王 維
(長(zhǎng)春建筑學(xué)院體育教研室,吉林 長(zhǎng)春 130604)
黃蘑多糖抗疲勞及抗氧自由基水平的機(jī)制
王 維
(長(zhǎng)春建筑學(xué)院體育教研室,吉林 長(zhǎng)春 130604)
目的 探討黃蘑多糖對(duì)小鼠抗疲勞作用及抗氧自由基水平的影響。方法 檢測(cè)小鼠負(fù)重10%鉛絲力竭游泳時(shí)間,血乳酸、肝糖原含量及全血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。結(jié)果 黃蘑多糖組小鼠的力竭游泳時(shí)間較對(duì)照組顯著延長(zhǎng)、血乳酸含量較對(duì)照組顯著降低(P<0.01,P<0.05);加快運(yùn)動(dòng)后小鼠體內(nèi)血乳酸的消除速度、肝糖原含量較對(duì)照組顯著升高(P<0.01;P<0.05);黃蘑多糖組小鼠全血SOD活性與對(duì)照組比較顯著升高,MDA含量與對(duì)照組比較明顯降低(P<0.01;P<0.05)。結(jié)論 黃蘑多糖具有良好的抗疲勞和抗氧自由基作用。
黃蘑多糖;抗疲勞;氧自由基
黃蘑主要產(chǎn)于長(zhǎng)白山及大興安嶺地區(qū)秋霜期之前,黃蘑多糖是從黃蘑中提取的一種有效成分,具有疏風(fēng)通絡(luò)、滋補(bǔ)強(qiáng)壯作用〔1〕。研究表明,黃蘑多糖具有多種生物活性,包括免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂、抗腫瘤、抗衰老作用〔2,3〕。本實(shí)驗(yàn)旨在探討黃蘑多糖對(duì)小鼠抗疲勞、抗氧自由基的影響及其作用機(jī)制。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性小鼠40只,12月齡,體重(45±5)g,吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為對(duì)照組和黃蘑多糖小劑量組、中劑量組、大劑量組,每組10只。黃蘑多糖小劑量組按20 mg·kg-1·d-1、中劑量組按40 mg·kg-1·d-1、大劑量組按80 mg·kg-1·d-1劑量灌服黃蘑多糖,對(duì)照組每只小鼠灌服等量生理鹽水,飼養(yǎng)期間,小鼠游泳訓(xùn)練2次/w,15 min/次,連續(xù)6 w。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 試劑與儀器 黃蘑多糖由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室提供,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒購(gòu)于南京建成生物公司。高速冷凍離心機(jī),日本產(chǎn);722S型分光光度計(jì),上海分析儀器廠。50 cm×30 cm×25 cm玻璃缸;負(fù)重物,吉林大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室提供。
1.2.2 黃蘑多糖的提取 吉林省長(zhǎng)白山野生黃蘑子實(shí)體,70℃通風(fēng)干燥;100目粉碎,乙醇浸泡后沸水提取,用硫酸-酚法測(cè)定總糖含量,改良lowry氏法測(cè)定總蛋白含量。
1.2.3 小鼠游泳實(shí)驗(yàn) 最后一次灌胃30 min后,將尾部系有10%體重鉛絲的各組小鼠放入玻璃缸中,1只/次,缸內(nèi)水深20 cm,將小鼠投入水內(nèi)游泳,并用秒表計(jì)時(shí)鼻孔沉入水面所需時(shí)間。為小鼠力竭游泳時(shí)間,水溫保持恒定,常用(25±0.5)℃〔4〕。
1.2.4 SOD、MDA測(cè)定與取材 將各組游泳小鼠(力竭的標(biāo)準(zhǔn):小鼠沉入8 s不能上浮為止)馬上取出吸干身上水分脫頸處死,取全血,按試劑盒操作方法分別測(cè)試SOD、MDA含量。
1.2.5 小鼠血乳酸含量的檢測(cè) 各組小鼠泳前安靜時(shí)、泳后休息20、50 min各取尾血1次,乙醛-對(duì)羥基聯(lián)苯比色法測(cè)血乳酸含量。
1.2.6 小鼠肝糖原含量測(cè)定 各組小鼠取肝臟組織,采用蒽酮比色法測(cè)肝糖原含量。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS11.0軟件行t檢驗(yàn)。
2.1 各組小鼠游泳時(shí)間、血乳酸水平比較 黃蘑多糖小、中、大劑量組小鼠游泳時(shí)間〔(10.3±2.00)s、(10.9±2.69)s、(11.5±2.37)s〕明顯長(zhǎng)于對(duì)照組〔(8.2±1.55)s,P<0.01〕。血乳酸含量低于對(duì)照組(P<0.05,P<0.01),大劑量組血乳酸恢復(fù)速率大,堆積乳酸消除快。見(jiàn)表1。黃蘑多糖小、中、大組肝糖原含量〔(45.0±9.52)μg/ml、(44.1±8.15)μg/ml、(42.9±8.23)μg/ml〕與對(duì)照組〔(36.2±4.29)μg/ml〕比較明顯增加(P<0.05,P<0.01)。
組別血乳酸(mg/100ml)運(yùn)動(dòng)前安靜時(shí)運(yùn)動(dòng)后20min運(yùn)動(dòng)后50min血乳酸恢復(fù)速率對(duì)照組6.78±0.7029.18±3.5422.34±2.390.19±0.08黃蘑多糖小劑量組7.07±0.5726.09±2.751)19.03±2.792)0.22±0.14黃蘑多糖中劑量組7.01±0.5526.02±2.081)18.97±2.952)0.21±0.11黃蘑多糖大劑量組6.79±0.5226.49±1.831)16.26±2.492)0.34±0.091)
與對(duì)照組比較:1)P<0.05,2)P<0.01
2.2 各組SOD、MDA水平比較 黃蘑多糖小、中、大組全血SOD活性與對(duì)照組比較明顯升高(P<0.05,P<0.01),MDA含量與對(duì)照組比較明顯降低(P<0.05,P<0.01)。見(jiàn)表2。
組別SOD(nU/ml)MDA(nmol/ml)對(duì)照組147.96±29.205.41±0.63黃蘑多糖小劑量組173.04±22.301)4.59±0.931)黃蘑多糖中劑量組174.81±21.831)4.32±1.231)黃蘑多糖大劑量組185.50±24.742)4.03±1.152)
研究表明,植物多糖成分有抗疲勞活性〔5~7〕,多糖能顯著提高運(yùn)動(dòng)能力,延緩疲勞,也能改善動(dòng)物的生理狀態(tài),各種多糖具有抗氧化清除自由基作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,黃蘑多糖可延長(zhǎng)小鼠負(fù)重力竭游泳時(shí)間,降低機(jī)體運(yùn)動(dòng)后血乳酸的積累,增加肝糖原含量而提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力,因而具有抗疲勞作用。自由基是一種具有強(qiáng)氧化反應(yīng)的化學(xué)物質(zhì),自由基含量變化是人體系統(tǒng)衰老的重要指標(biāo)之一。SOD廣泛存在于機(jī)體細(xì)胞中,自由基的產(chǎn)生和消除處于動(dòng)態(tài)平衡中以維持機(jī)體正常代謝,使機(jī)體免受自由基的損傷,SOD活性升高可以減輕組織細(xì)胞過(guò)氧化損傷〔8〕。氧自由基是含有一個(gè)不成對(duì)電子的原子團(tuán),機(jī)體氧化反應(yīng)中產(chǎn)生的有害化合物具有強(qiáng)氧化性,可損害機(jī)體細(xì)胞,進(jìn)而引起慢性疾病及衰老效應(yīng)。大量研究表明,人體本身具有清除多余自由基的氧化活性酶,主要包括SOD、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶等〔9〕,酶類物質(zhì)可使人體內(nèi)的活性氧自由基變?yōu)榛钚暂^低的物質(zhì),削弱其對(duì)機(jī)體的攻擊力。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示黃蘑多糖通過(guò)升高SOD活性,清除自由基,減少脂質(zhì)過(guò)氧化。
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〔2016-11-10修回〕
(編輯 曲 莉)
王 維(1982-),男,講師,主要從事體育教學(xué)研究。
R28
A
1005-9202(2017)07-1620-02;
10.3969/j.issn.1005-9202.2017.07.022