尿結(jié)締組織生長(zhǎng)因子聯(lián)合血清胱抑制素C檢測(cè)在早期糖尿病腎病患者腎損害篩查中的意義

趙雯紅 田俊麗 楊一民 辛海利 孫姍姍 李彥竹 張國(guó)瑛

(石家莊市中醫(yī)院腎內(nèi)科，河北 石家莊 050051)

尿結(jié)締組織生長(zhǎng)因子聯(lián)合血清胱抑制素C檢測(cè)在早期糖尿病腎病患者腎損害篩查中的意義

趙雯紅 田俊麗1楊一民1辛海利 孫姍姍 李彥竹 張國(guó)瑛

(石家莊市中醫(yī)院腎內(nèi)科，河北 石家莊 050051)

目的 探討尿結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、血清胱抑素(cystatin)C水平聯(lián)合檢測(cè)在早期篩查糖尿病腎病(DN)患者腎損傷中的意義。方法 選擇1～3期DN患者，檢測(cè)各期患者尿CTGF、血清cystatin C、尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(SCr)、內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)水平變化。結(jié)果 與1期DN組比較：2期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C、SCr水平均明顯升高(P<0.05)，而UAER水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，3期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C、UAER、SCr水平均明顯升高(P<0.01)，兩組Ccr水平均明顯降低(P<0.01)；Pearson分析示尿CTGF、血清cystatin C與SCr、UAER顯著正相關(guān)，與Ccr顯著負(fù)相關(guān)，且ROC曲線分析表明二者聯(lián)合檢測(cè)診斷價(jià)值較高。結(jié)論 尿CTGF聯(lián)合血清cystatin C檢測(cè)對(duì)篩查1～3期DN患者腎損害意義較大。

尿結(jié)締組織生長(zhǎng)因子；血清胱抑素C；早期糖尿病腎病

糖尿病腎病(DN)是糖尿病最常見(jiàn)、最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，也是引起終末期腎病的主要原因〔1〕。因此，預(yù)防DN的發(fā)生，提高DN早期診斷水平為目前急需解決的重大問(wèn)題。研究證實(shí)，在DN患者中，尿結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)與蛋白尿和腎小球率過(guò)濾(GFR)均密切相關(guān)〔2,3〕，且其出現(xiàn)更早〔4〕；血清胱抑素(cystatin)C是一種非糖基化的半胱氨酸蛋白酶抑制因子，其蛋白分子量為13 kD，廣泛表達(dá)于各種組織細(xì)胞，并能被腎小球自由濾過(guò)。一項(xiàng)前瞻性隊(duì)列研究表明血清cystatin C比肌酐估測(cè)的GFR在預(yù)測(cè)終末期腎病方面更具優(yōu)勢(shì)〔5〕?？梢?jiàn)，尿CTGF與血清cystatin C的聯(lián)合檢測(cè)在評(píng)估DN患者的腎功能及預(yù)后方面更加客觀、全面。本研究評(píng)估尿CTGF和血清cystatin C聯(lián)合檢測(cè)在DN早期篩查中的意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 嚴(yán)格按照DN臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，選擇本院門(mén)診或住院的1～3期DN患者，各期60例，其中1期27例，女33例，年齡43～71〔平均(58.02±7.84)〕歲，病程2～5〔平均(3.48±1.16)〕年，2期男25例，女35例；年齡52～78〔平均(64.43±7.40)〕歲；病程5～10〔平均(7.28±1.85)〕年；3期男22例，女38例；年齡59～75〔平均(68.43±4.37)〕歲；病程5～10〔平均(6.97±1.77)〕年。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合2004年美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)及Mogenson分期標(biāo)準(zhǔn)屬于1～3期DN患者，且腎功能正常〔血肌酐(SCr)<133 μmol/L,GFR>90 ml/min〕；排除標(biāo)準(zhǔn)：排除合并高血壓性腎病等其他繼發(fā)性腎病及原發(fā)性腎小球疾病、急性感染、酮癥酸中毒、急性腎損傷、腫瘤、已應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)或血管緊張素受體阻滯劑(ARB)類(lèi)藥物、嚴(yán)重心腦血管疾病的患者。隨機(jī)選擇與之年齡相匹配的健康者20例為對(duì)照組，男10例，女10例；年齡50～72歲，平均(63.40±7.58)歲。

1.2 指標(biāo)檢測(cè)

1.2.1 尿CTGF的測(cè)定 收集各組患者連續(xù)24 h的尿液，混勻，取10 ml，以2 000 r/min離心10 min，取上清液2 ml于-80℃冰箱中保存，備用。采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法測(cè)定尿CTGF的濃度(美國(guó)Biopioneer公司)。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，取3次結(jié)果的平均值。由于標(biāo)本經(jīng)鹽酸和氫氧化鈉預(yù)處理，為了減少尿液稀釋或濃縮對(duì)結(jié)果的影響，尿CTGF測(cè)定結(jié)果以其與尿肌酐的比值(CTGF/Cr)表示。

1.2.2 血清cystatin C測(cè)定 抽取受試者空腹靜脈血5 ml，3 000 r/min離心15 min，取上清，采用全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)貝克曼公司)進(jìn)行血清cystatin C測(cè)定。

1.2.3 腎功能、尿白蛋白排泄率(UAER)測(cè)定 采取標(biāo)本同上，采用全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)貝克曼公司)檢測(cè)各組SCr水平，并按照cockcroft公式計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率(Ccr),放免法檢測(cè)各組24 h尿蛋白定量，并換算成UAER(μg/min)，取3次結(jié)果的平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行方差分析，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析，繪制ROC曲線。

2 結(jié) 果

2.1 各組患者尿CTGF/Cr、血清cystatin C、UAER、SCr、Ccr水平比較 與對(duì)照組比較：1期DN組患者各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；2期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C水平明顯升高(P<0.01)，Ccr水平明顯降低(P<0.01)，而UAER和SCr水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；3期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C、UAER水平均明顯升高(P<0.01)，Ccr水平明顯降低(P<0.01)，SCr水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與1期DN組比較：2期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C、SCr水平均明顯升高(P<0.05)，Ccr水平明顯降低(P<0.01)，而UAER水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；3期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C、UAER、SCr水平均明顯升高(P<0.01)，Ccr水平明顯降低(P<0.01)。與2期DN組比較：3期DN組患者尿CTGF、血清cystatin C、UAER、SCr水平均明顯升高(P<0.05)，Ccr水平明顯降低(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 DN患者尿CTGF/Cr、血清cystatin C與UAER、SCr及Ccr相關(guān)性分析 尿CTGF/Cr、血清cystatin C與UAER、SCr呈顯著正相關(guān)(r=0.977、r=0.531；r=0.296、r=0.362，均P<0.01)，與Ccr呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.533、r=-0.854，均P<0.01)。

2.3 尿CTGF/Cr、血清cystatin C篩查DN腎損害的ROC曲線分析 以尿CTGF/Cr、血清cystatin C為檢驗(yàn)變量,以Ccr是否異常為狀態(tài)變量,取狀態(tài)變量值為1,建立ROC曲線,尿CTGF/Cr篩查DN腎損害的ROC曲線下面積為0.848，血清cystatin C篩查DN腎損害的ROC曲線下面積為0.865。見(jiàn)圖1。

組別尿CTGF/Cr(ng/mg)血清cystatinC(mg/L)UAER(μg/min)SCr(μmol/L)Ccr(ml/min)對(duì)照組3.38±1.960.71±0.087.15±2.2375.94±11.50106.76±9.991期DN組5.55±0.870.73±0.098.29±0.9472.17±10.54109.25±11.762期DN組24.52±3.511)2)1.17±0.301)2)16.36±2.7476.83±8.472)91.86±8.501)3)3期DN組121.96±38.251)3)4)1.32±0.291)3)4)111.28±43.731)3)4)80.83±10.993)4)86.82±12.621)3)4)F/P值381.06/0.0084.12/0.00241.82/0.007.23/0.0051.57/0.00

與對(duì)照組比較：1)P<0.01；與1期DN組比較：2)P<0.05，3)P<0.01；與2期DN組比較：4)P<0.05

圖1 尿CTGF/Cr、血清cystatin C篩查DN腎損害的ROC曲線

3 討 論

目前臨床普遍以微量白蛋白尿作為DN診斷的早期線索，然而研究表明，尿微量白蛋白的變化對(duì)腎小球硬化的預(yù)后不敏感，且可能受其他疾病的影響而干擾診斷〔4〕，所以尋找與腎臟病理改變相關(guān)性更高的，且更早出現(xiàn)的新的診斷指標(biāo)是DN臨床研究廣泛關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。CTGF被認(rèn)為是TGF-β的下游效應(yīng)分子，但有報(bào)道CTGF也可以不依賴TGF-β獨(dú)立發(fā)揮作用〔6〕。CTGF可促進(jìn)成纖維細(xì)胞增生，誘導(dǎo)系膜細(xì)胞基質(zhì)(ECM)的合成和抑制ECM的降解，從而參與了DN腎臟的纖維化過(guò)程〔7〕。研究表明，微量蛋白尿的患者尿CTGF增加10倍，而大量蛋白尿患者則增加100倍〔8〕，故尿中的CTGF可作為腎臟纖維化的早期診斷指標(biāo)。研究證實(shí)，在DN患者中，尿CTGF與蛋白尿和GFR均密切相關(guān)〔9〕。單獨(dú)血肌酐的測(cè)定不足以說(shuō)明腎功能受損情況，所以一些更有價(jià)值的血清標(biāo)志物應(yīng)運(yùn)而生。與目前臨床上常用的估測(cè)GFR的血清肌酐、尿素氮相比，血清cystatin C的合成分泌比較穩(wěn)定，受年齡、體重、種族、蛋白攝入或炎癥的影響較小。根據(jù)血清cystatin C得出的GFR在預(yù)測(cè)DN的微量蛋白尿階段方面，優(yōu)于比根據(jù)血清肌酐得出的GFR，同時(shí)也似乎提示了腎功能的下降早于蛋白尿的出現(xiàn)〔5〕。

可見(jiàn)，尿CTGF與血清cystatin C的聯(lián)合檢測(cè)在篩查早期DN患者的腎損害方面更有價(jià)值。

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〔2015-12-28修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢(mèng)園)

2012年石家莊市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目(No.12146893)

趙雯紅(1980-)，女，博士，副主任醫(yī)師，主要從事腎臟病臨床與實(shí)驗(yàn)研究。

R587.205

A

1005-9202(2017)06-1361-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.06.024

1 石家莊四藥有限公司職工醫(yī)院