miR-1246在疾病上的研究進(jìn)展

胡煜 王玲 畢武 譚林 邢丹 左福元

（西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物科學(xué)系，重慶，402460）

miR-1246在疾病上的研究進(jìn)展

胡煜 王玲 畢武 譚林 邢丹 左福元

（西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物科學(xué)系，重慶，402460）

miRNAs是一類具有轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能的小分子非編碼RNA，參與了組織代謝和細(xì)胞增殖、分化、凋亡及基因表達(dá)，在許多生理和病理過(guò)程中扮演著重要的角色。目前，研發(fā)有效的miRNA激活劑或抑制劑來(lái)挽救和診斷病理狀態(tài)，已成為醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的新方向和切入點(diǎn)。最新發(fā)現(xiàn)的miR-1246受P53調(diào)控，并與產(chǎn)生疾病的分子機(jī)制息息相關(guān)。綜述了miR-1246序列結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及分子作用機(jī)制，對(duì)近年來(lái)miR-1246在癌癥、埃博拉病毒傳染病、唐氏綜合癥等疾病上的應(yīng)用潛能進(jìn)行了總結(jié)，并對(duì)該領(lǐng)域今后的發(fā)展前景作了展望，旨為醫(yī)學(xué)研究提供理論參考。

miR-1246；癌癥；唐氏綜合癥；埃博拉病毒感染；疾病

MiRNAs是Lee等［1］在秀麗線蟲(chóng)中首次發(fā)現(xiàn)的一類長(zhǎng)度約22個(gè)堿基、具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的非編碼小RNA（non-coding RNA，nc RNA），其在各種生理和病理過(guò)程中扮演重要角色，如基因表達(dá)、細(xì)胞增殖、分化、凋亡、組織代謝和腫瘤生成等［2-4］。近年來(lái)已有大量的文章涉及了這方面的研究。迄今為止，人類、果蠅、植物、動(dòng)物等物種中數(shù)以百計(jì)的miRNA已被報(bào)道。miR-1246是被P53所調(diào)控的一個(gè)新miRNA，定位于人2q31.1。目前miR-1246的生物學(xué)功能已逐漸被各界學(xué)者所關(guān)注。關(guān)于miR-1246的研究主要集中在以下幾個(gè)方面：（1）調(diào)控組織癌細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、衰老及轉(zhuǎn)移入侵，是多種癌癥潛在的診斷與治療靶標(biāo)，如肝癌、宮頸癌。（2）參與多種生理疾病的形成與發(fā)展過(guò)程，如唐氏綜合癥、埃博拉病毒傳染病、心血管疾病等。（3）是多種細(xì)胞分泌因子的重要調(diào)控因子，如B細(xì)胞、T細(xì)胞。本文就miR-1246的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、作用機(jī)制及在疾病上的應(yīng)用進(jìn)行綜述，旨為臨床研究提供參考。

1 miR-1246的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

miRNA前體具有較保守的二級(jí)結(jié)構(gòu)。與一級(jí)結(jié)構(gòu)相比，在生物進(jìn)化過(guò)程中，二級(jí)結(jié)構(gòu)往往同生物功能聯(lián)系緊密。通過(guò)RNA fold（http://rna.tbi.univie. ac.at/cgi-bin/RNAfold.cgi）預(yù)測(cè)出miR-1246的前體二級(jí)結(jié)構(gòu)（圖1）發(fā)現(xiàn)，其具體典型的莖環(huán)結(jié)構(gòu)，包含大量G/U堿基對(duì)，且5'端起始?jí)A基多數(shù)為A或U。圖1-A中黃色高亮表示miR-1246的成熟體序列（AAUGGAUUUUUGGAGCAGG），圖1-B中以A-U、G-C、G-U堿基互補(bǔ)配對(duì)形成的連續(xù)雙螺旋區(qū)域?yàn)榍o區(qū)，不構(gòu)成互補(bǔ)配對(duì)的單鏈結(jié)構(gòu)為環(huán)區(qū)，莖環(huán)結(jié)構(gòu)復(fù)雜多變，折回長(zhǎng)度變異明顯，每個(gè)“莖環(huán)結(jié)構(gòu)”由大約100個(gè)堿基折疊而成。“莖環(huán)結(jié)構(gòu)”中環(huán)的大小約10個(gè)堿基，最大不超過(guò)30多個(gè)堿基，“環(huán)”兩側(cè)的堿基呈高配對(duì)性，不同顏色表示堿基配對(duì)的概率，顏色越紅，表明對(duì)應(yīng)堿基處于配對(duì)的概率越大。其具有自由能越低越穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，其二級(jí)結(jié)構(gòu)自由能（MFE）較低，最大自由能為-19.77 kcal/mol。

2 miR-1246的作用機(jī)制

2.1 miR-1246的作用通路

許多研究表明，miR-1246受控于P53通路。已有研究報(bào)道P53家族成員有抗癌活性，主要在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控目標(biāo)基因的表達(dá)［5］。P53在反饋調(diào)節(jié)通路中扮演著雙重角色，一方面P53直接約束其靶miRNA，控制其轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而抑制靶基因翻譯。如當(dāng)P53正常的細(xì)胞受到 DNA損傷（藥物、輻射等應(yīng)激）后，miR-34a、miR-22、miR-1246等表達(dá)增高，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、周期阻滯及細(xì)胞老化等［6］；另一方面，P53還能調(diào)控miRNA的生成沉默復(fù)合物（RNA-inducing silencing complex，RISC）的功能，影響成熟miRNA的生成。成熟的miRNA 雙鏈（miRNA-miRNA*）與Ago蛋白結(jié)合后在解旋酶作用下雙鏈很快被解開(kāi)，miRNA*脫離并被降解，最后剩下成熟的miRNA與RISC形成RNA介導(dǎo)的沉默復(fù)合體，該復(fù)合體結(jié)合到與其互補(bǔ)的mRNA位點(diǎn)通過(guò)兩種依賴于序列互補(bǔ)性的機(jī)制負(fù)調(diào)控靶基因［7］（圖2）。

圖1 miR-1246的二級(jí)結(jié)構(gòu)圖

2.2 miR-1246的作用方式

成熟的miR-1246通常與其互補(bǔ)的mRNA通過(guò)兩種依賴于序列互補(bǔ)性的機(jī)制負(fù)調(diào)控靶基因。其作用方式是將miR-1246 5'端種子序列（第2-7nt）與靶基因mRNA 3' UTR區(qū)進(jìn)行堿基配對(duì)，配對(duì)的緊密程度決定miRNA對(duì)靶基因蛋白的抑制程度。配對(duì)形式包括：（1）6mer site：即miRNA第2-7核苷酸與靶基因完全配對(duì)，此方式識(shí)別靶基因的敏感性更高，特異性低，抑制不完全，蛋白累積多。（2）7mer-1A site：即第2-7nt與靶基因呈互補(bǔ)配對(duì)，且靶基因?qū)?yīng)miRNA第一位核苷酸處為A，此方式特異性高，抑制效果一般，較為通用。（3）7mer-m8 site：即miRNA第2-8nt與靶基因完全配對(duì)，此方式特異性第二高，保守性強(qiáng)，抑制效果一般；（4）8mer site：即miRNA第2-8nt與靶基因完全配對(duì)，且外加靶基因?qū)?yīng)miRNA第一位核苷酸處為A，此方式特異性最高，完全抑制，蛋白累積最少［8］（圖3）。

3 miR-1246與疾病研究

3.1 miR-1246與宮頸癌

研究表明，miR-1246的異常表達(dá)或?qū)ο掠伟谢虻漠惓Ｕ{(diào)控與宮頸癌的發(fā)生、細(xì)胞增殖和入侵緊密相關(guān)。Chen等［9］對(duì)宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的癌組織和血清進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，miR-1246表達(dá)異常升高，通過(guò)合成miR-1246 mimics（或inhibitor）轉(zhuǎn)染宮頸癌SiHa 細(xì)胞進(jìn)行MTT、遷移、侵襲、劃痕實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染miR-1246 mimics的SiHa細(xì)胞生長(zhǎng)速度明顯增加了，侵襲和遷移能力也增加了。然而轉(zhuǎn)染miR-1246 inhibitor的SiHa細(xì)胞生長(zhǎng)速度變慢了，侵襲和遷移能力也減弱了。此外，血清miR-1246表達(dá)還可以預(yù)測(cè)病人與早期宮頸鱗狀細(xì)胞癌淋巴節(jié)點(diǎn)轉(zhuǎn)移情況。這一系列的細(xì)胞功能試驗(yàn)說(shuō)明miR-1246確實(shí)能促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖和侵襲、遷移，具有致癌基因作用，能夠加速癌變進(jìn)程。值得注意的是，該研究還發(fā)現(xiàn)，THBS2是一個(gè)被miR-1246調(diào)控的靶基因，而THBS2在多種癌癥（乳腺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌）中存在特異性表達(dá)，可協(xié)同其他基因調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrixc，ECM）的水解，最終達(dá)到標(biāo)記腫瘤的侵襲力和輔助癌癥治療的作用［10］，但其具體機(jī)制尚為空白。Chen認(rèn)為，可能是miR-1246與THBS2 3'-UTR區(qū)結(jié)合后，ECM受體信號(hào)途徑被抑制。而miR-1246可能通過(guò)調(diào)控HPV癌蛋白（E6、E7），在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中起主要作用。當(dāng)HPV感染復(fù)層鱗狀細(xì)胞后，在基底層表達(dá)E6、E7產(chǎn)物，并不斷進(jìn)行復(fù)制，E6、E7產(chǎn)物通過(guò)P53和Rb蛋白途徑，改變細(xì)胞周期調(diào)控點(diǎn)并誘導(dǎo)宿主細(xì)胞增殖［11］。雖然此推論具有一定參考價(jià)值，但具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步的生物性試驗(yàn)驗(yàn)證。

圖2 p53調(diào)控miRNAs的信號(hào)通路

圖3 miRNA-mRNA的配對(duì)形式及不同配對(duì)形式對(duì)靶基因蛋白的影響［8］

3.2 miR-1246與肝癌

據(jù)20世紀(jì)90年代統(tǒng)計(jì)，我國(guó)肝癌的年死亡率為20.37/10萬(wàn)，在惡性腫瘤死亡中排列第二［12］。肝癌早期無(wú)癥狀或癥狀不明顯，但擴(kuò)展非常迅速，治療較困難。因此肝癌的預(yù)防控制及早期診斷是目前醫(yī)學(xué)界亟待解決的科學(xué)難題。Sun等［13］利用qRTPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn) miR-1246在人肝癌細(xì)胞HCC的表達(dá)水平非常高，而后用生物信息學(xué)和雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)miR-1246通過(guò)特異性結(jié)合靶向細(xì)胞黏附分子1（intercellular adhesion molecule 1，CADM 1）的3'-UTR，以調(diào)控其表達(dá)，促進(jìn)癌細(xì)胞的遷移和入侵。此外，研究報(bào)道，P53可以誘導(dǎo)miR-1246表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而抑制其下游靶基核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear factor I/B，NFIB）表達(dá)，從而影響肝癌細(xì)胞的增殖［14］。 NFIB為致癌因子，在細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程中主要影響細(xì)胞的活力及增殖效率［15］。但NFIB基因沉默可抑制細(xì)胞增殖，激活細(xì)胞凋亡通路。且在肝癌患者接受肝移植后，miR-1246與血清AST和ALT水平、肝細(xì)胞TNFα mRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)（AST和ALTS是揭示肝損傷的兩個(gè)重要指標(biāo)，炎性細(xì)胞因子TNFα對(duì)肝缺血再灌注損傷（hepaticischemiareperfusion injury，IRI）診療至關(guān)重要［16］）。其主要原因可能是TNFα超表達(dá)M1巨噬細(xì)胞，而M1巨噬細(xì)胞導(dǎo)致炎癥的主要細(xì)胞類型，當(dāng)肝臟遭受IRI或短暫性氧化應(yīng)激時(shí)，miR-1246在早期肝移植后的循環(huán)系統(tǒng)中不會(huì)出現(xiàn)上調(diào)，只有當(dāng)M1巨噬細(xì)胞被激后，miR-1246才會(huì)顯著上調(diào)，以上研究提示早期肝的循環(huán)miR-1246是肝損傷一個(gè)重要指標(biāo)及腫瘤復(fù)發(fā)和肝移植術(shù)后肝細(xì)胞的生存的預(yù)后生物標(biāo)記。

3.3 miR-1246與肺癌

肺癌根據(jù)其臨床特征分為多種亞型，各種亞型對(duì)應(yīng)的治療方法也不同。因此正確及時(shí)診斷出肺癌的類型對(duì)后期的臨床治療至關(guān)重要。有研究報(bào)道，腫瘤干細(xì)胞（concept of cancer stem cells，CSCs）標(biāo)志物CD133、SOX2、OCT4、ALDH1（腦膠質(zhì)瘤特征標(biāo)記物CD133、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的標(biāo)志物SOX2、OCT4、ALDH1）等在肺癌細(xì)胞中高度表達(dá)，可作為肺癌診斷的標(biāo)志物。而其主要信號(hào)通路Wnt/β-catenin、Notch和Hedgehog會(huì)被miRNA所調(diào)控［17］。 Huang等［18］對(duì)非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）病人的腫瘤樣本和非癌變鄰近組織檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，miR-1246在腫瘤樣本中顯著上調(diào)，且會(huì)促使肺癌侵襲和組織遷移。值得注意的是，當(dāng)用miR-1246抑制劑和CPEB4小干擾RNA共同轉(zhuǎn)染人肺腺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞后，整個(gè)細(xì)胞的表達(dá)譜變得更接近正常細(xì)胞。而敲除CPEB4可促進(jìn)NSCLC細(xì)胞的遷移和侵襲。這些結(jié)果表明，miR-1246 是NSCLC的促癌基因，而其所調(diào)控的下游靶基因CPEB4又是很重要的抑癌基因，CPEB4下調(diào)歸因于miR-1246的上調(diào)，miR-1246對(duì)CPEB4具有抑制作用。此外，Kim［19］等對(duì)人肺癌細(xì)胞HCC1588和人肺腺癌細(xì)胞株A549 miRNA芯片和通路分析發(fā)現(xiàn)9個(gè)miRNA（miR-1290、miR-1246、miR-574-5p、miR-4257、miR-1224-5p、miR-483-5p、miR-3195、miR-4274、miR-4324）與癌細(xì)胞遷移相關(guān)。結(jié)果提示可以通過(guò)抑制miR-1246和miR-1290抑制具備干細(xì)胞的功能的EMT和NSCLC的入侵和遷移。

3.4 miR-1246與唐氏綜合癥

唐氏綜合癥（又稱21三體綜合征），是患者體細(xì)胞內(nèi)多出一條完整染色體，有時(shí)是部分21號(hào)染色體（Hsa21）所致。唐氏綜合征的發(fā)病率介于1/650-1 000之間，是最常見(jiàn)的常染色體異常疾病，目前已被廣泛研究［20］。研究發(fā)現(xiàn)：雙特異性絡(luò)氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶（dual-specificity yrosine-（Y）-phosphorylation regulated kinase 1A，DYRK1A）超表達(dá)于唐氏綜合癥病人中，并且與神經(jīng)和大腦發(fā)育高度相關(guān)［21］。DYRK1A異常表達(dá)，導(dǎo)致發(fā)病的具體作用機(jī)制如下：首先DYRK1A通過(guò)循環(huán)的磷酸化AMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（分子）參與大鼠神經(jīng)元分化的河馬campal祖細(xì)胞分化，同時(shí)DYRK1A通過(guò)分子內(nèi)機(jī)制，進(jìn)行自設(shè)磷酸化，使5-蘇氨酸和7-蘇氨酸磷酸化［22］；其次通過(guò)鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)因子（Regulator of calcineurin 1，RCAN 1）協(xié)同作用，可調(diào)控細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear factor activated T Cell，NFAT），進(jìn)而影響機(jī)體免疫防疫系統(tǒng)，激活T細(xì)胞，引起機(jī)體IL-2、IL-3、GM-CSF、IFN?和TNFα等水平變化，最終導(dǎo)致細(xì)胞核封鎖，從細(xì)胞質(zhì)中易位［23-25］。最后DYRK1A使caspase-9磷酸化，抑制其能力，導(dǎo)致唐氏綜合癥患者神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生生物學(xué)改變。然而，研究發(fā)現(xiàn)DYRK1A受控于miR-1246，通過(guò)miR-1246的活化P53激活NFAT通路致使DYRK1A表達(dá)降低，最大限度地發(fā)揮抗腫瘤活性。其作用機(jī)理是：DNA損傷激活P53蛋白，P53蛋白與Drosha酶復(fù)合物結(jié)合后，促進(jìn)初級(jí)miRNA轉(zhuǎn)變成成熟的miRNA前體，P53及其類似物P63和P73能靶向作用于miR-1246，后者能通過(guò)抑制DYRK1A基因的表達(dá)，進(jìn)而活化NFAT，從而引起細(xì)胞調(diào)亡，抑制唐氏綜合征相關(guān)蛋白激酶的表達(dá)水平，從而發(fā)揮抗腫瘤功能［26，27］。以上結(jié)果提示，p53家族是最重要的腫瘤蛋白家族，而miR-1246是一個(gè)重要的抗癌基因，可以作為唐氏綜合癥診斷的臨床標(biāo)記。

3.5 miR-1246與埃博拉病毒傳染病

埃博拉病毒（Ebola virus，EBOV）是長(zhǎng)約19 kb的單股負(fù)鏈RNA病毒，是引起人類及靈長(zhǎng)類動(dòng)物產(chǎn)生出血熱等癥狀的烈性傳染性病毒，主要通過(guò)汗液、唾液或血液等途徑感染，而目前尚無(wú)有效的防治策略［28］。Sheng等［29］用EBOV的GP蛋白感染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，3個(gè)miRNA表達(dá)升高（miR-1246、miR-320a和miR-196b-5p）， 并 觀 察 到 這些miRNA的一些靶標(biāo)顯著下調(diào)，如膀胱蛋白酶8（Caspase 8）、組織因子抑制劑（TFPI）、肌萎縮蛋白1（DAG1）和FADD樣細(xì)胞凋亡調(diào)控因子（CFLAR）等。然而，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)降低這些miRNA的表達(dá)能在體外降低埃博拉病毒GP蛋白引起的細(xì)胞毒性。GP是一種存在于病毒多功能蛋白，能引起組織炎癥、細(xì)胞吸附、細(xì)胞毒性和宿主細(xì)胞免疫等反應(yīng)［30-32］。TFPI、DAG1和CFLAR曾被報(bào)道與細(xì)胞黏附有關(guān)，TFPI抑制血液凝固，CFLAR抑制細(xì)胞凋亡，DAG1可能在上皮細(xì)胞黏附過(guò)程發(fā)揮作用［30，33-35］。總之，EBOV GP能誘導(dǎo)miR-1246、miR-320a和miR-196b-5p的表達(dá)升高，從而降低與細(xì)胞黏附相關(guān)的TFPI，DAG1和CFLAR等基因的表達(dá)，并破壞血液的完整性，增加血管通透性使紅細(xì)胞外泄，最終導(dǎo)致人類高致命性出血熱綜合癥。

3.6 miR-1246與系統(tǒng)性紅斑狼瘡

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種累積多系統(tǒng)、多器官并有多種自身抗體出現(xiàn)的自身免疫性疾病。SLE的特點(diǎn)之一是通過(guò)不斷激活B細(xì)胞使自身抗體的生產(chǎn)不受控制，進(jìn)而造成組織損傷［36］。近年來(lái)的研究表明，異常的表觀遺傳作用在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病機(jī)制中扮演著重要角色［37-40］。而一些miRNAs（miR-155、miR-146a、miR-326等）可以調(diào)節(jié)T細(xì)胞和B細(xì)胞功能影響自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制，如SLE、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化癥［41］。Luo等［42］研究發(fā)現(xiàn)miR-1246能特異性的與早期的B細(xì)胞因子1（Early B cell factor 1，EBF1）mRNA 3’-UTR結(jié)合，抑制SLE。在SLE病人中，被激活的的異常B細(xì)胞會(huì)激活A(yù)KT通路，致使P53表達(dá)下調(diào)，miR-1246表達(dá)量減少，而EBF1表達(dá)上調(diào)。同時(shí)細(xì)胞中的免疫基因CD40、CD80、CD86表達(dá)也上調(diào)，接著又會(huì)更加刺激B細(xì)胞的增多。然而，當(dāng)向正常B細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-1246 類似物時(shí)，得到結(jié)果剛好相反。結(jié)果提示，過(guò)表達(dá)的miR-1246 可以抑制B細(xì)胞的過(guò)度激活、自身免疫系統(tǒng)過(guò)度運(yùn)作，從而抑制系統(tǒng)性紅斑狼瘡。

3.7 miR-1246與心力衰竭

心力衰竭（diastolic heart failure，DHF）是指在心室收縮功能正常的情況下，由于心室充盈異常和充盈壓的升高而導(dǎo)致的肺循環(huán)或體循環(huán)的臨床綜合征。Nair等［43］通過(guò)miRNA芯片分析比較了正常人與舒張性心衰患者miRNA表達(dá)情況，確定了不同類型的舒張性心衰患者血漿中差異表達(dá)的循環(huán)miRNA（miR-454、miR-500、miR-1246和miR-142-3p），其中在舒張期功能不全患者中miR-454、miR-500和miR-1246分別表達(dá)下調(diào)和上調(diào)，在收縮期和舒張功能不全患者和收縮壓+舒張壓功能不全患者中miR-142-3P表達(dá)下調(diào)。該研究首次證實(shí)了miR-1246可作為舒張期功能障礙舒張功能不全的標(biāo)志物，尤其是老年男性通過(guò)識(shí)別miR-1246，作為一個(gè)舒張功能不全和心肌損傷的更為敏感的標(biāo)志。此外，通過(guò)TargetScan5.2分析發(fā)現(xiàn)其大約有114個(gè)保守基因與心臟疾病相關(guān)。這些基因是：與急性冠心病及鈉鉀離子通道相關(guān)的基因（SCN3A和KCNAB1）、蛋白激酶C（PRKCE）、cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白5（CREB5）、腎上腺素能β-1受體（ADRβ1）等。最近研究表明，miRNA被分泌在細(xì)胞微泡和胞外體內(nèi)［44］，神經(jīng)酰胺通路控制細(xì)胞間胞外體miRNA的轉(zhuǎn)運(yùn)。這說(shuō)明血清中檢測(cè)到的miRNA不全部直接來(lái)自組織和細(xì)胞系，而多來(lái)源于細(xì)胞溶解產(chǎn)物、組織破裂、血管破裂或遠(yuǎn)離靶器官的其他器官的產(chǎn)物。結(jié)果提示，通過(guò)心臟受損，發(fā)現(xiàn)舒張壓功能受損影響血液中miRNA差異表達(dá)，當(dāng)心臟血液注后，miRNA通過(guò)細(xì)胞間通道，隨血液到達(dá)病灶器官，發(fā)揮一定功能。這可為心臟病藥物開(kāi)發(fā)或者疾病診斷的提供依據(jù)

3.8 miR-1246與其他疾病

Baraniskin等［45］認(rèn)為它是一個(gè)胰腺導(dǎo)管腺癌和結(jié)腸癌的血清腫瘤標(biāo)記物，通過(guò)對(duì)植入原代人胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）裸小鼠的血清分析發(fā)現(xiàn) miR-1246可與RNU2-1片段（RNU2-1f）雜交存在于病人血清中，提示miR-1246可由目標(biāo)細(xì)胞釋放到血液，乳液和導(dǎo)管的液體，但miRNA的釋放有選擇性，選擇釋放的miRNA可能與惡性腫瘤相關(guān)。Pigati等［46］報(bào)道它與乳腺癌有關(guān)，miR-1246可被乳腺癌細(xì)胞選擇性地釋放出細(xì)胞外，且這種選擇性與細(xì)胞的惡性程度密切相關(guān)，可能與ECM有關(guān)。Xu等［47］研究發(fā)現(xiàn)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤中感染HEV71后，可特異性誘導(dǎo)miR-1246的表達(dá)，并通過(guò)調(diào)節(jié)其靶基因DLG3的表達(dá)參與了神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)病調(diào)控。Zheng等［48］對(duì)熱應(yīng)激奶牛miRNA高通量測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)共有52個(gè)差異表達(dá)極顯著的miRNA，主要包括miRNA-1246、miR-181a、miR-19a等，而miR-1246主要與機(jī)體免疫功能有關(guān)，尤其與Toll樣受體（Toll like receptor，TLR）密切相關(guān)。Sarachana等［49］研究表明非編碼小RNA存在于血友病人血液中，且檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，病人中存在抗第八因子（factor VIII，F(xiàn)8）中性抑制劑，鑒定出miR-1246能與F8非編碼區(qū)靶位點(diǎn)相結(jié)合，并在淋巴細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)。Wang等［50］研究發(fā)現(xiàn)miR-1246在結(jié)腸癌組織中顯著表達(dá)，且可下調(diào)HCT-116和LOVO CRC細(xì)胞CycG2基因的表達(dá)，而過(guò)表達(dá)miR-1246會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。以上研究均只停留在miR-1246 的表達(dá)水平檢測(cè)。但關(guān)于miR-1246如何作用于疾病過(guò)程，仍有許多謎團(tuán)未解開(kāi)。要徹底了解 miR-1246在疾病中的具體作用機(jī)制，還需要進(jìn)一步結(jié)合動(dòng)物模型，進(jìn)行更深入的分子機(jī)理研究。

4 展望

綜上，miR-1246與癌癥、腫瘤、埃博拉病毒傳染病、免疫疾病等都存在一定關(guān)系，而在這些疾病中，miR-1246主要作為一個(gè)抑制劑起作用，但在有些癌癥和細(xì)胞中，miR-1246也顯示出促進(jìn)作用，可能原因是其發(fā)揮的作用與它所處的組織細(xì)胞環(huán)境密切相關(guān)。但同時(shí)也必須指出，以上 miR-1246與疾病的相關(guān)研究結(jié)果，大部分都是以病理細(xì)胞及病理組織為研究對(duì)象獲得的。而以 miR-1246 的過(guò)表達(dá)或敲除動(dòng)物模型為材料的活體內(nèi)研究比較少，因此不能較好地展現(xiàn)出 miR-1246 在疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中所發(fā)揮的作用和調(diào)控的相關(guān)分子信號(hào)通路。若要更深入的挖掘miR-1246的臨床意義，還需構(gòu)建miR-1246的過(guò)表達(dá)或敲除動(dòng)物模型。

總之，miRNA介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄后水平的表達(dá)調(diào)控是目前疾病診斷標(biāo)記研究領(lǐng)域的新方向和切入點(diǎn)，醫(yī)用需求十分迫切。尤其在對(duì)癌癥疾病的診療上，研發(fā)有效的miRNA激活劑或抑制劑就顯得尤為必要。利用miRNA敲降或過(guò)表達(dá)技術(shù)，可以“糾正”病理狀態(tài)下異常表達(dá)的miRNA；厘清miRNA 介導(dǎo)的基因調(diào)控機(jī)制研究，加強(qiáng)序列同源性檢測(cè)，可以降低脫靶效應(yīng)；開(kāi)發(fā)組織特異性或誘導(dǎo)型的miRNA抑制劑控制miRNA的過(guò)度活躍或通過(guò)外源導(dǎo)入方式補(bǔ)償病態(tài)下表達(dá)下調(diào)的miRNA，可達(dá)到治療疾病的目的。如表1列舉了幾種miRNA治療方法及特點(diǎn)。

表1 幾種常見(jiàn)的miRNA治療劑的特點(diǎn)總結(jié)［51］

目前，已有藥物制造商生產(chǎn)出應(yīng)用于臨床的miRNA治療試劑，盡管仍舊存在著較多問(wèn)題，但隨著miRNA研究的深入與成熟，相關(guān)藥物開(kāi)發(fā)和臨床治療也將提上日程。相信在不久的將來(lái)，隨著miRNA分子診斷技術(shù)不斷地評(píng)估完善及推廣應(yīng)用，醫(yī)療界會(huì)逐步建立起以分子診斷、儀器化療、藥品輔療等多學(xué)科交叉診療相結(jié)合的科學(xué)醫(yī)療模式，miRNA在醫(yī)療應(yīng)用領(lǐng)域定會(huì)取得突破性進(jìn)展。

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（責(zé)任編輯 狄艷紅）

Research Progress of miR-1246 in Diseases

HU Yu WANG Ling BI Wu TAN Lin XING Dan ZUO Fu-yuan
（Department of Animal Science，Rongchang Campus of Southwest University，Chongqing 402460）

miRNAs are a class of small non-coding RNAs，involve in tissues metabolism，cells proliferation，differentiation，apoptosis and target genes expression，thus play an critical role in physiological and pathological processes. Nowadays，inventing effective miRNAs activators or inhibitors to treat and diagnose disease has become a new direction or entry point in the field of medical research. The newly discovered miR-1246 is regulated by P53，and is closely related to molecular mechanism of diseases. In this article，we summarize the miR-1246’s sequence structural features，molecular functional mechanism，review application potentials of miR-1246 in treating cancer，Ebola virus infection，and Down’s syndrome，and finally discuss its prospects，aiming at providing a theoretical reference for medical research.

miR-1246；cancer；Down's syndrome；Ebola virus infection；disease

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.03.005

2016-06-15

重慶市科技支撐示范工程項(xiàng)目/豐都肉牛產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新與關(guān)鍵技術(shù)攻關(guān)（jcsf121-2012-01-1），中央高?；緲I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金（XDJK2016E086），西南大學(xué)榮昌校區(qū)青年基金（20700426）

胡煜，女，碩士，研究方向：動(dòng)物分子遺傳；E-mail：huyu_186@163.com

左福元，男，教授，研究方向：反芻動(dòng)物遺傳育種及飼料營(yíng)養(yǎng)；E-mail：zfuyuan@163.com