微膠囊化酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用進(jìn)展

孫艷偉，張澤生，2，3，王田心，*，李雨蒙，秦程廣

（1.天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院，天津300457；2.天津科技大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300457；3.天津食品安全低碳制造協(xié)同創(chuàng)新中心，天津300457）

微膠囊化酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用進(jìn)展

孫艷偉1，張澤生1，2，3，王田心1，*，李雨蒙1，秦程廣1

（1.天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院，天津300457；2.天津科技大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300457；3.天津食品安全低碳制造協(xié)同創(chuàng)新中心，天津300457）

酶的微膠囊化技術(shù)是將酶包埋、封存在微型膠囊內(nèi)成為一種固體微粒產(chǎn)品的技術(shù)。近年來(lái)，微膠囊化技術(shù)得到了迅速的發(fā)展，在酶的固定化方面有著廣闊的應(yīng)用前景。首先對(duì)微膠囊技術(shù)進(jìn)行概述，著重介紹微膠囊化酶的制備方法及在食品工業(yè)中應(yīng)用的研究進(jìn)展，討論目前微膠囊化酶技術(shù)中存在的問(wèn)題，并對(duì)其發(fā)展前景進(jìn)行了展望。

酶；微膠囊；制備方法；應(yīng)用

微膠囊技術(shù)的研究始于20世紀(jì)30年代，發(fā)展迅速，用途廣泛，現(xiàn)已成為食品科技領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一，其在食品方面的應(yīng)用，滿(mǎn)足了市場(chǎng)的新需求，加快了食品工業(yè)的快速發(fā)展。微膠囊技術(shù)通過(guò)采用成膜材料將食品成分進(jìn)行包埋，可以改變物質(zhì)形態(tài)，保護(hù)食品中的活性成分，減少營(yíng)養(yǎng)成分的損失，鞏固和改善物質(zhì)的穩(wěn)定性等，許多以往由于技術(shù)障礙而得不到開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品，通過(guò)微膠囊技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)[1-2]。

酶具有專(zhuān)一性強(qiáng)、催化效率高、反應(yīng)條件溫和等特點(diǎn)，作為一種生物制劑廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品等行業(yè)中。但酶的本質(zhì)是由氨基酸組成的蛋白質(zhì)，易被氧化失活、耐熱性較差、易與銅離子和亞鐵離子等金屬離子發(fā)生作用而失活，其應(yīng)用受到一定的限制，而且大多數(shù)酶要在特定的條件（溫度、濃度、酸堿環(huán)境）下才能發(fā)揮活性[3]。為解決這一問(wèn)題，可用微膠囊對(duì)酶進(jìn)行包埋，不僅能夠提高酶的穩(wěn)定性，還可以通過(guò)選擇合適的壁材，達(dá)到控制其釋放的目的[4-5]。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外開(kāi)展了許多微膠囊化酶的研究，本文綜述了這方面的研究進(jìn)展，旨在為我國(guó)食品工業(yè)中微膠囊技術(shù)的應(yīng)用及研究提供參考。

1 微膠囊概述

1.1 微膠囊技術(shù)

微膠囊技術(shù)是指借助特定的工藝手段，利用天然的或者人工合成的高分子材料作為壁材、來(lái)包埋固體、液體或氣體物質(zhì)等芯材，形成直徑在1 μm～5 000 μm范圍內(nèi)、具有半透性或密封囊膜的微型膠囊，并在需要時(shí)將芯材釋放出來(lái)的一種技術(shù)[6-7]。

微膠囊技術(shù)應(yīng)用于食品工業(yè)，可以通過(guò)微膠囊化將食品成分與周?chē)h(huán)境隔離開(kāi)，降低了水、氧氣、溫度、光等環(huán)境因素對(duì)芯材的影響[8]，從而可以改善食品成分的物理性質(zhì)（顏色、外觀、表觀密度、溶解性等），提高物質(zhì)的穩(wěn)定性；保護(hù)食品中的活性成分，減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，使其保持原有的風(fēng)味；另外，通過(guò)選擇壁材，可根據(jù)需要控制物質(zhì)的釋放[9-10]。

1.2 微膠囊的分類(lèi)

按微膠囊壁材與芯材性能的不同，可以將微膠囊分為緩釋型、壓敏型、熱敏型、pH敏感型、光敏型以及膨脹型6種微膠囊，其中pH敏感型微膠囊近年來(lái)得到廣泛的應(yīng)用與開(kāi)發(fā)。該類(lèi)型微膠囊的壁材在某個(gè)pH范圍內(nèi)穩(wěn)定，當(dāng)pH變化時(shí)，壁材會(huì)溶解、降解、破裂，釋放出囊心物質(zhì)[11]。例如，針對(duì)腸道pH值環(huán)境普遍使用的海藻酸鈉-殼聚糖類(lèi)壁材就是普遍使用的一種pH敏感型微膠囊壁材[12]，不僅可以用于結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的小分子化合物的穩(wěn)態(tài)化處理[13-14]，在活性蛋白及酶的穩(wěn)態(tài)化處理方面也有所應(yīng)用[15]。

1.3 微膠囊化酶壁材的選擇

微膠囊的性能取決于芯材、壁材及微膠囊技術(shù)，壁材是影響微膠囊物化性質(zhì)的主要因素[16-17]。對(duì)于一種微膠囊產(chǎn)品來(lái)說(shuō)，合適的壁材非常重要，壁材選擇的恰當(dāng)，可以使芯材的活性得到充分的發(fā)揮[18]。

微膠囊化酶的壁材應(yīng)依據(jù)芯材的特性來(lái)選擇，一般需要注意以下幾點(diǎn)：（1）孔徑大小要合適。既要能讓被催化物質(zhì)順利通過(guò)，又要能避免酶滲透損失。（2）毒性、穩(wěn)定性的要求。一般應(yīng)用于食品的要求是材料穩(wěn)定、無(wú)毒、無(wú)副作用、無(wú)刺激性。（3）與芯材相配且不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。（4）力求廉價(jià)，來(lái)源廣泛，成本較低[19-20]。大部分的壁材是高分子材料，實(shí)際應(yīng)用中，很少只用一種包膜材料來(lái)實(shí)現(xiàn)微膠囊化，而是常用2種或2種以上的壁材復(fù)合物來(lái)達(dá)到理想的包埋效果[21]。目前應(yīng)用最廣的是殼聚糖、海藻酸鈉、乙基纖維素和脂質(zhì)體等[20]。

2 微膠囊化酶的制備方法

微膠囊化酶的制備方法主要有干燥浴法、超臨界流體技術(shù)、脂質(zhì)體技術(shù)及內(nèi)源乳化法等。

2.1 干燥浴法

干燥浴法制備微膠囊，是把壁材與芯材的混合溶液以微滴形式分散到具有揮發(fā)性的介質(zhì)中，揮發(fā)性的分散介質(zhì)快速?gòu)囊旱沃腥コ纬赡冶?，最后通過(guò)加熱、減壓、攪拌、溶劑萃取、冷卻或冷凍等方法將囊壁中的溶劑除掉，即制成微膠囊[22]。干燥浴法包括水浴干燥法和油浴干燥法兩種，水浴干燥法在酶的微膠囊化中更常用；壁材選用疏水性高分子材料，常用的是乙基纖維素；有機(jī)溶劑采用沸點(diǎn)比水低的疏水性溶劑，以便在干燥過(guò)程中更容易揮發(fā)，常用的二氯甲烷[23]。干燥浴法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便、溫和，但該方法的不足之處在于反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，不易控制，產(chǎn)品的產(chǎn)量低[22]。龔平等[24]分別采用水浴干燥法和油浴干燥法制備超氧化物歧化酶微膠囊，結(jié)果表明，通過(guò)水浴干燥制得的微膠囊比通過(guò)油浴干燥制得的微膠囊整體效果好，表面較光滑，圓整度較好，大小均一，無(wú)粘連現(xiàn)象等。

2.2 超臨界流體技術(shù)

超臨界流體技術(shù)制備微膠囊主要有超臨界快速膨脹過(guò)程（Rapid Expansion of Supercritical Solution，簡(jiǎn)稱(chēng)RESS）和超臨界氣體抗溶劑過(guò)程（Gas Anti-Solution），但RESS過(guò)程制備一般適用于芯材、壁材均能溶于超臨界流體的體系[25]。超臨界流體技術(shù)制備微膠囊有方便、易控制等優(yōu)點(diǎn)，特別是超臨界二氧化碳的臨界溫度是常溫，而且制備過(guò)程中無(wú)殘留溶劑，對(duì)于藥物、生物制品等熱敏性物質(zhì)都很適用[26-27]。黃光宇等[28]以木瓜蛋白酶為芯材、乙基纖維素為壁材對(duì)超臨界CO2抗溶劑法制備微膠囊的過(guò)程進(jìn)行了研究。

2.3 脂質(zhì)體技術(shù)

脂質(zhì)體包被法是利用溶于油相的表面活性劑或具表面活性的脂質(zhì)體將酶包被。其具備結(jié)構(gòu)多樣，通過(guò)改變尺寸和脂質(zhì)組成，有助于提高酶作用的選擇性；對(duì)包埋物的容納性好；可將穩(wěn)定劑等多種物質(zhì)與酶一起包埋，從而提高酶的穩(wěn)定性，并能達(dá)到很高的內(nèi)容物脂質(zhì)比；作為一種天然無(wú)毒；生物可降解，貯存穩(wěn)定的新型載體，脂質(zhì)體受到廣泛關(guān)注。但是脂質(zhì)體對(duì)酶的包埋率低，成本較高[29-30]。Anjani等[31]用脂質(zhì)體包裹加速干酪風(fēng)味的酶系，縮短了干酪成熟期，且阻止了干酪變質(zhì)，微膠囊化酶除穩(wěn)定性提高外，還具有控制釋放性。

2.4 內(nèi)源乳化法

乳化法包括外源乳化法和內(nèi)源乳化法，這種方法生產(chǎn)規(guī)模比較大，而且制成的微膠囊粒徑小而均勻，表面光滑[32]。內(nèi)源乳化法是內(nèi)源乳化法是通過(guò)酸化海藻酸鈉包埋的水不溶性鈣鹽，緩慢放出鈣離子進(jìn)行凝膠的內(nèi)源凝膠法，制得的微膠囊微球與外源乳化法相比，更具有可控性，且粒徑分布更均勻[33]。乳化過(guò)程中水相和油相的比例影響微膠囊的粒徑分布和包埋率等性質(zhì)，一般情況下，水相和油相的體積比在1∶2和1∶5之間。內(nèi)源乳化法制備過(guò)程中使用的油溶性酸種類(lèi)很多，但通常選擇的是檸檬酸、乳酸和乙酸，其中乙酸的效果最佳[34]。王霞[35]用內(nèi)源乳化的方法包埋葡萄糖氧化酶添加至面粉中改善其烘焙品質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，微膠囊化葡萄糖氧化酶可以比原酶更好地改善面團(tuán)特性和面包烘焙品質(zhì)。劉若男[32]采用內(nèi)源乳化法成功制備出溶菌酶微膠囊，在模擬胃液中2 h后，微膠囊化溶菌酶活性保留率為89.5%，游離酶的活性保留率僅為31.7%，包埋后的溶菌酶活性保留率比未包埋時(shí)明顯提高。

2.5 其他制備方法

劉博等[36]以殼聚糖、海藻酸鈉為載體，采用脈沖電場(chǎng)工藝成功地對(duì)脂肪酶進(jìn)行了固定化。該制備工藝具有生物相容性好、制備過(guò)程溫和、成本低廉等特點(diǎn)，在細(xì)胞培養(yǎng)、藥物緩釋等領(lǐng)域已有應(yīng)用[37-38]；Yao等[39]利用磁性碳質(zhì)微球?qū)σ鹊鞍酌高M(jìn)行了固定化，與傳統(tǒng)的制備方法相比，這種磁性胰蛋白酶微球具有顯著的蛋白水解功效，能夠加速蛋白水解過(guò)程，因而成功地應(yīng)用于蛋白質(zhì)的快速水解方面，同時(shí)，磁性微球的合成簡(jiǎn)單，材料價(jià)格低廉，因而在蛋白質(zhì)組學(xué)的大規(guī)模研究方面具有很好的應(yīng)用前景；Akamatsu等[40]以殼聚糖為壁材，采用SPG膜乳化技術(shù)成功制備出了單分散溶菌酶微球，并且能夠控制微球的粒徑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用SPG膜乳化技術(shù)制備微膠囊化溶菌酶，酶活性保留率大約為50%。

3 微膠囊化酶的研究新進(jìn)展

近年來(lái)隨著微膠囊技術(shù)的研究日益成熟，它作為一種固定化技術(shù)在酶方面的應(yīng)用也引起國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注，在食品及保健品方面國(guó)內(nèi)外主要的研究集中在超氧化物歧化酶、溶菌酶、葡萄糖氧化酶及納豆激酶等酶類(lèi)。

3.1 超氧化物歧化酶的微膠囊化

超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）是一類(lèi)金屬蛋白酶類(lèi)，在生物體內(nèi)專(zhuān)一地清除氧自由基，保持生物體內(nèi)氧自由基的平衡，減少其對(duì)生物體的損害。SOD在體外穩(wěn)定性差，受溫度、氧氣等因素影響容易失活，而且具有一定的免疫原性，這限制了其應(yīng)用[41-42]。龔平[24]以乙基纖維素為囊材包埋SOD，對(duì)油中干燥法和水中干燥法兩種制備方法進(jìn)行了初步的比較，結(jié)果表明，采用后者制得的微膠囊形狀規(guī)則且粒徑分布均勻；趙有璽等[43]采用水中干燥法，以乙基纖維素為壁材，對(duì)超氧化物歧化酶進(jìn)行包埋，形成的微膠囊形狀規(guī)則、粒徑分布均勻；之后對(duì)微膠囊進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析，結(jié)果表明，乙基纖維素與SOD分子間形成很強(qiáng)的分子間相互作用，但這種作用不是化學(xué)作用。這對(duì)于進(jìn)一步了解微膠囊的形成機(jī)制，控釋機(jī)制和改進(jìn)微膠囊性能，提供理論依據(jù)。

3.2 溶菌酶的微膠囊化

溶菌酶添加到產(chǎn)品中時(shí)，溫度、光等條件都會(huì)對(duì)溶菌酶活性有影響，進(jìn)而影響其加工貯存性；另外溶菌酶在經(jīng)過(guò)胃腸道時(shí)，會(huì)被胃酸及胃蛋白酶分解成小分子，活性損失很大，生物利用度很低，因而其應(yīng)用受到限制[32]。為了使溶菌酶在腸道內(nèi)發(fā)揮其生理功能，劉若男[32]采用殼聚糖-海藻酸鈉對(duì)溶菌酶進(jìn)行了微膠囊化，得到的微膠囊在模擬胃液處理后溶菌酶保留活性達(dá)90.0%。微生物溶菌酶作為一種高效、廣譜的天然抑菌物質(zhì)廣受關(guān)注，在食品保鮮及極畜禽抗病方面有這廣闊的應(yīng)用前景。但是微生物溶菌酶的熱穩(wěn)定性很差，所以在食品及飼料的加工過(guò)程中易造成活力損失，因而沒(méi)有被廣泛應(yīng)用[44]。費(fèi)國(guó)琴[44]采用銳孔-凝固浴法，以海藻酸鈉為主要壁材，探索適合的制備工藝條件并采用響應(yīng)面法進(jìn)行了優(yōu)化，經(jīng)過(guò)優(yōu)化后，微生物溶菌酶包埋率為92.10%，有一定提高，在實(shí)際應(yīng)用中具有一定的指導(dǎo)意義。

3.3 葡萄糖氧化酶的微膠囊化

早已被證實(shí)，癌細(xì)胞中的活性氧含量高于正常細(xì)胞，因此氧化治療成為了探索癌癥新療法的一個(gè)新的方向，Abdekhodaiea等[45]利用殼聚糖-海藻酸鈣為壁材，采用內(nèi)源乳化法對(duì)葡萄糖氧化酶進(jìn)行了包埋，并針對(duì)其對(duì)癌細(xì)胞的作用進(jìn)行了體內(nèi)及體外研究，體外研究表明，在葡萄糖糖化酶的負(fù)荷水平相同的情況下，直徑較小的葡糖糖氧化酶微球比直徑較大的葡糖糖氧化酶微球產(chǎn)生更多的H2O2，殺死更多的癌細(xì)胞。葡萄糖氧化酶是一種快速氧化劑，催化速度很快，游離的葡萄糖氧化酶加入面團(tuán)，會(huì)過(guò)早地產(chǎn)生H2O2，而使得面團(tuán)變硬[35]。王霞等[46]用內(nèi)源乳化的方法包埋葡萄糖氧化酶添加至面粉中改善其烘焙品質(zhì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，微膠囊化葡萄糖氧化酶可以比原酶更好地改善面團(tuán)特性和面包烘焙品質(zhì)。

3.4 納豆激酶的微膠囊化

目前，血栓及栓塞類(lèi)疾病嚴(yán)重威脅人們的健康，納豆激酶因溶栓作用強(qiáng)，且成本低廉、安全無(wú)毒而受到關(guān)注，但目前對(duì)納豆激酶的研究還不是很成熟，為了長(zhǎng)期有效保持納豆激酶的活性，程云[47]采用海藻酸鈉/CMC對(duì)納豆激酶進(jìn)行了包埋，經(jīng)過(guò)包埋的納豆激酶，其酶活受到了一定程度的保護(hù)，且制得的微膠囊粒徑小、外觀規(guī)則并且酶活的回收率高。陳景鑫[48]研究了復(fù)凝聚法、固定化法及環(huán)糊精包絡(luò)法制備納豆激酶的工藝條件，并對(duì)微膠囊化納豆激酶的穩(wěn)定性進(jìn)行了分析，最后進(jìn)行了模擬胃環(huán)境的體外實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，將納豆激酶微膠囊化后基本沒(méi)有改變?nèi)芩ㄌ匦裕辉谀M胃環(huán)境的體外實(shí)驗(yàn)中，納豆激酶微膠囊在正常的胃腸道酸性環(huán)境中仍具有一定的活性，而未經(jīng)微膠囊化的納豆激酶幾乎完全喪失活性。通過(guò)比較分析，確定環(huán)糊精包絡(luò)法為最佳制備納豆激酶微膠囊的方法，為納豆激酶在保健品及藥品的應(yīng)用有一定的意義。

4 展望

微膠囊技術(shù)是21世紀(jì)重點(diǎn)研究開(kāi)發(fā)的高新技術(shù)之一，具有很高的利用價(jià)值。我國(guó)對(duì)微膠囊技術(shù)的研究及應(yīng)用起步較晚，尤其是在酶的微膠囊化方面，研究得還很少，需要更深入的研究。首先，為了擴(kuò)大微膠囊化酶在食品工業(yè)及保健品行業(yè)的應(yīng)用，亟需開(kāi)發(fā)安全無(wú)毒、來(lái)源廣泛的壁材；其次，微膠囊化酶的表征目前還無(wú)法準(zhǔn)確表達(dá)，也沒(méi)有一種簡(jiǎn)便可行的方法或技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)；此外，需要對(duì)不同壁材與酶之間的相互作用進(jìn)行理論研究，了解其相互作用機(jī)制，以便為微膠囊化酶的應(yīng)用提供參考。

[1] Onwulata C I.Encapsulation of new active ingredients[J].Annual Review of Food Science Technology,2012,3:183-202

[2] 趙磊,秦翠麗.微膠囊技術(shù)及其在食品加工中的應(yīng)用[J].中國(guó)釀造,2009(5):15

[3] 萬(wàn)明春.飼用酶制劑的研究與應(yīng)用[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2001,13(3): 43-49

[4]Satit P,Nalena P,Worawadee C,et al.Etgyl cellulose microcapsules for protecting and controlled release of folic acid[J].Aaps Pharmscitech,2009,10(4):1104-1112

[5] Han L L,Bi L W,Zhao Z D,et al.Preparation and characterization of microcapsule containing squalene[J].Bioenerg Res,2013,6:1243-1251

[6]王芳,田建文.微膠囊技術(shù)在食品抗氧化劑中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].食品與機(jī)械,2010,26(4):149-152

[7]洪柯江,滕斌,李宜.微膠囊技術(shù)及其在農(nóng)產(chǎn)品加工領(lǐng)域中的應(yīng)用[J].中國(guó)農(nóng)機(jī)化,2010(2):60-64

[8] Minfeng J P,Michael D,Svetlana Z.Production of corn zein microparticles with loaded lysozyme directly extracted from hen egg white using spray drying:Extraction studies[J].Food Chemistry, 2009,115(2):509-514

[9] 劉陽(yáng).淺談微膠囊技術(shù)及其在食品添加劑中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代商業(yè),2008,21:278

[10]Kashappa G H,Desai,Hyun J P.Recent developments in microencapsulation of food ingredients[J].Drying Technology,2005,23(7): 1361-1394

[11]鄭戰(zhàn)偉,夏德水,孫娟.微膠囊技術(shù)及其在發(fā)酵產(chǎn)品中的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2011,32(8):423-427

[12]Priscilla V F,Daniel D S,Mauro S P,et al.Microcapsules of alginate/chitosan containing magnetic nanoparticles for controlled release of insulin[J].Colloids and Surfaces B:Biointerfaces,2010,81 (1):206-211

[13]Loreana L,Alexandre L P,Valfredo F,et al.Development and evaluation of pH-sensitive sodium alginate/chitosan micropaticles containing the antitubercukosis drug rifampicin[J].Materials Science and Engineering:C,2014,60:27-36

[14]Wang Q,Xie X,Zhang X,et al.Preparation and swelling properties of pH-sensitive composite hydrogel beads based on chitosan-gpoly(acrylic acid)/vermiculite and sodium alginate for diclofenac controlled release[J].International Journal of Biological Macromolecules,2010,46(3):356-362

[15]Ehab T,Mansoor A.Enzyme immobilization in novel alginate-chitosan core-shell microcapsules[J].Biomaterials,2004,25(10):1937-1945

[16]朱曉路,謝巖黎,鄒軍軍,等.壁材對(duì)微膠囊物化性質(zhì)的影響[J].食品科技,2015,40(7):99-102

[17]王芬.壁材流變學(xué)特性對(duì)微膠囊物化性質(zhì)的影響[D].鄭州:河南工業(yè)大學(xué),2013

[18]蔡茜彤,段小明,馮敘橋,等.微膠囊技術(shù)及其在食品添加劑中的應(yīng)用與展望[J].食品與機(jī)械,2014,30(4):247-251

[19]吳克剛,柴向華.食品微膠囊技術(shù)[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社, 2006:4-7,194-242

[20]Shulkin A,Ster H D.Polymer microcapsules by interfacial polyaddition between styrene-maleic anhydride copolymers and amines[J]. Journal of Membrane Science,2002,209:421-432

[21]陳小威,孫尚德,周文雅.微膠囊技術(shù)及其在功能性食品中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊),2012(11):139-142

[22]Diwan M,Park T G.Pegylation enhance sprotein stability during encapsulation in PLGA microspheres[J].Journal of Controlled Release, 2001,73:233-244

[23]Genta I,Perugini P,Pavanetto F,et al.Enzyme loaded Biodegradable microspheres in vitro ex vivo evaluation[J].Journal of Controlled Release,2001,77:287-295

[24]龔平,俞軍,趙立晶.超氧化物歧化酶微膠囊的兩種制備方法的研究[J].食品工業(yè),2008(4):62-63

[25]Jung J,Perrut M.Particle design using supercritical fluids:Literature and patent surcey[J].Journal of Supercritical Fluilds,2001,20: 179-219

[26]劉芳,鄧修.超臨界狀態(tài)下微膠囊化綜述[J].化學(xué)世界,2005,46 (2):118-121

[27]孫勤,孫豐來(lái),楊阿三,等.超臨界CO2制備微膠囊的研究進(jìn)展[J].化工進(jìn)展,2004,9(23):953-956

[28]黃光宇,趙玲.超臨界CO2抗溶劑法制備酶微膠囊過(guò)程研究[J].化學(xué)世界,2007(9):520-527

[29]徐云龍,徐盛,楊欣欣.溶菌酶脂質(zhì)體的制備工藝[J].華東理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006,32(8):939-942

[30]梁榮蓉,羅欣,高艷紅,等.脂質(zhì)體微膠囊化中性蛋白酶在Cheddar干酪快速成熟中的應(yīng)用[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32(10):142-146

[31]Anjani K,Kailasapathy K,Philips M.Microencapsulation of enzymes forpotential application in acceleration of cheese ripening[J]. International Dairy Journal,2007,17(1):79-86

[32]劉若男.內(nèi)源乳化法制備溶菌酶腸溶性微膠囊及所用油相回收的研究[D].無(wú)錫:江南大學(xué),2011

[33]Poncelet D,Lencki R,Beaulieu C,et al.Production of alginate beads by emulsification/internal gelation I methodology[J].Applied Microbiology and Biotechnology,1992,38(1):39-45

[34]劉若男,李俊華,楊嚴(yán)俊.內(nèi)源乳化制備溶菌酶微膠囊的研究[J].食品工業(yè)科技,2011(8):318-320

[35]王霞.微膠囊化葡萄糖氧化酶對(duì)面粉烘焙品質(zhì)的改良研究[J],食品與發(fā)酵工業(yè),2008,34(5):65-69

[36]劉博,張宏亮,薛偉明,等.載脂肪酶殼聚糖/海藻酸鈣微膠囊的制備[J].化工進(jìn)展,2010,29(8):1541-1546

[37]George P,Nikolaos B.Swelling studies and in vitro release of verapamil from calcium alginate and calcium alginate-chitosan beads [J].International Journal of Pharmaceutics,2006,323:34-42

[38]Qi W T,Ma J,Ma X J,et al.Behavior of microbial growth and metabolism in alginate-chitosan-alginate(ACA)microcapsules[J]. Enzyme and Microbial Technology,2006,38:697-704

[39]Yao G P,Qi D W,Deng C H,et al.Functionalized magnetic carbonaceous microspheres for trypsin immobilization and the application to fast proteolysis[J].Journal of Chromatography A,2008,1215 (1/2):82-91

[40]Akamatsu K,Ikeuchi Y,Nakao A,et al.Size-controlled and monodisperse enzyme-encapsulated chitosan microspheres developed by the SPG membrane emulsification technique[J].Journal of Colloid and Interface Science,2012,371(1):46-51

[41]Carillon J,Rouanet J M,Cristol J P,et al.Superoxide dismutase administration,A potential therapy against oxidative stress related disease:several route of supplementation and proposal of an original mechanism of action[J].Pharm Res,2013,30:2718-2728

[42]Khalid H,Hanif M,Hashmi M A,et al.Copper complexes of bioactive ligands with superoxide dismutase activity[J].Mini Rev Med Chem,2013,13(13):1944-1956

[43]趙有璽,冀頤之,張慧娟,等.超氧化物歧化酶微膠囊的制備及微囊結(jié)構(gòu)的表征[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(12):3483-3485,3490

[44]費(fèi)國(guó)琴.一種微生物溶菌酶的特性及其微膠囊化工藝研究[D].上海:上海海洋大學(xué),2013

[45]Abdekhodaie M J,Cheng J,Wu X Y.Effect of formulation factors on the bioactivity of glucose oxidase?encapsulated chitosan-alginate microspheres:In vitro investigation and mathematical model prediction[J].Chemical Engineering Science,2015,125:4-12

[46]王霞,張?zhí)炝?周惠明.微膠囊化葡萄糖氧化酶對(duì)面團(tuán)氧化作用研究[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2012,27(7):17-21,41

[47]程云.納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究[D].哈爾濱:哈爾濱工業(yè)大學(xué),2015

[48]陳景鑫.納豆激酶的制備及其穩(wěn)定性研究[D].大慶:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué),2010

The Application Progress of Enzyme Microencapsulation in Food Industry

SUN Yan-wei1，ZHANG Ze-sheng1，2，3，WANG Tian-xin1，*，LI Yu-meng1，QIN Cheng-guang1
（1.Institute of Food Engineering and Biotechnology，Tianjin University of Science and Technology，Tianjin 300457，China；2.Key Laboratory of Food Nutrition and Safety，Ministry of Education，Tianjin University of Science&Technology，Tianjin 300457，China；3.Tianjin Food Safety&Low Carbon Manufacturing Collaborative Innovation Center，Tianjin 300457，China）

Microencapsulation of enzyme is a technique that encapsulates enzyme to obtain solid particle product.In recent years，development of microencapsulation is rapid and it has a promising prospect in the immobilization of enzyme.In this review，the encapsulation technology was firstly overviewed，followed by the introduction of preparation methods and the latest research progress of enzyme microencapsulation applied in food industry.And its key issues and application prospect were elaborated as well.

enzyme；encapsulation；preparation method；application

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.08.046

2016-07-31

天津科技大學(xué)青年教師創(chuàng)新基金（NO.2015lG24）

孫艷偉（1992—），女（漢），碩士研究生，研究方向：天然產(chǎn)物活性成分。

*通信作者：王田心（1985—），男（漢），講師，博士，研究方向：天然產(chǎn)物活性成分。