肝臟CYP450酶系與中藥相互作用的研究進(jìn)展

李思聰，李金良，李旭廷

（四川省畜牧科學(xué)研究院，動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610066）

肝臟CYP450酶系與中藥相互作用的研究進(jìn)展

李思聰，李金良，李旭廷*

（四川省畜牧科學(xué)研究院，動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610066）

本文就Cocktail探針?biāo)幬锓?、中藥有效成分、中藥及其提取物、中藥配伍與CYP450酶的相互作用等進(jìn)行了綜述，以期對(duì)將來(lái)的相關(guān)研究提供借鑒。

中藥；細(xì)胞色素P450；代謝；探針?biāo)幬?/p>

細(xì)胞色素P450（CYP450）是藥物代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶，是存在于生物體內(nèi)的一類(lèi)以血紅素為輔基、并含有硫巰基的B族細(xì)胞色素超家族蛋白酶，因還原型細(xì)胞色素P450與一氧化碳復(fù)合物在450nm處有吸收峰，因而命名為細(xì)胞色素P450。CYP450主要存在于肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，可代謝大約25萬(wàn)種外源性物質(zhì)[1]。CYP450主要包括CYP1、CYP2、CYP3三個(gè)家族，涉及100余種亞型，其中最主要的亞型是CYP3A4（代謝藥物占全部藥物的50%），CYP2C9（代謝藥物約占10%）和CYP1A2（代謝藥物約占4%），是藥物代謝和毒理學(xué)研究的重要指標(biāo)[2]。通過(guò)CYP450誘導(dǎo)劑或抑制劑增強(qiáng)或抑制CYP450的mRNA表達(dá)，將顯著改變藥物在體內(nèi)的代謝過(guò)程，從而導(dǎo)致藥效減弱、失效或過(guò)量中毒等嚴(yán)重不良反應(yīng)。鑒于CYP450在藥物代謝過(guò)程中的重要性，國(guó)內(nèi)外均把藥物對(duì)CYP450的影響作為藥物聯(lián)用、食藥合用、草藥合用的重要依據(jù)。美國(guó)FDA明確要求在新藥研究時(shí)增加藥物對(duì) CYP450影響的研究，國(guó)內(nèi)也把藥物對(duì)CYP450酶的誘導(dǎo)和抑制研究作為熱點(diǎn)方向，2005年，我國(guó)頒布的《化學(xué)藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中也已積極倡導(dǎo)對(duì)CYP450活性進(jìn)行研究[3-4]。

1 Cocktail探針?biāo)幬锓ㄅcCYP450的關(guān)系

Cocktail探針?biāo)幬锓ㄊ茄芯克幬飳?duì)CYP450酶活性影響及藥物相互作用的主要手段，該法通過(guò)測(cè)定特異性探針?biāo)幬锏难帩舛却笮?，間接反映CYP450各亞型的活性情況[5]。隨著以CYP450及其同工酶在藥物代謝、理學(xué)、腫瘤生化、臨床合理用藥和新藥研發(fā)等領(lǐng)域的研究，Cocktail探針?biāo)幬锓ㄒ殉蔀檠芯克幬飳?duì)體內(nèi)代謝酶影響的強(qiáng)大技術(shù)手段。Cocktail探針?biāo)幬锓旖?、?zhǔn)確、靈敏度高。張香凝等[6]建立了通過(guò)RP-HPLC對(duì)大鼠血漿中4種CYP450亞型酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4）探針?biāo)幬铩Х纫?、甲苯磺丁脲、美托洛爾和氨苯砜同時(shí)測(cè)定的方法，為相關(guān)研究提供了方法學(xué)參考。朱冬春等[7]也建立了同時(shí)測(cè)定大鼠血漿中CYP450酶探針?biāo)幬铮冗蛏匙?、甲苯磺丁脲和咪達(dá)唑侖）濃度的高效液相色譜法。

2 中藥有效成分與CYP450的相互作用

隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展和社會(huì)對(duì)食品安全的廣泛關(guān)注，中獸藥在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，臨床實(shí)踐中越來(lái)越多的養(yǎng)殖場(chǎng)通過(guò)采用中獸藥與西藥聯(lián)合應(yīng)用的模式來(lái)防控動(dòng)物疾病。與合成藥物一樣，中草藥的活性成分大多也是CYP450代謝底物，某些中藥能夠抑制或誘導(dǎo)CYP活性發(fā)生改變，導(dǎo)致了藥物間的相互作用[8]，從而對(duì)藥物的有效性和安全性產(chǎn)生影響。中藥單體成分如黃酮類(lèi)化合物對(duì)CYP450有誘導(dǎo)或抑制作用，涂自良等[9]研究發(fā)現(xiàn)在人肝微粒體反應(yīng)體系中，葛根素（0.1mmol/L）對(duì)CYP1A2和CYP2D6酶活性有較明顯的抑制作用，且隨著葛根素濃度的增高，對(duì)這兩種酶活性的抑制作用也隨之增強(qiáng)，但對(duì)CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4和CYP2E1酶活性沒(méi)有影響。K Sugimoto等[10]研究發(fā)現(xiàn)：淫羊藿總黃酮可以增加大鼠肝微粒體 CYP450蛋白總量，同時(shí)對(duì)CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1具有誘導(dǎo)作用。

在香豆素類(lèi)化合物對(duì)CYP450的調(diào)控作用研究中，最具代表性的案例是胡柚汁與特非那定等藥物聯(lián)用造成不良藥物反應(yīng)甚至引起患者死亡，其原因就是胡柚汁可選擇性抑制CYP3A4，而特非那定主要又經(jīng)CYP3A4代謝，因此飲用完胡柚汁后可減少許多合用藥物的首過(guò)效應(yīng)，從而增加經(jīng)其代謝的藥物的不良反應(yīng)[11]。近幾年對(duì)生物堿類(lèi)影響CYP450的研究也比較多，譚文超[12]考察鹽酸小檗堿對(duì)大鼠肝微粒體的蛋白含量，CYP450酶總量及CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4、CYP2C19活性的影響，發(fā)現(xiàn)鹽酸小檗堿對(duì)大鼠CYP3A4活性有一定抑制作用，對(duì)CYP1A2、CYP2D6和CYP2C19的活性沒(méi)有影響。吳茱萸次堿是從吳茱萸中提取的喹啉類(lèi)生物堿，體外試驗(yàn)顯示其對(duì)肝臟CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1的活性有抑制作用，對(duì)CYP2C9、CYP3A4則無(wú)明顯抑制作用[13]。

3 中藥及其提取物與CYP450的相互作用

臨床上使用中藥大多以散劑或提取物的形式入藥，單一的中藥活性成分對(duì)CYP450酶的影響可能與單味中藥或復(fù)方用藥時(shí)對(duì)CYP450酶的影響有所不同。因此，明確單味藥與動(dòng)物CYP450間的相互作用關(guān)系，對(duì)臨床用藥有現(xiàn)實(shí)指導(dǎo)意義。武佰玲等[14]研究了天王補(bǔ)心丸中滋陰類(lèi)藥物——生地黃、玄參、天冬和麥冬水提物對(duì)大鼠 CYP450酶含量及對(duì)亞型CYP3A、CYP2E1、CYP1A2活性的影響，結(jié)果表明：生地黃、玄參能夠降低大鼠肝臟CYP450酶含量并誘導(dǎo)CYP3A和CYP1A2活性，天冬誘導(dǎo)CYP2E1和CYP1A2活性，麥冬誘導(dǎo)CYP3A、CYP2E1和CYP1A2活性。呼自順等[15]使用Cocktail探針?biāo)幬锓ㄑ芯靠鄥?duì)大鼠CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4體內(nèi)代謝活性的影響，結(jié)果顯示：苦參可誘導(dǎo)大鼠體內(nèi)CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1，但對(duì)CYP1A2、CYP2C9的誘導(dǎo)強(qiáng)度低于苯巴比妥，對(duì)CYP2E1的誘導(dǎo)強(qiáng)度與苯巴比妥相似，對(duì)CYP3A4體內(nèi)活性未見(jiàn)顯著影響。家禽研究上，劉開(kāi)永等[16]通過(guò)Cocktail探針?biāo)幬锓ㄑ芯堪l(fā)現(xiàn)，嶺南黃雞內(nèi)服穿心蓮超微粉6d后，對(duì)CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1和CYP2C19的活性都有誘導(dǎo)作用，但與對(duì)照組相比，對(duì)CYP3A4的誘導(dǎo)作用不明顯，而對(duì)CYP2C19的誘導(dǎo)作用極顯著。

4 中藥配伍與CYP450的相互作用

配伍是中藥臨床應(yīng)用的主要方式，也是中藥研究的重點(diǎn)與難點(diǎn)，從CYP450的角度研究中藥之間的配伍關(guān)系具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，為中藥配伍禁忌從代謝機(jī)制角度提供了新的研究思路和方法。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為，甘草具有調(diào)和藥性、解百藥之毒的功效，因此許多中藥藥對(duì)及復(fù)方中都有甘草這味藥，但對(duì)于其解毒機(jī)制并不十分清楚。丁選勝等[17]認(rèn)為甘草對(duì)肝藥酶具有誘導(dǎo)作用可能是“甘草解百藥之毒”的一個(gè)機(jī)理，海藻、甘草按不同比例合煎后混合對(duì)小鼠灌胃給藥，結(jié)果甘草與海藻合煎液能顯著提高小鼠肝勻漿中細(xì)胞色素P450的含量，對(duì)肝藥酶有誘導(dǎo)作用。提示當(dāng)方藥中有這一相反藥對(duì)存在時(shí)，其對(duì)生物轉(zhuǎn)化有誘導(dǎo)作用，由于藥物代謝酶活性增加使得藥物的生物轉(zhuǎn)化（代謝）加快，對(duì)方中其他藥物代謝產(chǎn)生影響，可能改變方中一些藥物甚至整個(gè)方藥的藥理或毒理作用。華碧春等[18]通過(guò)RT-PCR檢測(cè)方法研究甘草對(duì)黃藥子引起的大鼠肝損傷的CYP450酶基因表達(dá)的影響，結(jié)果顯示：甘草能夠通過(guò)抑制CYP1A2的mRNA表達(dá)，對(duì)黃藥子所致肝損傷具有一定的保護(hù)作用。周建明等[19]通過(guò)紫外分光光度法及RT-PCR法研究了中藥十八反中的“苦參與藜蘆”合用對(duì)大鼠CYP450酶活性及mRNA水平調(diào)控的影響，結(jié)果顯示：苦參與藜蘆合用可明顯降低CYP450蛋白含量及b5的含量，并能使APND活性下降；在mRNA水平上，藜蘆可誘導(dǎo)CYP2C11的基因表達(dá)，與苦參合用后卻使得CYP2C11的表達(dá)下降，而各單藥及配伍組對(duì)CYP1A1基本無(wú)表達(dá)；苦參可誘導(dǎo)CYP2B一半的基因表達(dá)，但苦參與藜蘆配伍卻顯示了微弱的抑制作用；苦參與藜蘆合用及各單藥對(duì)CYP3A1的表達(dá)均有一定的抑制作用。

5 結(jié)論

目前關(guān)于中藥對(duì)CYP450活性影響的研究主要還是集中在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人上，對(duì)于家養(yǎng)動(dòng)物而言，這方面的研究相對(duì)較少。由于藥物與CYP450的相互影響存在種屬間差異，因此，在當(dāng)下中藥廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖的大背景下，加強(qiáng)中獸藥與家養(yǎng)動(dòng)物CYP450相互影響的研究工作，將對(duì)中獸藥在獸醫(yī)臨床上的合理應(yīng)用，提高中藥與化藥、中藥與中藥間的聯(lián)合用藥安全性和有效性具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

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Research Progress of Interaction Between CYP450 Enzyme System and Traditional Chinese Medicine

LI Sicong，LI Jinliang，LI Xutin*
（Sichuan Animal Science Academy，Animal Breeding and Genetics Key Laboratory of Sichuan Province，Sichuan Chengdu 610066，China）

In this paper，the methods of"cocktail"probe drugs，the interaction between traditional Chinese medicine，active ingredients，herbal extracts，herbal compounds and CYP450 enzyme etc.were summarized so as to provide reference and guidance for future research.

Traditional Chinese medicine；CYP450；Metabolism；Probe drugs

Q599.9

A

1001-8964（2017）06-0029-03

2017-03-24

四川省公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目（SASA2014A13）；四川省財(cái)政運(yùn)行專(zhuān)項(xiàng)（SASA2014CZYX010）

李思聰（1985-），男，四川成都人，助理研究員，碩士，從事獸藥基礎(chǔ)研究與開(kāi)發(fā)工作。

*通訊作者：李旭廷（1977-），男，副研究員。