硒的檢測方法研究進展

羅敏，陳德經(jīng)，，*，代惠萍，江海，季曉輝

（1.陜西理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中723001；2.陜西理工大學(xué)陜西省資源生物重點實驗室，陜西漢中723001）

硒的檢測方法研究進展

羅敏1，陳德經(jīng)1，2，*，代惠萍2，江海2，季曉輝2

（1.陜西理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中723001；2.陜西理工大學(xué)陜西省資源生物重點實驗室，陜西漢中723001）

硒在自然界中以無機硒和有機硒兩種形式存在。主要介紹硒形態(tài)的前處理方法以及熒光法、石墨爐原子吸收光譜法、氫化物原子熒光、液相色譜法、毛細管電泳法、比色法及各光譜法聯(lián)用技術(shù)等不同檢測方法、原理進行歸納，同時在導(dǎo)電性、酶活性、酶聯(lián)免疫法方面有望成為有機硒的快速、準(zhǔn)確、操作簡便的檢測方法，為硒的檢測技術(shù)開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

無機硒；有機硒；檢測技術(shù)；研究進展

硒作為人體不可缺少的微量元素之一，其在自然界中存在形式為無機硒和有機硒，無機硒主要為亞硒酸鹽與硒酸鹽形式存在，以四價硒和六價硒為主要化學(xué)形態(tài)，具有劇毒[1]。有機硒的存在形式通常是硒代氨基酸、硒蛋白、硒多肽、硒多糖等形式[2]，使用比較安全，營養(yǎng)價值較高，可易在人體內(nèi)所吸收利用。因此準(zhǔn)確、高效的檢測有機硒與無機硒有著重要的意義。近年來，硒的檢測技術(shù)隨著含硒樣品種類的不同也越來越多，對于無機硒和有機硒的檢測通常有石墨爐原子吸收法、氫化物發(fā)生原子熒光光譜法、火焰原子吸收光度法、分光光度法、熒光法、液相色譜法、氣相色譜法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法、吸附極譜法、催化極譜法、陽極溶出伏安法、陰極溶出伏安法、氫化物發(fā)生原子吸收法以及聯(lián)用技術(shù)等[3-4]。雖然檢測方法很多，但每種測定方法都有其各自的優(yōu)缺點?，F(xiàn)將不同的檢測方法的原理、方法及優(yōu)缺點分別闡述。

1 硒形態(tài)的前處理方法

1.1 浸提法

提取劑一般有水浸提、酸浸提（HNO3-H2O2-HC1、Tris-HCl、）、堿浸提（KOH）、鹽溶液浸提（2%NaCl）、醇浸提（70%CH3CH2OH）等，適用于無機硒和未結(jié)合到蛋白質(zhì)中的有機硒小分子化合物，如硒酸鹽、亞硒酸鹽、甲基硒代半胱氨酸、γ-谷氨酸硒甲基硒代半胱氨酸等硒代氨基酸等水溶性的硒形態(tài)[5-8]。使用酸性試劑雖然可以提高提取效率，但是腐蝕性會對試樣有影響，其中Tris-HCl有致癌作用；堿性試劑也可降解硒化合物[9]。

1.2 酶解法

提取劑一般有淀粉酶、蛋白酶K、蛋白酶XIV、纖維素酶、蛋白酶E、脂肪酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和鏈霉蛋白酶等，適用于以硒代氨基酸或者硒肽的形式結(jié)合在蛋白質(zhì)中的硒形態(tài)[10-13]。在溫和的環(huán)境下酶解法提取硒不僅具有較高效率，而且不破壞硒成分，在未來將成為提取硒形態(tài)的有效方法[9]。

2 無機硒的檢測方法

2.1 熒光法

熒光法的原理是將樣品在高氯酸與硝酸兩者混合進行加熱消化，使不同價態(tài)的硒轉(zhuǎn)化成為無機硒，在酸性環(huán)境下，使試樣中的Se6+還原成Se4+，再與2，3-二氨基萘（2，3-diaminonaphthalene，DAN）顯色劑發(fā)生反應(yīng)的同時生成4，5-苯并苤硒腦，最后的萃取劑為環(huán)己烷。反應(yīng)激發(fā)波長是376nm，發(fā)射波長為520nm[14-15]。黃高凌等[16]用熒光法測定硒含量，檢出限為0.22 μg/L、線性范圍為 1 μg/L～30 μg/L、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 RSD＜ 2.9%，該法靈敏度高，方法簡單迅速，但受萃取劑、溫度、pH值的影響，操作繁瑣費時，所用的試劑毒性大，檢測的是總硒含量，不能有效的對有機硒和無機硒分辨。

梁愛惠等[17]對其傳統(tǒng)的方法進行優(yōu)化，在硫酸條件下，將四價硒與還原劑反應(yīng)，將其還原為硒化氫，再用KI3吸收硒化氫，使羅丹明6G較少的結(jié)合I3-而使羅丹明6G熒光強度變大，熒光測定波長為562 nm。激發(fā)波長為480 nm。該方法的檢出限為0.01 μg/mL，回收率在91.8%～107.1%之間。

2.2 石墨爐原子吸收光譜法

其原理是將樣品前處理后直接注射到石墨爐中，形成的基態(tài)原子躍遷到較高能態(tài)所需能量的頻率時，原子就產(chǎn)生共振吸收，再依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液測定硒含量，但在樣品的消解過程中溫度到400℃時會使硒蒸發(fā)，而損失一部分硒，測定不準(zhǔn)確。因此使用基體改進技術(shù)來阻止硒的損失，它是往石墨爐或試樣溶液中加入某種化學(xué)試劑，來增加待測樣品溶液基體的揮發(fā)性，或提高待測易揮發(fā)元素的穩(wěn)定性，提高灰化溫度而消除或減小基體干擾，該方法靈敏度高，檢出限低，但檢出的是總硒含量，對有機硒的定量檢測不準(zhǔn)確[18-19]。

梅燦輝[20]提出使用膠體鈀作為基體改進劑，樣品不需要經(jīng)過消解，只需要酸化與稀釋后可直接上機測定，利用膠體鈀-石墨爐原子吸收測定枸杞酒中硒含量，其檢出限為26.74 pg，RSD值＜10%，加標(biāo)回收率為102.60%，線性回歸方程為Y=0.000 024x2+0.004 1x+0.017，相關(guān)系數(shù) R2=0.998 8。劉娟麗等[21]提出使用Pd（NO3）2作為基體改進劑，利用石墨爐原子吸收光譜在196 nm測定飼料中的硒，檢測限為0.33 μg/kg，回收率為95.0%～105.3%，硒含量在0～100 μg/kg成線性關(guān)系也取得較好的結(jié)果。

2.3 氫化物-原子熒光光譜法（hydride-generationatomic fluorescence spectrometry，HG-AFS）

在酸環(huán)境中將四價硒與還原劑硼氫化鉀或硼氫化鈉在氫化物系統(tǒng)中被還原成硒化氫，由氫氣和硒化氫與載氣氬氣帶入到原子化器，形成火焰，從而使硒元素被原子化，火焰中硒原子在空心硒陰極燈的照射下被激發(fā)，使基態(tài)硒被激發(fā)至高能態(tài)，再被活化回到基態(tài)時發(fā)射出熒光強度信號。在一定條件下產(chǎn)生的熒光強度與硒含量成正比[22-23]。

王世成等[24]使用三羥甲基氨基甲烷-鹽酸（Tris-HCl）緩沖溶液提取法分離鴨蛋中的有機硒和無機硒，采用氫化物發(fā)生原子熒光光譜法檢測，再利用差減法檢測鴨蛋中無機硒和有機硒的含量，其無機硒的檢出限為 0.003 mg/kg，測定線性范圍為 2.0 μg/L～50 μg/L，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為3.21%，加標(biāo)回收率為82.8%～91.0%。

HG-AFS法光譜干擾少，譜線簡單，靈敏度和準(zhǔn)確度高，檢出限低，適用于多種痕量元素的測定。采用差減法分析有機硒含量，這個是現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.93-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中硒的測定》[25]，但有機硒測定準(zhǔn)確度差，對有機硒和無機硒的分離不準(zhǔn)確。

2.4 電化學(xué)方法

電化學(xué)法主要包括催化極譜法、電位滴定法、陽極溶出伏安法、陰極溶出伏安法、離子選擇電極法，其每種方法硒的檢出限分別為（0.6、8、0.004、0.2、20μg/g）[26]。其硒的測定最常用的是催化極譜法與溶出伏安法，崔鵬[27]用催化極譜法測定硒的含量，檢出限2.0 μg/L，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為3.0%～1.6%，加標(biāo)回收回收率104%～92%。該方法其靈敏度已達到或大于熒光法原子熒光法測定硒，準(zhǔn)確度高、儀器簡單、分析速度快和應(yīng)用范圍廣但操作繁瑣，適用范圍窄。

2.5 比色法

在酸性環(huán)境下Se4+與3，3-二氨基聯(lián)苯胺試劑顯色反應(yīng)生成黃色化合物，使用甲苯在pH約為7時萃取，樣品需經(jīng)過加入混酸加熱消解使樣品中硒的化合價消解為合適的價態(tài)即四價硒，再經(jīng)鹽酸反應(yīng)使其六價硒最終還原為四價硒，再進行比色定量測定總硒含量。Na2-EDTA可消除樣品中其它重金屬離子，如：銅、鐵等其干擾，此法據(jù)報道最低檢出限為2.5 μg/L，測定上限為50 μg/L，靈敏度較低，檢測限不能滿足微量分析要求[28]。

3 有機硒的檢測

3.1 高效液相色譜法

硒代甲硫氨酸、硒代蛋氨酸及其他氨基酸與4-氯-3，5-二硝基三氟甲苯柱前衍生，可產(chǎn)生的衍生物具有紫外吸收，再運用高效液相色譜儀分離，在240 nm處，進行紫外檢測。此方法具有較高的精密度、低的檢出限、檢出成本低、操作簡便，但目標(biāo)物的出峰時間太晚，耽誤檢測效率，氨基酸干擾較大[29-30]。李紅衛(wèi)等[31]通過該法檢測富硒米曲霉中有機硒形態(tài)，其硒代胱氨酸檢出限（RSN=3）為0.680 mg/L，定量限（RSN=10）為2.244 mg/L，線性范圍為 5.0 mg/L～100 mg/L，加標(biāo)回收率為94.8%～105.8%。

3.2 氣相色譜法

易揮發(fā)的硒化合物如二甲基硒、二甲基二硒適合使用氣相色譜檢測，難揮發(fā)的硒酸鹽及硒代氨基酸需要被衍生成揮發(fā)性物質(zhì)，再經(jīng)萃取和色譜分離進行檢測。張修景等[32]在用氣相色譜法測定羅漢參中硒的含量時，將樣品加入混酸微波消解，再經(jīng)甲苯萃取和毛細管色譜柱分離，再經(jīng)檢測器進行硒的定性及定量分析，其最低檢出限為0.003 mg/L，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=5）小于 1.1% ，在 0.005 μg/mL～0.025 μg/mL 硒含量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好；加標(biāo)回收率在98.0%～100.7%范圍內(nèi)。對于揮發(fā)性有機硒化合物的分析比較適用，具有較高的準(zhǔn)確度、靈敏度高、精密度好、高選擇性，但與試劑的選擇密切相關(guān)。

3.3 高壓液相色譜-氫化物發(fā)生-原子熒光光譜（high performance liquid chromatography-hydride generationatomic flurescence spectrometry，HPLC-HG-AFS）

目前礦物質(zhì)元素化學(xué)形態(tài)檢測的主要方法是聯(lián)用技術(shù)，高效液相色譜與靈敏度較高的氫化物發(fā)生-原子熒光光譜聯(lián)用應(yīng)用于硒的各種形態(tài)分析，已成為一個很好的檢測儀器。尚德榮等[33]利用HPLC-HG-AFS測定水產(chǎn)品中硒的賦存形態(tài)時對樣品使用恒溫超聲提取，待測物使用PRP-X100陰離子交換柱，以pH值為6.0的磷酸鹽緩沖液為流動相，利用高效液相色譜對試樣中的硒代胱氨酸（SeCys）、硒代蛋氨酸（SeMet）、四價硒（SeIV）、六價硒（SeVI）分離后，使用氫化物原子熒光光譜進行檢測，其檢出限分別為1.2、0.8、1.4、2.1 ng/mL，RSD小于4.0%，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.995，測試樣品的平均回收率都在86.6%以上。該法靈敏度高，檢出限低，光譜干擾小，但樣品預(yù)處理繁瑣，分析成本較高。但目前只能分析3種硒形態(tài)，亞硒酸鹽、硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸[34-35]，因此，該技術(shù)可在優(yōu)化選擇適宜的浸提試劑，通過嘗試震蕩、超聲、微波萃取等輔助浸提方法提取樣品，得到不同基質(zhì)的前處理方法上，建立快速、靈敏度高、準(zhǔn)確性好、重現(xiàn)性好、分離度好的分離檢測方法有待進一步研究。

3.4 高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜法（high performance liquid chromatography inductively coupled plasma mass spectrometry，HPLC-ICP-MS）聯(lián)用技術(shù)

HPLC的分離技術(shù)能達到高效分離的效果，特別適用于熱穩(wěn)定性較差、大的分子量、較強的極性物質(zhì)的分離，和具有極低的檢出限、干擾少、快速、精密度高等優(yōu)點的ICP-MS聯(lián)用，可準(zhǔn)確分析微量元素同位素[36-37]。此技術(shù)不用試樣的前處理，可直接測定各種氧化態(tài)硒[38]。吳雅穎等[39]將一定量的筍樣品粉末置于用3 mL超純水溶解20 mg鏈酶蛋白酶E后，37℃超聲提取30 min，離心分離后，選用裝有碰撞池的ICP-MS儀器色譜柱為Hamilton PRP X-100作為檢測器，流動相為pH4.72檸檬酸溶液，流速為1.0 mL/min。采用超聲波輔助酶提法提取雷竹筍硒形態(tài)，利用HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)分離測定有機硒，檢出限在0.4 g/L～4.6 g/L，6種硒形態(tài)的加標(biāo)回收率在80%～117%。

該方法有較強的分離能力、高效、精準(zhǔn)、分析速度快等優(yōu)點，主要用于形態(tài)分析，適合于食品中硒酸鹽（Se VI）、亞硒酸鹽（Se IV）、硒代蛋氨酸（Se Met）、硒代胱氨酸（Se Cys2）、甲基硒代半胱氨酸（Me Se Cys）和硒代乙硫氨酸（Se Et）的定性定量分析，但儀器價格太高，在實際應(yīng)用中被限制[40]。

3.5 毛細管電泳—電感耦合等離子體質(zhì)譜

毛細管電泳可分離不同樣品的形態(tài)，是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動力的新型液相分離技術(shù)，毛細管電泳法中電泳的重現(xiàn)性不高，影響定性定量結(jié)果，因此使用聯(lián)用技術(shù)組成具有高靈敏度與選擇性的分離方法。鄭進平使用毛細管電泳—電感耦合等離子體質(zhì)譜（capillary electrophoresis-inductively coupled plasma mass spectrometry，CE-ICP-MS）聯(lián)用分析方法，方法檢測限達到0.2ngSe/mL～0.9ngSe/mL，RSD（n=6）為 3%～5%，加標(biāo)回收率為80%～102%[41]。

4 其它方法

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展與進步，在提取，樣品的處理及分析方法也隨之變化，而出現(xiàn)的一些新方法在準(zhǔn)確度，靈敏性，選擇性上也各有特色。如：超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定牛奶中游離硒代蛋氨酸，其Se Met線性范圍為0.5 ng/mL～100 ng/mL，方法的定量下限為0.5 ng/mL。定量下限準(zhǔn)確度87.14%，RSD為3.95%，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS）法具有重復(fù)性好、特異性好、分析時間短、靈敏度高、操作簡單的優(yōu)點。但所需儀器設(shè)備儀器昂貴，普及度不高，使用受到限制[42]。濁點萃取-共振瑞利散射法，其原理是萃取硒與吡咯啶二硫代氨基甲酸銨（pyrrolidine dithio charboxylic acid ammer，PDCA）生成穩(wěn)定的螯合物表面活性劑相，并利用表面活性劑相在470 nm有最大吸收峰來檢測硒含量，王梅利用該法測定富硒螺旋藻片中的硒檢出限為0.006 3 μg/mL，RSD為2.65%，加標(biāo)回收率為105.8%，該法檢出限低，干擾小，但只能檢測四價硒[43]。

5 展望

采用差減法分析有機硒含量，這個是現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)，但對有機硒測定準(zhǔn)確度差，對有機硒和無機硒的分離不準(zhǔn)確。同時樣品處理過程中需要大量的強酸消解（體積比1∶1鹽酸；體積比4∶1混合酸等），過程繁瑣。所使用的測定儀器要求門檻較高，而在未來有機硒的快速檢測中依據(jù)硒在光照下的導(dǎo)電性差異[44-45]，探討光照與硒的含量和導(dǎo)電性的關(guān)系，優(yōu)化條件，定性定量分析有機硒。其次依據(jù)有機硒可使GSH-Px酶活性提高[46-48]，探討酶促反應(yīng)條件下的生化檢測技術(shù)定性定量鑒別無機硒和有機硒。再次采用生物免疫學(xué)方法檢測有機硒的含量，如制備硒蛋氨酸單克隆抗體，并采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）[49-51]直接區(qū)分有機硒與無機硒，有望成為分析有機硒和無機硒的新型技術(shù)，并能夠滿足再現(xiàn)性好、精確度高、檢出限較高、方法操作簡便，檢驗檢測成本低，能夠定量準(zhǔn)確檢測出硒氨基酸、硒蛋白、硒核酸以及硒多糖等多種化合物結(jié)合形式的有機硒含量，且實用性廣泛的快速檢測方法。

[1]郭璐.作物對外源硒酸鹽和亞硒酸鹽動態(tài)吸收的差異及其機制研究[D].西安:西北農(nóng)林科技大學(xué),2014

[2] 茆廣華.灰樹花子實體富硒及其硒多糖的研究[D].鎮(zhèn)江:江蘇大學(xué),2014

[3] 國家環(huán)境保護局,國家技術(shù)監(jiān)督局.GB/T 15505-1995水質(zhì)硒的測定石墨爐原子吸收分光光度法[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,1995:631-633

[4] 蔣旭玲.大米中硒形態(tài)分析方法的建立[D].南京:南京財經(jīng)大學(xué),2013

[5] 鐵梅,方禹之,孫鐵彪,等.HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)在富硒金針菇硒的形態(tài)分析中的應(yīng)用[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報,2007,28(4):635-639

[6] 吳瑤慶,孟昭榮,李莉,等.藍莓中蛋白硒形態(tài)的富集分離及測定方法[J].營養(yǎng)學(xué)報,2011,33(5):463-467

[7] 張濤,高愈希,李柏,等.高效液相色譜-等離子體質(zhì)譜聯(lián)用方法研究富硒大米中硒的形態(tài)[J].分析化學(xué),2008,36(2):206-210

[8] 仲娜,王小如,楊黃浩,等.高效液相色譜與電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)用于脅迫富硒海帶硒形態(tài)研究[J].高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報,2008,29(1):77-80

[9] 李慧新,崔鶴,匡少平,等.儀器聯(lián)用技術(shù)在As、Hg、Se形態(tài)分析中的應(yīng)用研究進展[J].食品科學(xué),2015,36(15):266-271

[10]方勇,羅佩竹,胡秋輝,等.大蒜的生物富硒作用及其硒的形態(tài)分析[J].食品科學(xué),2012,33(17):1-5

[11]ZHANG Qihua,YANG Guipeng.Selenium speciation in bay scallops by high performance liquid chromatography separation and inductively coupled plasma mass spectrometry detection after complete enzymatic extraction[J].Journal of Chromatography A,2014,1325:83-91

[12]MAZEJ D,FALNOGA I,VEBER M.Determination of selenium species in plant leaves by HPLC-UV-HG-AFS[J].Talanta,2006,68(3):558-568

[13]王欣,幸苑娜,陳澤勇,等.高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜法檢測富硒食品中6種硒形態(tài)[J].分析化學(xué),2013,41(11):1669-1674

[14]楊鶴.五種乳酸菌富硒能力及條件的研究[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2015

[15]秦冰.茶樹硒代氨基酸的賦存形態(tài)及外源硒肥對其形態(tài)和含量影響的研究[D].合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué),2013

[16]黃高凌,王秋銘,邱恩.熒光法測定食用菌中痕量硒的研究[J].集美大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2006,11(4):310-314

[17]梁愛惠,李院,黃珊珊,等.氫化物-KI_3-羅丹明6G體系熒光法測定痕量硒[J].光譜學(xué)與光譜分析,2015,35(5):1306-1308

[18]劉秀華,鄧義,張豫川.石墨爐原子吸收光譜法測定硒的研究進展[J].理化檢驗(化學(xué)分冊),2014,50(2):264-268

[19]LI Shun-xing,ZHENG Feng-ying,CAI Shu-jie,et al.Determination of mercury and selenium in herbal medicines and hair by using a nanometer TiO2-coated quartz tube atomizer and hydride generation atomic absorption spectrometry.[J].Journal of Hazardous Materials,2011,189(1/2):609-613

[20]梅燦輝.膠體鈀-石墨爐原子吸收直接測定枸杞酒中硒含量的方法研究[J].現(xiàn)代食品科技,2017,33(2):1-8

[21]劉娟麗,馬啟華,阮靜.石墨爐原子吸收法測定飼料中的硒[J].飼料廣角,2016(16):41-43

[22]劉恒,馬盼,王浩東,等.氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法測定富硒雜糧中的有機硒和無機硒[J].食品科學(xué),2014,35(10):170-173

[23]陳修紅,汪厚銀,歐克勤,等.電感耦合等離子體-質(zhì)譜法與氫化物原子熒光法測定小麥中總硒含量的方法比較[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2016,7(9):3716-3719

[24]王世成,王顏紅,劉艷輝,等.氫化物發(fā)生-原子熒光法測定鴨蛋中無機硒和有機硒[J].食品科學(xué),2013,34(4):183-185

[25]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會,國家食品藥品監(jiān)督管理總局.GB 5009.93-2017食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中硒的測定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2017:1-8

[26]于勤勤.恩施富硒區(qū)硒元素遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律及開發(fā)研究[D].合肥:合肥工業(yè)大學(xué),2009

[27]崔鵬.催化極譜法測定血硒方法及影響因素分析[J].青海醫(yī)藥雜志,2008,38(8):62-63

[28]陳永波,薛仁梅,馬作江,等.硒的檢測技術(shù)研究進展[J].氨基酸和生物資源,2010,32(2):41-44

[29]徐暄,王玉鳳,孫其文.食品中硒檢測技術(shù)研究進展[J].理化檢驗(化學(xué)分冊),2012,48(3):364-367

[30]唐瑩瑩,袁建,蔣旭玲,等.柱前衍生-反相高效液相色譜法研究稻谷中有機硒形態(tài)[J].糧食與油脂,2013,26(12):26-28

[31]李紅衛(wèi),王開萍,吳娛,等.柱前衍生-反相高效液相色譜法檢測富硒米曲霉中有機硒形態(tài)[J].食品科學(xué),2015,36(22):137-141

[32]張修景.微波消解-氣相色譜法測定羅漢參中硒的含量[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2014,40(1):198-201

[33]尚德榮,秦德元,趙艷芳,等.高壓液相色譜-氫化物發(fā)生-原子熒光光譜(HPLC-HG-AFS)聯(lián)用技術(shù)檢測水產(chǎn)品中硒的賦存形態(tài)[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2013,4(6):1847-1852

[34]邱建華.用于高效液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用的硫脲預(yù)還原氫化物發(fā)生接口技術(shù)及其在硒形態(tài)分析中的應(yīng)用[D].廈門:廈門大學(xué),2006

[35]王金榮,付佐龍,邢志,等.液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用(HPLCHG-AFS)技術(shù)對飼料及富硒酵母中硒形態(tài)的分析[J].飼料工業(yè),2013,34(1):47-50

[36]Da Silva EG,Verola Mataveli LR,Zezzi Arruda MA.Speciation analysis of selenium in plankton,Brazil nut and human urine samples by HPLC-ICP-MS[J].Talanta,2013,110:53-57

[37]仲娜.電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)及高效液相色譜與電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-ICP/MS)用于富硒生物樣品中硒的化學(xué)形態(tài)組成及分布規(guī)律研究[D].青島:中國海洋大學(xué),2008

[38]陳大偉,石金娥,王悅宏,等.硒的痕量分析方法研究與應(yīng)用進展[J].冶金分析,2008,28(4):31-38

[39]吳雅穎,桂仁意,湯鋆,等.HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù)測定竹筍中六種硒形態(tài)[J].營養(yǎng)學(xué)報,2014,36(5):494-498

[40]李晶,孔維恒,高峰,等.HPLC-ICP-MS法分析測定富硒保健品中的硒形態(tài)[J].現(xiàn)代儀器,2012,18(3):36-39

[41]鄭進平.基于毛細管電泳—電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析檢測不同形態(tài)硒、汞和砷化合物[D].福州:福州大學(xué),2011

[42]何夢潔,張雙慶,梁敏慧,等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定牛奶中游離硒代蛋氨酸[J].衛(wèi)生研究,2016,45(1):65-67,97

[43]王梅,龍軍標(biāo),楊冰儀,等.濁點萃取-共振瑞利散射法測定富硒螺旋藻片中的硒[J].化學(xué)試劑,2013,35(8):717-720

[44]鄭文杰,曾鑫華,楊芳.硒芳香雜環(huán)化合物的光譜和電化學(xué)性質(zhì)[J].分析科學(xué)學(xué)報,2003,19(1):36-38

[45]左永.硒基納米材料的制備及其催化和熱電性質(zhì)研究[D].合肥:安徽大學(xué),2016

[46]姚昭,李紅艷,張云龍,等.有機硒、無機硒、VE單獨使用及有機硒與VE聯(lián)用對大鼠體內(nèi)抗氧化能力的影響[J].食品科學(xué),2013,34(15):272-276

[47]PAN Cuiling,HUANG Kehe,ZHAO Yuxin,et al.Effect of selenium source and level in hen’s diet on tissue selenium deposition and egg selenium concentrations[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2007,55(3):1027-1032

[48]潘翠玲,黃克和,趙玉鑫.不同硒源對蛋雞血硒含量及抗氧化能力的影響[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,31(2):91-96

[49]LOOMANS E E,van WITTENBURG J.Neamine as an immunogen for the development of a generic ELISA detecting gentamicin,kanamycin,and neomycin in milk[J].J Agr Food Chem,2003,51(3):587-593

[50]石超,呂長鑫,馮敘橋.酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測分析中的研究進展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2014,5(10):3269-3275

[51]劉功良,王菊芳,李志勇.重金屬離子的免疫檢測研究進展[J].生物工程學(xué)報,2006,22(6):877-881

Research Progress of Detection Methods of Selenium

LUO Min1，CHEN De-jing1，2，*，DAI HUI-ping2，JIANG Hai2，JI XIAO-hui2
（1.College of Biological Science and Engineering，Shaanxi University of Technology，Hanzhong 723001，Shaanxi，China；2.Bio-resource Key Laboratory of Shaanxi Province，Shaanxi University of Technology，Hanzhong 723001，Shaanxi，China）

Selenium exists in nature in two forms：inorganic selenium and organic selenium.Mainly introduces the pretreatment method of selenium form and the different detection methods，such as fluorescence method,graphite furnace atomic absorption spectrometry，hydride atomic fluorescence,liquid chromatography，capillary electrophoresis，colorimetric method and spectroscopy.It is expected to be a rapid,accurate and easy method for the determination of organic selenium in the aspects of conductivity，enzyme activity and enzyme-linked immunoassay，and provided a theoretical basis for the development of selenium detection technology.

inorganic selenium；organic selenium；detection methods；research progress

2016-12-24

陜西省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項目（2015NY012）

羅敏（1990—），女（漢），在讀碩士研究生，研究方向：食品生物化學(xué)。

*通信作者：陳德經(jīng)（1961—），男（漢），教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：食品生物技術(shù)。

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.18.041