2013—2016年中國部分地區(qū)豬偽狂犬病野毒株感染血清學(xué)調(diào)查

趙 青，焦連國，王冬梅，閆國暉，王香玲，姬瑩瑩，王貴華，趙亞榮

（1.北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司動物醫(yī)學(xué)研究中心，北京 100195；2.北京市畜禽生物制品工程技術(shù)研究中心，北京 100195）

2013—2016年中國部分地區(qū)豬偽狂犬病野毒株感染血清學(xué)調(diào)查

趙 青1，2，焦連國1，2，王冬梅1，2，閆國暉1，2，王香玲1，2，姬瑩瑩1，2，王貴華1，2，趙亞榮1，2

（1.北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司動物醫(yī)學(xué)研究中心，北京 100195；2.北京市畜禽生物制品工程技術(shù)研究中心，北京 100195）

為了解2013-2016年中國部分地區(qū)豬偽狂犬?。≒R）野毒感染及其分布情況，采用gE-ELISA方法對采自8個省市742個豬場16 675份血清樣品進行了豬偽狂犬病野毒感染的血清學(xué)調(diào)查。結(jié)果表明：742個豬場中有549個PR野毒陽性場，豬場陽性率為73.99%；16 675份血清中有6 298份為陽性血清，血清陽性率為37.77%。在所檢測的8個省市中以北京、天津、河北、河南的場陽性率和血清陽性率較高。說明我國部分地區(qū)普通存在PRV野毒感染，并呈散發(fā)性流行，提示我國規(guī)?；i場的PR防治工作仍需加強。

豬偽狂犬?。籫E 基因；gE-ELISA；血清學(xué)調(diào)查

豬偽狂犬?。╬seudorabies）是由偽狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的豬和其他動物共患的一種急性傳染病，以發(fā)熱、腦脊髓炎等為主要特征[1]。1813年本病在美國首次發(fā)生，其臨床癥狀與狂犬病很相似，所以稱為偽狂犬病。1902年由匈牙利學(xué)者Aladar Aujeszky首次報道本病，因此該病又被稱為Aujeszky’s disease（AD）[2]。豬是該病的主要宿主和傳染源，該病的臨床表現(xiàn)主要以妊娠母豬和哺乳仔豬最為嚴重：PRV導(dǎo)致妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎以及木乃伊胎；仔豬常表現(xiàn)高熱、食欲廢絕、呼吸困難以及神經(jīng)癥狀等[3]。自2011年在我國又暴發(fā)后，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成極大的經(jīng)濟損失。

gE基因是PRV重要的毒力基因之一[4]，是至今發(fā)現(xiàn)的所有的野毒株都表達的一種糖蛋白，介導(dǎo)著病毒從細胞到細胞之間的擴散，對病毒侵染神經(jīng)系統(tǒng)也具有重要作用。gE基因也是世界動物衛(wèi)生組織所規(guī)定基因缺失疫苗的缺失基因[5]。因此gE基因缺失可作為標志基因，區(qū)別感染動物和接種動物，為剔除陽性的野毒感染動物，根除本病提供良好的方法，而且gE-ELISA具有高度的特異性和靈敏性，適合大范圍的血清流行病學(xué)調(diào)查[6]。為了解中國部分地區(qū)豬偽狂犬病的野毒感染情況，現(xiàn)將2013-2016年規(guī)模化豬場的PRV野毒抗體監(jiān)測報告如下。

1 材料與方法

1.1 待檢血清

血清樣品16 675份采自2013-2016年北京、天津、河北、河南、山東、山西、江蘇、黑龍江8個省市742個規(guī)模化豬場。

1.2 檢測試劑儀器

PRV gE-ELISA抗體檢測試劑盒，購自西班牙HIPRA公司；檢測儀器為酶標儀（Multiskan MK3)，購自美國Thermo公司。

1.3 檢測方法

采用阻斷ELISA方法來檢測豬偽狂犬野毒抗體。

1.4 結(jié)果判定

結(jié)果判定依據(jù)試劑盒說明書，設(shè)2孔陰性對照和2孔陽性對照，其中設(shè)P=陽性對照OD450，N=陰性對照OD450，阻斷率=（陰性對照OD450-樣品OD450）/陰性對照OD450，當(dāng)N-P＞0.6，(N-P)/N＞60%，試驗成立，通過阻斷率來判斷結(jié)果。阻斷率＞45%為陽性；阻斷率＜40%為陰性；40%≤阻斷率≤45%為可疑。

2 結(jié)果

2.1 2013-2016年不同年份部分地區(qū)豬場PRV野毒株抗體檢測

如表1和圖1所示，中國部分地區(qū)在2013-2016年檢測的742個豬場中，有549個為PRV陽性豬場，豬場的總陽性率為73.99%；2013-2016年共檢測16 675份血清，其中6 298份為陽性血清，總的血清陽性率為37.77%。2013年檢測172個規(guī)模化豬場，陽性豬場為126個，豬場陽性率為73.26%；2013年檢測2 877份血清樣品，其中1 434份為陽性血清，血清樣本陽性率為49.84%；2014年檢測158個規(guī)?；i場，陽性豬場為114個，豬場陽性率為72.15%；2014年檢測3 091份血清樣品，1 261份為陽性血清，血清樣本陽性率為40.80%。2015年檢測205個規(guī)模化豬場，陽性豬場為154個，豬場陽性率為75.12%；2015年檢測5 185份血清樣品，1 694份為陽性血清，血清樣本陽性率為32.67%。2016年檢測207個規(guī)?；i場，陽性豬場為155個，豬場陽性率為74.88%；2016年檢測5 522份血清樣品，1 909份為陽性血清，血清樣本陽性率為34.57%。結(jié)果表明，2013-2016年期間，豬場的PRV野毒感染率均在70%以上，血清樣品陽性率在30%～50%，說明我國規(guī)?；i場普遍存在PRV野毒株感染，豬場的PR防控及凈化工作尤其重要。

2.2 2013-2016年部分地區(qū)豬場PRV野毒株抗體檢測結(jié)果

2013-2016年對國內(nèi)8個省市進行了PRV野毒抗體檢測，如表2和圖2所示，北京、天津、河北、河南的PRV豬場陽性率均高于平均水平（73.99%），其他省份的PRV豬場陽性率為37.01%～69.01%。北京、天津、河北、河南的PRV血清樣本陽性率高于平均水平（37.77%），其他省份的PRV血清樣本陽性率為8.57%～41.30%。結(jié)果表明，在檢測的8個省市中，均存在PRV野毒感染，但是感染的程度有所差異，其中北京、天津、河北、河南的豬場陽性率與血清樣本陽性率均高于平均水平，說明這4個省市的豬場PRV野毒感染率較高，PRV呈散發(fā)性流行。

3 討論

目前，豬偽狂犬病在我國大部分省份均有發(fā)生，國內(nèi)大部分豬場感染PRV野毒，是母豬繁殖障礙、斷奶前仔豬死亡率高的主要原因之一。尤其是近幾年，伴隨著我國養(yǎng)豬業(yè)規(guī)模化的發(fā)展，豬偽狂犬病在不少地區(qū)時有暴發(fā)與流行，嚴重阻礙了養(yǎng)豬業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。本調(diào)查研究結(jié)果顯示：對2013-2016年期間8個省市，742個豬場，16 675份血清樣本進行PRV野毒抗體檢測，豬場陽性率為73.99%，血清樣本陽性率為37.77%，說明我國普遍存在PRV野毒感染。葉晶等[7]對2010-2014年5個省份送檢的豬血清進行檢測，血清樣本陽性率為20.3%；鄒敏[8]等對2012-2013年18個省市，393個豬場進行PRV野毒抗體檢測，豬場陽性率為22.02%，血清樣品陽性率為16.13%；周緒斌[9]等對2007年11個省市的規(guī)?；i場進行了PRV野毒監(jiān)測，豬場陽性率為63.4%，血清樣本陽性率為14.8%。表明近幾年我國PR的發(fā)生地區(qū)迅速擴大，控制及凈化PR對各大規(guī)模化豬場來說變得尤為重要。

國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）提出豬場疫病凈化目標，但是我國還沒有大規(guī)模全面實施PR根除計劃，各大養(yǎng)殖場由于豬只的無序流通、豬群免疫密度與強度低、生物安全不到位、PRV毒力的增強等原因，造成我國豬場PR的再次流行[10]。所以國家主導(dǎo)，政府主管部門監(jiān)督，豬場具體實施的PR根除計劃，已經(jīng)迫在眉睫。

歐美一些發(fā)達國家通過利用gE基因缺失疫苗免疫，并定期實施檢測與淘汰，已經(jīng)將PR成功的凈化[11]。我們建議豬場使用優(yōu)質(zhì)的gE基因缺失疫苗強化免疫并定期對種豬群采血監(jiān)測并淘汰陽性豬，注重后備豬的健康選擇，逐漸建立陰性豬群，再加以配合相應(yīng)的生物安全措施，使我國豬偽狂犬病的流行態(tài)勢得到根本好轉(zhuǎn)[12]。

表1 2013-2016年豬場PRV野毒株抗體檢測

圖1 2013-2016年豬場PRV野毒株抗體檢測

表2 2013-2016年部分地區(qū)豬場PRV野毒株抗體檢測

圖2 2013-2016年部分地區(qū)豬場PRV野毒株抗體檢測

[1] 楊慶芳，寧官保. 豬偽狂犬病的研究進展 [J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息， 2010(7)：15-18.

[2] 殷震，劉景華.動物病毒學(xué)[M].2 版.北京：科學(xué)出版社.1997.

[3] 彭金美，安同慶，趙鴻遠，等.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2013，35(1)： 1-4.

[4] TIRABASSI R S， ENQUIST L W.Role of envelope protein gE endocytosis in the Pseudorabies virus life cycle [J]. J.Virol，1988，72(6)：4571-4579.

[5] 陽愛國，郭萬柱，徐志文，等. 偽狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究[J].西南民族大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2008，34(5) ： 943 -947.

[6] BABIC N， KLUPP B， BRACK A， et al. Deletion of glycoprotein gE reduces the propagation of pseudorabies virus in the nervous system of mice after intranasal inoculation [J]. Virology， 1996，219(1)： 279-284.

[7] 葉晶，朱秀高，候博，等.2010-2014年中國5省份豬偽狂犬病野毒抗體檢測分析 [J].養(yǎng)豬，2014（5）：113-114.

[8] 鄒敏，楊旭兵，鄭輝，等.2012-2013年我國部分地區(qū)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查[J].中國動物檢疫，2015，32（4）：1-5. [9] 周緒斌，秦云，丹尼，等.2007年中國規(guī)?；i場偽狂犬病野毒血清流行病學(xué)系統(tǒng)監(jiān)測與分析[J].豬業(yè)科學(xué)，2008，25（10）：84-90.

[10] 陳煥春，金梅林，何啟蓋，等.偽狂犬病根除計劃[J].養(yǎng)殖與飼料，2004（10）：11-13.

[11] 李樹清，陳志飛.簡介美國根除豬偽狂犬病項目及實施進展[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2002(1)：26.

[12] 周緒斌，雷健良，周克鋼，等. 2008年中國11省市規(guī)?；i場偽狂犬病野毒血清流行病學(xué)系統(tǒng)監(jiān)測與分析[J].養(yǎng)豬，2009（4）57-62.

2017-02-24）