齊栓柱/內(nèi)蒙古通遼市科左中旗腰林毛都鎮(zhèn)動物防疫站
豬圓環(huán)病毒2型的流行特點及疫苗的研究現(xiàn)狀
王琳/哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司
齊栓柱/內(nèi)蒙古通遼市科左中旗腰林毛都鎮(zhèn)動物防疫站
豬圓環(huán)病毒(Porcine Circovirus,PCV)屬圓環(huán)病毒科(Circoviridae)圓環(huán)病毒屬,為已知的最小的動物病毒之一。PCV可以分為PCV1和PCV2兩種血清型。PCV1無致病性,但廣泛存在豬體內(nèi)及豬源代細(xì)胞系,1974年,Tischer首次從PK-15豬腎傳代細(xì)胞系中分離。PCV2具有致病性,是引起豬圓環(huán)病毒病(PCVD)的病原,該病主要以多系統(tǒng)病理損傷為特征,以哺乳期和育成期的豬最易感,尤其是5~12周齡的仔豬,一般在斷奶后2~3 d開始發(fā)病,急性發(fā)病豬群中,病死率高達(dá)10%;PCV2是一種重要的豬病病原,與近年來在各地廣泛流行的斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、仔豬先天性震顫(CT)、豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)以及豬繁殖系統(tǒng)障礙等多種疾病密切相關(guān),給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。目前PCVD在世界各國的豬群中廣泛存在,已經(jīng)嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展,有調(diào)查顯示,該病在我國已廣泛流行。
豬是PCV2的天然宿主,PCV2對豬有極強(qiáng)的感染能力,不同品種、各種年齡的豬都可以被感染,但在其他動物檢測不到該病毒抗體的存在。PCV2傳播方式多樣,主要通過消化道和呼吸道等水平途徑傳播,但病毒也可以通過胎盤屏障垂直傳播傳染給胎兒,也有研究表明,公豬精液可能是傳播PCV2的途徑之一,并從豬的精液中檢測到了PCV2病毒。
PCVD在我國流行廣泛,感染范圍較大,流行時間較長。郎洪武等對北京、河北、天津、吉林、山東、江西、河南等7個省市不同生長階段的豬群采集了559份血清,ELISA方法檢測發(fā)現(xiàn)總體陽性率為42.9%。王忠田等對北京、天津、廣東、深圳、山西、山東等地規(guī)?;B(yǎng)豬場的臨床發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查, PCR檢測結(jié)果表明,12個豬場中有11個豬場發(fā)生了由PCV2引起的PMWS,1個豬場發(fā)生了PDNS。近年來,我國各地區(qū)也有相應(yīng)的報道,崔亞蘭等收集貴州省9個市(州)2007—2011年不同飼養(yǎng)規(guī)模(養(yǎng)豬戶)及屠宰場未免疫豬血清樣本共4 980頭份,2011年19個豬場(屠宰場)的可疑病料133份,采用PCR及ELISA方法對PCV2抗體及病原核酸進(jìn)行檢測。結(jié)果表明:貴州省9個市(州)不同飼養(yǎng)規(guī)模 (養(yǎng)豬戶)生豬屠宰場及不同生長階段均可檢出PCV2抗體,總體陽性率達(dá)43.45%(2164/4980),且2007—2011年P(guān)CV2抗體陽性率呈上升趨勢。采用PCR檢測19個豬場133份可疑病料,結(jié)果顯示:有16個豬場PCV2檢測為陽性,檢出率為84.21%(16/19),其中103份病料檢出PCV2病原核酸,陽性率為77.44%(103/133)。
1.滅活疫苗。PCV2滅活疫苗是應(yīng)用PK-15傳代細(xì)胞培養(yǎng)PCV2,經(jīng)滅活、濃縮后按一定比例加入佐劑制成的疫苗,經(jīng)肌肉注射,可誘導(dǎo)產(chǎn)生體液免疫,以獲得保護(hù)力。該類疫苗無毒、安全,穩(wěn)定,但存在刺激時間短,需多次重復(fù)接種的缺點。目前,國、內(nèi)外對PCV2滅活疫苗的研究已取得了巨大進(jìn)展。法國梅利亞公司研究開發(fā)的PCV2油包水乳劑滅活疫苗,在一些歐洲國家已經(jīng)注冊上市,免疫母豬或經(jīng)產(chǎn)母豬,所產(chǎn)小豬可從初乳中獲得母源抗體,實驗和臨床結(jié)果表明,該疫苗免疫效果較好,可有效預(yù)防PCV2的感染。國內(nèi)現(xiàn)有3種自主研發(fā)的PCV2常規(guī)滅活疫苗已獲準(zhǔn)生產(chǎn)上市。其中,哈爾濱獸醫(yī)研究所研制的PCV2滅活疫苗LG株,免疫應(yīng)答快,免疫效果較好。另有南京農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)的PCV2滅活疫苗SH株和北京大北農(nóng)集團(tuán)研制的PCV2滅活疫苗DBN—SX07株。
2.弱毒疫苗。本類疫苗可刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫、體液免疫和黏膜免疫,免疫力持久,但其儲存和運輸需在冷凍條件下,且存在毒力返強(qiáng)的風(fēng)險。Fenaux等將PCV2在PK15細(xì)胞上傳至120代時,發(fā)現(xiàn)病毒滴度較第1代有所提高。將其接種豬后,免疫豬血液病毒載量明顯下降,且所造成的組織損傷明顯減弱。經(jīng)全基因組序列分析,發(fā)現(xiàn)PCV2傳至120代后,在衣殼蛋白基因中有兩處發(fā)生突變,氨基酸水平上體現(xiàn)為P110A 和R191S,表明這兩處突變可顯著提高PCV2的體外生長力,并降低其毒力。該發(fā)現(xiàn)對PCV2弱毒疫苗的開發(fā)研究具有重要意義。
3.亞單位疫苗。此類疫苗只含有病原微生物的抗原成分,而不含有核酸,可刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,勃林格公司開發(fā)的PCV2亞單位疫苗Ingelvac CircoFlex 在美國的田間實驗結(jié)果表明,免疫豬在育肥期死亡率從9.5%下降至2.4%。
4.嵌合疫苗。將PCV2的ORF2克隆到缺失ORF2的PCVl的骨架中,從而獲得PCVI-PCV2 嵌合病毒,具有與PCV2 類似的免疫原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng),且具備不易發(fā)生毒力返強(qiáng)的優(yōu)勢。如美國富道動物保健公司、輝瑞制藥有限公司的滅活嵌合病毒(PCV2a)疫苗。
PCVD在我國流行廣泛,對養(yǎng)豬業(yè)影響較大,疫苗免疫是預(yù)防本病的有效手段。近幾年,國內(nèi)外科學(xué)家一直致力于對PCV2疫苗的研究開發(fā),并已取得了巨大的成效,相信隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展及對PCV2疫苗的深入開發(fā)研究,獲得新型高效的PCV2疫苗必將實現(xiàn),PCVD也將更好地被控制。
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