柴芍六君口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

于雷

摘 要：本實驗對柴芍六君口服液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行研究。含量測定方法：采用安捷倫C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.1%醋酸（20∶80）為流動相，檢測波長為276nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）為展開劑，以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液為顯色劑，在60℃加熱至斑點顯色清晰，置日光及紫外燈（365nm）下檢視。結(jié)論：本法簡便、準(zhǔn)確，可作為柴芍六君口服液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：柴芍六君口服液；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；研究

柴芍六君口服液具有舒肝解郁、健脾和胃、益氣養(yǎng)血的功效，由黨參、柴胡、白術(shù)、甘草等組成。甘草別名國老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子，是一種補益中草藥。甘草生用偏涼，可瀉火解毒、緩急止痛；炙用偏溫，能散表寒、補中益氣?！端幮哉摗酚涊d：“主腹中冷痛，治驚癇，除腹脹滿；補益五臟；制諸藥毒；養(yǎng)腎氣內(nèi)傷，令人陰（不）痿；主婦人血瀝腰痛；虛而多熱；加而用之。”甘草具有抗炎、抗過敏、解毒、祛痰、抗腫瘤、抗病毒、防止動脈硬化等作用[1-5]。柴胡用于感冒發(fā)熱、寒熱往來、瘧疾、肝郁氣滯、胸肋脹痛、子宮脫落、月經(jīng)不調(diào)等。柴胡始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品?！度杖A子本草》記載：“安魂定魄。補五勞七傷，一切虛損、驚悸、煩悶、健忘。通九竅，利百脈，益精養(yǎng)氣，壯筋骨，解冷熱?！北緦嶒瀸Σ裆至诜旱馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：KHW-D-1LC精密拉伸水浴鍋（上?？坪銓崢I(yè)發(fā)展有限公司）；FA2004B電子分析天平（上海右一儀器有限公司）；1810-B石英自動雙重蒸餾水器（上海康路儀器設(shè)備有限公司）。

754紫外可見分光光度計（西安華辰樂天實驗室設(shè)備有限公司）；EX1600高效液相色譜儀（上海棱譜儀器儀表有限公司）；R-1050大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；半自動點樣儀LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；雙槽展開缸 PF 562C（瑞士CAMAG）；DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海和呈儀器制造有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：甘草苷

1.4 試劑：甲醇（北京亞太龍興化工有限公司）、乙腈（北京亞太龍興化工有限公司）、三氯甲烷（南京大唐化工有限公司）、二甲氨基苯甲醛（南京大唐化工有限公司）、硫酸（淄博齊泰石油化工有限公司）、磷酸（北京亞太龍興化工有限公司）、正丁醇（上?；翩诨び邢薰荆?、乙醇（南京大唐化工有限公司）、醋酸（南京大唐化工有限公司）。

1.5 試藥：柴芍六君口服液

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下。流動相：乙腈-0.1%醋酸（20∶80）為流動相，檢測波長：276nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按甘草苷峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取甘草苷對照品適量，置容量瓶中，加70%乙醇制成每1mL含100μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取柴芍六君口服液適量，精密量取，水浴蒸干，加15毫升70%乙醇超聲提取30分鐘，過濾，將濾液轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4 專屬性試驗

取除甘草以外黨參、陳皮、白芍、白術(shù)、柴胡等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述實驗方法檢測，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.68%，表明本方法精密度良好。

2.6 對照品的線性考察

精密稱取適量甘草苷對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含20、40、80、160、240、320微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品進樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，甘草苷在20～320μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7 重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的柴芍六君口服液樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.71%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 準(zhǔn)確度試驗

取對照品適量分別精密加入柴芍六君口服液中，按含量測定進行測定，計算回收率為99.3%，RSD為0.69%。

3 鑒別

取柴芍六君口服液適量（約相當(dāng)于柴胡藥材1g），用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液50ml洗滌1次，再用正丁醇飽和的水50ml洗滌1次，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取1克柴胡對照藥材，按上述方法制備，作為對照品溶液。取除柴胡以外黨參、陳皮、白芍、白術(shù)、甘草等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述方法制成陰性對照樣品。照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述三種溶液各10μl，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以含2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液，在60℃加熱至斑點顯色清晰，置日光及紫外燈（365nm）下檢視。

4 結(jié)論

本實驗分離效果好、方法簡便、快捷、準(zhǔn)確、專屬性好，可用于柴芍六君口服液中甘草苷的含量測定。樣品與柴胡對照藥材對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。該鑒別方法專屬性強，操作簡單，可用于柴芍六君口服液中柴胡的鑒別。

參考文獻

[1]王兵，王亞新，趙紅燕，宗巖，徐俊杰.甘草的主要成分及其藥理作用的研究進展[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報，2013（03）.

[2]朱雪峰，謝鯤鵬，霍洪楠，謝明杰.甘草提取物的抑菌作用及其對小鼠免疫功能的影響[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2013（03）.

[3]高雪巖，王文全，魏勝利，李衛(wèi)東.甘草及其活性成分的藥理活性研究進展[J].中國中藥雜志，2009（21）.

[4]張學(xué)禮，金國琴，戴薇薇，夏花英，姚領(lǐng)愛，龔張斌，康湘萍，黎志萍.甘麥大棗湯加味對抑郁癥大鼠海馬cAMP-蛋白激酶A途徑的影響[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2006（04）.

[5]朱海琴，范衛(wèi)新，張卉.甘草提取物對人毛乳頭細胞增殖和分泌血管內(nèi)皮生長因子的影響[J].臨床皮膚科雜志，2007（04）.