不同嚴(yán)重程度阿爾茨海默病患者血漿Aβ40和Aβ42水平的比較

陳靜華 廖 雄 陶雪琴 黃河浪 周躍平 吳 磊

(南昌大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，江西 南昌 330006)

不同嚴(yán)重程度阿爾茨海默病患者血漿Aβ40和Aβ42水平的比較

陳靜華 廖 雄 陶雪琴 黃河浪 周躍平 吳 磊

(南昌大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，江西 南昌 330006)

目的 探討血漿β淀粉樣蛋白(Aβ)濃度對(duì)于評(píng)價(jià)阿爾茨海默病(AD)患者嚴(yán)重程度的應(yīng)用價(jià)值。方法 選取2014～2015年南昌市某社區(qū)老年癡呆隨訪隊(duì)列中全部確診的AD患者134例，按總體衰退量表GDS評(píng)分分為輕、中、重三組，通過(guò)雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)各組血漿中Aβ40 和Aβ42蛋白濃度。結(jié)果 不同嚴(yán)重程度AD患者組間血漿Aβ40濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.250，P=0.619)，Aβ42蛋白濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=24.651，P<0.01)。結(jié)論 血漿Aβ42蛋白濃度的檢測(cè)有助于AD患者嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)，低血漿Aβ42蛋白濃度可能與AD的認(rèn)知功能減退有關(guān)。

阿爾茨海默病；β淀粉樣蛋白

阿爾茨海默病(AD)是一種慢性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，以進(jìn)行性認(rèn)知功能和行為損傷為臨床表現(xiàn)，是老年癡呆最常見的疾病。隨著人口老齡化加劇和人均期望壽命的延長(zhǎng)，AD的發(fā)病率不斷增加〔1〕，目前AD嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)方法主要為氟脫氧葡萄糖正電子發(fā)射成像(FDG-PET)和β淀粉樣蛋白(Aβ)正電子發(fā)射成像技術(shù)〔2〕。然而由于正電子發(fā)射成像費(fèi)用昂貴、操作復(fù)雜等限制了其推廣應(yīng)用，故臨床上急需一種廉價(jià)、易檢測(cè)可推廣的評(píng)價(jià)方法。Aβ尤其是Aβ40和Aβ42蛋白作為AD患者大腦病理?yè)p傷的生物標(biāo)記物成為近年來(lái)AD早期診斷研究的熱點(diǎn)，但關(guān)于其外周循環(huán)血液中的含量與AD的相關(guān)性研究報(bào)道不一。有研究顯示血漿Aβ40和Aβ42水平在AD組和正常對(duì)照組中無(wú)明顯差異，另一些研究表明AD患者中血漿Aβ42和Aβ42/40比例顯著下降〔3〕。本研究檢測(cè)了不同嚴(yán)重程度AD患者血漿中Aβ40和Aβ42的濃度，旨在研究血漿Aβ蛋白濃度對(duì)于評(píng)價(jià)AD患者嚴(yán)重程度的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取課題組2014至2015年南昌市某社區(qū)老年癡呆隨訪隊(duì)列中全部確診的AD患者134例，男55例，女79例，年齡57～85歲，均符合美國(guó)國(guó)立神經(jīng)病、語(yǔ)言交流障礙和卒中研究所——老年性癡呆及相關(guān)疾病學(xué)會(huì)很可能AD的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心腦等器質(zhì)性疾病、視力聽力減退及其他干擾評(píng)估準(zhǔn)確性的精神性疾病。所有受試者均有詳細(xì)的病史記錄、神經(jīng)系統(tǒng)檢查及量表篩查評(píng)分。量表包括：簡(jiǎn)易精神狀態(tài)量表(MMSE)、哈金斯缺血指數(shù)評(píng)分表(HIS)、總體衰退量表(GDS)。AD的嚴(yán)重程度根據(jù)總體衰退量表分級(jí)，GDS評(píng)分3、4分者為輕度，5分為中度，6、7分為重度〔5〕。

1.2 樣本采集 社區(qū)隨訪過(guò)程中所有受試對(duì)象均取靜脈血5 ml置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管，現(xiàn)場(chǎng)靜置2 h后，以1 000 r/min的速度離心3 min，吸取上清液，編號(hào)后及時(shí)帶回實(shí)驗(yàn)室于-70℃冰箱保存。

1.3 檢測(cè)方法 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血漿中Aβ40和Aβ42蛋白濃度，試劑由江蘇依科賽生物科技有限公司提供，操作嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，受試對(duì)象一般情況采用χ2檢驗(yàn)或方差分析，Aβ蛋白濃度采用協(xié)方差分析或非參數(shù)秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料 本研究對(duì)象中輕度AD 56例，中度AD 43例，重度AD 35例。不同嚴(yán)重程度癡呆分組在性別、受教育程度上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，各組間的年齡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，輕度AD患者的年齡較中、重度AD患者小(P<0.05)。見表1。

表1 不同嚴(yán)重程度AD分組的一般情況比較(n)

與輕度AD比較：1)P<0.05

2.2 不同嚴(yán)重程度AD組血漿Aβ40、Aβ42蛋白濃度比較 通過(guò)協(xié)方差分析排除年齡的影響后，不同嚴(yán)重程度AD患者組間血漿Aβ40濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.250，P=0.619)，但各組間Aβ42蛋白濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=24.651，P<0.01)。見表2。

組別Aβ40Aβ42輕度AD118.3±5.684.7±5.3中度AD113.5±4.553.4±5.6重度AD107.2±5.228.5±4.2F值0.25024.651P值0.619<0.01

3 討 論

癡呆是一個(gè)重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題，預(yù)計(jì)到2050年全世界癡呆的患病人數(shù)將達(dá)到1.15億人，其中AD約占50%～70%〔6〕。以往AD患者的神經(jīng)病理?yè)p傷只有通過(guò)尸檢后的報(bào)告確診，隨著生物標(biāo)記物的深入研究，AD患者神經(jīng)病理?yè)p傷過(guò)程在活體狀態(tài)下即能追蹤。Aβ(主要為Aβ40 與Aβ42)是AD患者大腦神經(jīng)損傷最顯著的生物標(biāo)記物，其主要通過(guò)腦脊液直接檢測(cè)和大腦影像學(xué)檢測(cè)Aβ沉積物〔7〕。這些檢測(cè)手段是目前關(guān)于AD的嚴(yán)重程度主要評(píng)價(jià)方法。但由于腰椎穿刺具有侵入性，影像學(xué)檢查又昂貴、復(fù)雜限制了Aβ的廣泛應(yīng)用。

外周血Aβ的濃度與AD或癡呆風(fēng)險(xiǎn)之間的相關(guān)性存在不少爭(zhēng)議，最近Koyama等〔8〕的Meta分析和隨后的一些研究均證實(shí)它們之間的相關(guān)性。但是不同的分析方法、研究設(shè)計(jì)、隨訪時(shí)間研究的得出的結(jié)果間存在明顯差異。本次研究結(jié)果顯示，在控制年齡的影響后AD患者越嚴(yán)重，血漿Aβ42蛋白濃度越低，這與Chouraki等〔9〕在由2 189例非癡呆組成的弗明漢心血管隊(duì)列研究發(fā)現(xiàn)高濃度血漿Aβ42是癡呆的保護(hù)因素(HR=0.80，P<0.01)，Aβ40與AD或癡呆發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)結(jié)果。Izco等〔10〕在小鼠模型也發(fā)現(xiàn)低血漿Aβ42易導(dǎo)致小鼠認(rèn)知功能損傷結(jié)果一致。相反的是國(guó)內(nèi)Zhou等〔11〕研究卻提示AD患者血漿Aβ42濃度高于正常對(duì)照組。Blasko等〔12〕在維也納經(jīng)過(guò)2.5年衰老隨訪研究顯示認(rèn)知水平從正常轉(zhuǎn)變?yōu)锳D患者血漿Aβ42濃度比維持正常認(rèn)知水平者高，血漿Aβ42濃度升高為AD危險(xiǎn)因素。此外，AD神經(jīng)影像學(xué)協(xié)會(huì)研究顯示血漿Aβ水平與輕度認(rèn)知障礙(MCI)轉(zhuǎn)變?yōu)锳D患者無(wú)明顯相關(guān)〔13〕。由于部分血漿Aβ也可來(lái)源于損傷的血小板組織，故血漿Aβ濃度是否能反映腦組織中Aβ的聚集情況仍有待考究。但筆者認(rèn)為血漿Aβ與AD的病情發(fā)展密切相關(guān)，隨著AD患者嚴(yán)重程度增加血漿Aβ42濃度下降的原因有：(1)目前學(xué)界公認(rèn)Aβ的沉積是AD病理生理變化機(jī)制；(2)Aβ42比Aβ40更容易聚集沉積在大腦神經(jīng)元，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷更大〔9〕；(3)Aβ正電子發(fā)射成像技術(shù)研究顯示血漿Aβ42與Aβ40比率的降低失衡將進(jìn)一步使腦組織對(duì)Aβ的攝取增加，導(dǎo)致血漿Aβ42濃度下降〔14〕。

綜上所述，本研究的結(jié)果提示血漿Aβ42濃度的檢測(cè)有助于AD患者嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)，低血漿Aβ42濃度有可能與AD的認(rèn)知功能減退有關(guān)。但是需要更多的大樣本隊(duì)列研究評(píng)價(jià)或證實(shí)血漿Aβ42與AD嚴(yán)重程度之間的聯(lián)系。

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〔2016-04-19修回〕

(編輯 袁左鳴)

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81260441)

吳 磊(1970-)，女，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事老年癡呆疾病及衰老相關(guān)研究。

陳靜華(1991-)，女，碩士，主要從事慢性非傳染病的研究。

R749

A

1005-9202(2017)07-1655-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.07.037