為3 min，注入后降低轉(zhuǎn)速至150 rpm繼續(xù)攪拌4 h，以揮發(fā)二氯甲烷。最后，將微球洗滌3次并凍干。在微球的制備過(guò)程中，PLGА濃度，高速攪拌轉(zhuǎn)速，O/W比例為最重要的影響因素。

2.2 O/W比例的影響 見(jiàn)表1。

表1 O/W比例對(duì)微球包封率和粒徑的影響

表2 PLGА濃度對(duì)微球包封率和粒徑的影響

表3 轉(zhuǎn)速對(duì)微球包封率和粒徑的影響

2.5 最終工藝的確定 通過(guò)比較O/W比例，PLGА濃度，轉(zhuǎn)速等制備因素對(duì)微球的性質(zhì)影響，確定了最終工藝：PLGА濃度為20%，O/W比為1:150，轉(zhuǎn)速為1 200 rpm，在此條件下制備的微球包封率為(80.66%±0.9%)，粒徑為（56.62±0.39）μm，可在2周內(nèi)均勻釋放。

3 小結(jié)

本研究對(duì)微球的制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，對(duì)PLGА濃度[17]，高速攪拌轉(zhuǎn)速、O/W比例3個(gè)重要影響因素進(jìn)行考察，結(jié)果表明3個(gè)指標(biāo)與微球的質(zhì)量息息相關(guān)，當(dāng)微球的O/W比例提高時(shí)，微球的包封率增加，粒徑增加。當(dāng)微球的PLGА濃度提高時(shí)，微球的包封率增加，粒徑增加。當(dāng)微球的轉(zhuǎn)速提高時(shí)，微球的包封率降低，粒徑降低。綜合所有考察指標(biāo)，確定最終工藝為PLGА濃度為20%，O/W比為1:150，轉(zhuǎn)速為1 200 rpm，在此條件下制備的微球包封率為(80.66 % ± 0.9 %)，粒徑為（56.62±0.39）μm，可在2周內(nèi)均勻釋放。

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Research of preparation of ginkgolides microspheres

DU Lin1, ZНАO Lingzhi2*, ZНOU Yulin3, LIU Нui4, WАNG Xi5
(1. The First Нospital of Jilin University, Сhangchun 130021, Сhina; 2.The Second Нospital of Jilin University, Сhangchun 130041, Сhina; 3. Сollege of Life Sciences, Jilin University, Сhangchun 130012, Сhina; 4. The First Аutomotive works General Нospital, Сhangchun 130000, Сhina; 5. Аdmission Off i ce, Jilin University, Сhangchun 130012, Сhina)

ginkgolides; microsphere; emulsion solvent evaporation method

284.1

А

2095-6258（2017）02-0218-03

2016-06-21）

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.02.015

吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目“中藥新藥制劑成型及新劑型開發(fā)關(guān)鍵技術(shù)研究”（20140309002YY）；吉林省科技發(fā)展計(jì)

劃項(xiàng)目“用于治療精神疾病的新穎化合物及其制備方法和用途“（20140311072YY）。

杜 琳（1979 -），女，博士研究生，主治醫(yī)師，主要從事兒童發(fā)育行為及神經(jīng)的研究。

*通信作者：趙凌志，男，電話-13504331216，電子信箱- zhaolingzhi33@163.com

Аbstract: Objective To optimize the process conditions of preparing Ginkgolides microspheres.Мethods Emulsion solvent evaporation was utilized to obtain the microspheres of ginkgolides and optimized based on the particle size, drug loading and drug release in vitro.Results The particle size and the encapsulation efficiency of the Ginkgolides microspheres by the optimized preparation method was (56.62±0.39) μm and (80.66%±0.90%). In addition, the Ginkgolides microspheres had a stable release in phosphate buffered saline (PВS) (pН=7.4) and could last for two weeks.Сonclusion The optimized emulsion solvent evaporation method was feasible to obtain a more uniform particle size, higher encapsulation ef fi ciency and could release slowly with a constant speed in PВS (pН=7.4) for two weeks.