嘌呤類似物治療炎癥性腸病的藥理作用和臨床應用

王燕

【中圖分類號】R574 【文獻標識碼】B 【文章編號】2095-6851（2017）03-0-02

炎癥性腸?。↖BD）是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，病因尚不明確，包括潰瘍性結(jié)腸炎（UC）和克羅恩病（CD）。其中硫唑嘌呤（AZA）為維持治療和誘導緩解炎癥性腸病的藥物，1.5～2.5mg·kg-1·d–1為常用劑量，是一種較常見的免疫制劑，可以實現(xiàn)減少患者激素的耐藥性和依賴性[1]。由于個體差異，部分患者服用常規(guī)劑量的AZA后，臨床癥狀并無緩解，甚至嚴重者出現(xiàn)毒副反應或骨髓移植以及肝臟毒性，因此限制了臨床應用。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取確診為炎癥性腸病并擬接受嘌呤類似物治療的患者15例，男性7例，女性8例，其中3例為潰瘍性結(jié)腸炎患者，12例為克羅恩病患者。

潰瘍性結(jié)腸炎的診斷：病程超過半年，伴有反復黏液膿血便，排除了細菌性菌痢、慢性血吸蟲病、阿米巴痢疾、腸結(jié)核病等，且病變處明顯可見彌漫性多發(fā)潰瘍。

克羅恩病的診斷：病程超過半年，右下腹或臍周腹痛、腹瀉并伴有肛瘺、腹部腫塊、貧血、肛周病變等全身癥狀，排除腸結(jié)核、阿米巴痢疾等慢性腸道感染、缺血性腸炎、白塞病等，內(nèi)鏡下可見節(jié)段性病變、阿弗他潰瘍等表現(xiàn)。

1.2 方法

1.2.1 6-TGNs濃度測定法 在酸性條件下，6-TGNs上的磷酸基團水解脫落成為6-TG，可作為定量TGNs濃度。

1.2.2 TPMT基因基因檢測方法 采用基因擴增儀、高速離心機、焦磷酸測序儀等儀器進行人外周血基因組DNA提取。

2.結(jié)果

2.1 紅細胞內(nèi)6-TGNs濃度測定

采用色譜法進行相關(guān)測定，得出結(jié)果，得回歸方程Y=0.0223X-0.0325，紅細胞中6-TGNs濃度在7.87～787.40pmol范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9997）；RSD在0.46%～7.64%之間（日內(nèi)、日間精密度），高、中、低質(zhì)控液方法回收率在99.10%～102.07%之間，RSD在3.65%～6.71%之間（穩(wěn)定性實驗結(jié)果）。

2.2 TPMT基因檢測

TPMT*3野生型為460位G90%，A10%，719位A%，G10%。雜合型突變位460位G，A堿基頻率30%～70%；719位A，G堿基頻率30%～70%，純合子突變?yōu)?60位G10%，A90%；719位A0%，G90%?；驒z測序列和結(jié)果。

2.3 測定結(jié)果

15例患者在接受AZA治療前進行TPMTA719G和G460A位點的檢測。長期服用嘌呤類似物的炎癥性腸病患者（每日劑量50mg、75mg、100mg），分別測定紅細胞內(nèi)6-TGNs的濃度，平均值位319.44pmol/（8*108）RBC?；颊叻肁ZA首次檢測結(jié)果，見表2。

所有患者在服用AZA之前或治療過程中進行基因位點的檢測，G460A位點可見基因型位GG、GA、AA，A719G位點可見基因型為AA、AG、GG，結(jié)果均為野生型，這個結(jié)果提示患者使用嘌呤類似物時發(fā)生骨髓毒副作用的風險較低。

3.討論

炎癥性腸病和自身免疫疾病及相關(guān)疾病的治療可以應用非特異性的免疫抑制劑，例如6-巰基嘌呤和AZA等嘌呤類藥物。嘌呤類似物為無活性的前體藥物，需要經(jīng)過體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)變?yōu)?-TGNs后才能發(fā)揮療效。臨床上測定人紅細胞中6-TGNs的濃度，大多通過6-TGNs在酸性條件下磷酸基團水解后生成6-TG后采用高效液相色譜法進行測定，這種測定方法專屬性強并且簡單快捷。

本研究采用的焦磷酸測序法適用于對已知的短序列的測序分析，來證明它適用于基因的多形態(tài)的分析，并且具有林敏度高、精確性好的特點，可以直觀、快速、適時、低成本、高通量的進行單核苷酸多態(tài)性研究[2]。本研究檢測了15例患者的紅細胞6-TGNs濃度，對于部分患者的血藥濃度進行了相應的劑量調(diào)整，結(jié)果表明，嘌呤類似物治療炎癥性腸病取得了較好的療效，同時也可以預防產(chǎn)生的毒副作用。但本研究檢測的15例患者的G460A和A719G基因序列，并未發(fā)現(xiàn)TPMT*3C的突變，因此今后需擴大病例數(shù)來進一步檢測證實TPMT基因聯(lián)合6-TGNs濃度檢測對于臨床治療炎癥性腸病的指導意義。

參考文獻

[1]奎映仙.糖皮質(zhì)激素及嘌呤類私物在炎癥性腸病治療中的應用與評價[J].中國社區(qū)醫(yī)生，2016，32（2），18-20.

[2]萬子睿，謝海棠，俞競等.焦磷酸測序分析ABCG2基因多態(tài)性方法的建立[J].中國臨床藥理學與治療學，2012，17（7）：779-784.