楊瀟,李國信**,王智民,周喜玉,曲金橋,高天舒**
中藥干預(yù)自身免疫性甲狀腺炎的研究現(xiàn)狀和展望*
楊瀟1,李國信1**,王智民3,周喜玉2,曲金橋2,高天舒2**
(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院沈陽110034;2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院沈陽110847;3.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)研究生院沈陽110032)
自身免疫性甲狀腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)是典型的器官特異性自身免疫性疾病,以甲狀腺內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤和特異性甲狀腺自身抗體形成為特征,目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對本病缺乏有效的病因治療,對于本病甲狀腺功能正常期尚無特效藥,常處于被動(dòng)隨訪狀態(tài)。中醫(yī)藥治療具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多途徑特點(diǎn),在防治AIT發(fā)揮特色作用。針對近年來日趨增多的中醫(yī)藥防治AIT的藥理研究,進(jìn)行系統(tǒng)梳理與闡述,為其進(jìn)一步應(yīng)用提供參考依據(jù)。
中藥自身免疫性甲狀腺炎免疫藥理學(xué)研究
自身免疫性甲狀腺炎(Autoimmune Thyroiditis,AIT),又稱橋本甲狀腺炎(Hashimito's Thyroiditis,HT),是臨床內(nèi)分泌系統(tǒng)一類反復(fù)發(fā)作、難治性自身免疫性疾病,近年來發(fā)病率明顯增高,其主要特點(diǎn)是甲狀腺內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤和特異性甲狀腺自身抗體形成[1]。該病多數(shù)發(fā)展為甲狀腺功能減退癥(以下簡稱“甲減”),進(jìn)而繼發(fā)心、腎、神經(jīng)系統(tǒng)損傷或引發(fā)后代智力發(fā)育障礙,影響人類健康,近年來備受關(guān)注。目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對于AIT的病因和病理機(jī)制研究在遺傳、環(huán)境、凋亡、免疫等方面取得一定進(jìn)展[2],但尚無針對病因治療的措施,只有出現(xiàn)甲減給予補(bǔ)充左甲狀腺素治療,而對于甲狀腺功能正常期則無特效藥,絕大多數(shù)病例僅局限于被動(dòng)隨訪觀察。中醫(yī)藥在本病的治療中發(fā)揮了特色作用,主要在調(diào)節(jié)臟腑功能、改善機(jī)體免疫失衡狀態(tài)等方面積累了寶貴而豐富的經(jīng)驗(yàn),而中藥藥理學(xué)研究則是闡釋中醫(yī)治療特點(diǎn)的主要途徑,是揭示中醫(yī)治療復(fù)雜作用機(jī)制的主要手段,是實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的有力保障。因此,本文主要綜述中藥干預(yù)AIT藥理學(xué)研究的現(xiàn)狀及研究展望。
經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎小鼠(Experi?mental Autoimmune Thyroiditis,EAT)模型構(gòu)建方法[3,4],是在第0天將豬甲狀腺球蛋白和弗氏完全佐劑經(jīng)過乳化后給予小鼠皮下注射,第14天在使用同樣劑量的豬甲狀腺球蛋白和弗氏不完全佐劑乳化給與上述小鼠靠近尾部進(jìn)行第二次皮下注射,但此方法缺乏AIT遺傳背景性。目前,國際上多采用高碘水喂飼具有遺傳傾向的NOD.H-2h4小鼠的方法造模,成模率高。NOD.H-2h4小鼠表達(dá)I-AK基因型,又具有NOD/LtJ的遺傳背景,是AIT的高易感鼠,與人類自身免疫甲狀腺炎組織學(xué)改變相似[5,6]。給予7-8周齡NOD.H-2h4小鼠0.05%碘化鈉水,8周后幾乎100%小鼠發(fā)生AIT[7]。到目前為止,NOD.H-2h4小鼠是研究碘致AIT最理想的動(dòng)物模型之一[8],故多用于AIT機(jī)制研究。國內(nèi)致力于AIT研究領(lǐng)域的學(xué)者也多應(yīng)用該方法制備AIT模型,如滕曉春[9]研究顯示碘過量可導(dǎo)致NOD.H-2h4小鼠甲狀腺濾泡結(jié)構(gòu)破壞、并誘發(fā)AIT的發(fā)生,且與補(bǔ)碘劑量呈正相關(guān);薛海波[10]給予NOD.H-2h4小鼠高碘飲水8周后,超過80%小鼠甲狀腺中可觀察到不同程度的淋巴細(xì)胞浸潤;楊帆[11]研究也顯示碘過量可誘發(fā)NOD.H-2h4小鼠AIT的發(fā)生;而我們前期研究也證實(shí)應(yīng)用該方法制備AIT動(dòng)物模型,成模率高達(dá)100%,簡單可行[12]。
中醫(yī)藥治療AIT具有獨(dú)特的優(yōu)勢,主要體現(xiàn)在降低甲狀腺自身免疫性抗體及減輕甲狀腺病理損傷。研究顯示海藻玉壺湯可調(diào)節(jié)EAT大鼠甲狀腺激素和抗體水平,具有減輕甲狀腺病理損傷的作用[13]。散結(jié)消癭顆粒是臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)方,亦能調(diào)節(jié)EAT小鼠模型的甲狀腺激素及抗體的水平[14]。遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院高天舒團(tuán)隊(duì)提出本病“脾虛痰瘀”的中醫(yī)病機(jī)特點(diǎn),創(chuàng)立臨床經(jīng)驗(yàn)方“益氣化痰活血方”,具有健脾益氣、化痰活血之功效,前期研究應(yīng)用AIT易感NOD.H-2h4小鼠作為研究對象,結(jié)果顯示該方能有效減少甲狀腺淋巴細(xì)胞炎性浸潤,減輕AIT,其機(jī)制可能是通過調(diào)控相關(guān)炎癥因子抑制白細(xì)胞介素-23/白細(xì)胞介素-17(Inter?leukin-23/Interleukin-17,IL-23/IL-17)炎癥軸,減輕炎癥因子對甲狀腺的損傷,進(jìn)而發(fā)揮免疫抑制作用[15-17]。上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院院內(nèi)制劑消癭合劑具有益氣養(yǎng)陰、疏氣化痰之功效,采用經(jīng)典EAT造模方法,之后給予大鼠消癭合劑干預(yù),結(jié)果顯示該方既可降低EAT大鼠模型血清游離三碘甲狀腺原氨酸(Free Triio?dothyronine,F(xiàn)T3)、血清游離甲狀腺素(Free Thyroxine,F(xiàn)T4)水平,同時(shí)亦可降低甲狀腺球蛋白抗體(Thyro?globulin Antibody,TGAb)水平,改善炎癥浸潤,其機(jī)制與上調(diào)大鼠脾臟叉頭翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因(Forkhead/winged Helix Transcription Factor p3,F(xiàn)oxp3)mRNA、下調(diào)IL-17mRNA水平,糾正調(diào)節(jié)性T細(xì)胞/T輔助細(xì)胞17(Reg?ulatory T cell/Thelper Type 17 cell,Treg/Th17)細(xì)胞軸失衡相關(guān)[18];而消癭合劑治療AIT的細(xì)胞凋亡機(jī)制可能是通過降低甲狀腺上皮細(xì)胞自殺相關(guān)因子及其配體(Factor Associated Suicide/Factor Associated Suicide Li?gand,F(xiàn)as/FasL)表達(dá)相關(guān)[19]。華川等人應(yīng)用雷公藤和芪箭消癭湯圍繞AIT動(dòng)物模型開展研究,發(fā)現(xiàn)雷公藤片可以抑制一氧化氮的產(chǎn)生,減輕細(xì)胞毒性作用,降低甲狀腺自身抗體,糾正EAT小鼠免疫紊亂[20];另外發(fā)現(xiàn)芪箭消癭湯通過降低小鼠甲狀腺表皮生長因子受體陽性表達(dá),增加甲狀腺細(xì)胞凋亡率,降低腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)、白介素細(xì)胞-6(Interleu?kin-6,IL-6)水平,恢復(fù)受損甲狀腺濾泡細(xì)胞功能,進(jìn)而抑制甲狀腺自身抗體水平,減輕小鼠甲狀腺組織淋巴細(xì)胞浸潤,調(diào)節(jié)小鼠EAT免疫紊亂狀態(tài)[21-25]。人參皂苷具有雙相免疫調(diào)節(jié)作用,實(shí)驗(yàn)顯示人參皂苷通過調(diào)節(jié)T輔助細(xì)胞1/T輔助細(xì)胞2(T Helper Type 1 cell/T Helper Type 2 cell,Th1/Th2)的免疫失衡降低EAT大鼠血清抗體水平[26,27]。
AIT可歸屬中醫(yī)“癭病”范疇,多由飲食水土失宜,情志內(nèi)傷引起,并與先天稟賦、體質(zhì)密切相關(guān),其病因病機(jī)復(fù)雜,不同致病因素最終導(dǎo)致氣、痰、瘀互結(jié)頸前而成癭病。因本病不同分期臨床表現(xiàn)各異,目前尚缺乏統(tǒng)一的辨證論治標(biāo)準(zhǔn),多摻雜個(gè)人經(jīng)驗(yàn),如有按照甲狀腺功能異常演變分期論治,亦有按照病機(jī)虛實(shí)變化分型論治,亦有按照臨床表現(xiàn)主證兼證加減論治等等,但總體并未脫離其主要病機(jī)。并遵循“法隨證立,方從法出”的治療原則,辨證論治,療效彰顯,體現(xiàn)了中醫(yī)藥干預(yù)AIT的特點(diǎn)。以下分別從中成藥、中藥復(fù)方制劑綜述中藥可以改善HT患者臨床癥狀、甲狀腺腫以及抗體水平的研究現(xiàn)狀。
3.1 中成藥治療
有研究[28]顯示HT患者在應(yīng)用基礎(chǔ)用藥維持甲狀腺功能正常的前提下,另予穿山龍顆粒10 g日2次口服6個(gè)月后,抗甲狀腺過氧化物酶抗體(Thyroid Peroxi?dase Antibody,TPOAb)、TGAb抗體水平則呈下降趨勢,治療前后抗體變化差值與對照組比較,差異顯著,提示穿山龍能明顯降低HT患者高滴度的自身抗體,緩解HT的炎性反應(yīng),其機(jī)制可能是通過提高HT患者外周血Treg細(xì)胞,降低Th17細(xì)胞及IL-6的表達(dá),改善Th17/Treg失衡狀態(tài)進(jìn)而改善HT自身淋巴細(xì)胞對甲狀腺細(xì)胞的破壞。又如在低碘飲食的基礎(chǔ)上,口服黃芪膠囊2粒日3次持續(xù)12周后,可以使橋本氏甲狀腺炎患者TPOAb、TGAb水平下降,甲狀腺自身免疫反應(yīng)改善,臨床療效良好,無不良反應(yīng)[29]。劉婧茹等在基礎(chǔ)治療上聯(lián)合夏枯草膠囊2個(gè)月,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥組血清抗體水平明顯下降,外周血Th17/CD4+T下降,且與血清抗體呈顯著正相關(guān)[30]。
3.2 中藥復(fù)方治療
研究顯示在西藥控制甲狀腺激素水平的基礎(chǔ)上,橋本甲狀腺炎肝火痰凝證患者口服中藥清癭化痰湯治療3個(gè)月后,甲狀腺自身抗體滴度下降,甲狀腺峽部厚度減小,證明清癭化痰湯可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,對HT具有明確治療效果[31]。王素美將120例左旋甲狀腺素(L-thyroxine,L-T4)治療的HT甲減期患者隨機(jī)分為兩組,治療組聯(lián)合院內(nèi)制劑扶正愈癭湯治療60天后,癥狀、體征、甲功、甲狀腺體積及峽部厚度各方面均改善明顯[32]。張敏等將60例AIT患者隨機(jī)分2組,在西藥維持甲功正常的基礎(chǔ)上,加用益氣化痰消癭中藥,并根據(jù)不同兼證,臨證加減。結(jié)果顯示加用中藥復(fù)方組在降低抗體及改善甲狀腺腫大方面效果更佳[33]。陳思蘭等自擬補(bǔ)腎健脾疏肝方,在每天補(bǔ)充L-T4 25 μg的基礎(chǔ)上,加服自擬中藥湯劑組不僅能改善臨床癥狀及中醫(yī)證候積分,同時(shí)亦能改善TSH、免疫抗體指標(biāo)TPOAb和TGAb[34]。孟達(dá)理將確診AIT的30例患者隨機(jī)分為正常組和治療組2組,2組患者均同時(shí)服用LT4每天50 μg,結(jié)果顯示加服消癭方組TGAb及甲狀腺微粒體抗體(Thyroid Microsomal Antibody,TMAb)免疫性抗體顯著下降[35]。
中藥發(fā)揮藥效作用機(jī)制十分復(fù)雜,傳統(tǒng)藥理學(xué)研究模式無法精準(zhǔn)的解釋其復(fù)雜的藥理機(jī)制,常常忽視了中藥復(fù)方在體內(nèi)“多靶點(diǎn)、多途徑、多效應(yīng)”,協(xié)同作用的整體藥理作用。此外,目前中藥治療AIT機(jī)制研究的依據(jù)十分匱乏,大量研究仍停留在中藥復(fù)方、單體作為藥理活性階段,多集中在單一靶點(diǎn),或只重視某一通絡(luò),常常忽略了對“免疫失衡”的“整體”調(diào)節(jié)。因此,為了更好的從整體水平闡釋中藥復(fù)方改善AIT免疫失衡作用,有必要采用系統(tǒng)藥理學(xué)等新方法開展后續(xù)研究,為揭示中藥復(fù)方發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)、作用靶點(diǎn)及機(jī)制提供參考。
4.1 明確中藥復(fù)方的藥效成分
首先應(yīng)用現(xiàn)代色譜分析技術(shù),對AIT治療有效的中藥復(fù)方化學(xué)物質(zhì)成分鑒別、解析,并對中藥復(fù)方吸收入血成分及代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒別,為進(jìn)一步的藥理和作用機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。之后應(yīng)用疾病模型,評價(jià)中藥復(fù)方改善AIT免疫失衡的藥理學(xué)作用,揭示其作用機(jī)制及科學(xué)內(nèi)涵。
4.2 應(yīng)用組學(xué)技術(shù)深入闡釋中藥復(fù)方整體療效
隨著系統(tǒng)生物學(xué)的發(fā)展,近年來各種組學(xué)為中藥復(fù)方分析提供了新思路、新方法,比如基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物信息學(xué)等等。代謝組學(xué)可以從代謝水平評價(jià)中藥對目標(biāo)疾病損傷的改善程度及作用通路;又如通過蛋白質(zhì)組學(xué)研究找出中藥影響后的差異蛋白,體現(xiàn)中醫(yī)整體觀、動(dòng)態(tài)觀、辯證觀與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)有機(jī)結(jié)合,為中藥多組分、多靶點(diǎn)整體藥效作用機(jī)制研究提供新方法,為證實(shí)中藥發(fā)揮藥效作用的關(guān)鍵靶點(diǎn)和通路提供可能性,進(jìn)而解釋中藥治療AIT的分子機(jī)制;而轉(zhuǎn)錄組作為基因組和蛋白質(zhì)組的紐帶,可以幫助了解異常表達(dá)的基因情況,比如目前研究發(fā)現(xiàn)微小RNA-155(microRNA-155,miRNA-155)與AIT相關(guān)[36],那么是否存在其他異常表達(dá)的微小RNA(microRNA,miRNA),中藥復(fù)方治療是否干預(yù)未知的miRNA等等,進(jìn)而從整體角度系統(tǒng)闡述中藥藥效下游的藥物反應(yīng)差異,解釋中藥防治AIT的作用機(jī)理。
4.3 運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)
網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一門建立在疾病、基因、靶點(diǎn)與藥物相互之間作用的網(wǎng)絡(luò)模型表達(dá)基礎(chǔ)上,通過網(wǎng)絡(luò)分析系統(tǒng),從整體角度觀察藥物對疾病網(wǎng)絡(luò)的影響進(jìn)而揭示多分子藥物協(xié)同作用的新學(xué)科[37,38]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)先將藥物作用所涉及的蛋白靶點(diǎn)納入一個(gè)龐大的生物網(wǎng)絡(luò)中,再進(jìn)行分析、尋找藥物起作用的潛在通路,從整體水平上探討中藥與疾病間的關(guān)系,具有整體、協(xié)同、動(dòng)態(tài)的特點(diǎn),這一特點(diǎn)恰與中醫(yī)學(xué)“整體觀”和“辨證施治”的觀點(diǎn)不謀而合。利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對中藥復(fù)方化學(xué)成分與潛在靶標(biāo)群進(jìn)行對接,建立“成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò),快速地獲得具有較好作用的活性成分,可以給AIT中藥研究提供新的可行性方法[39]。
4.4 研究成果回歸臨床
目前,絕大多數(shù)中藥干預(yù)AIT的藥理學(xué)研究局限于基礎(chǔ)研究,而基于臨床藥理學(xué)的研究主要集中在藥效方面,或是僅僅改變某一單一生物學(xué)標(biāo)記物或炎性因子,尚缺乏高質(zhì)量、大樣本的針對中藥干預(yù)AIT隨機(jī)對照臨床藥理學(xué)研究,同時(shí)鮮見藥動(dòng)學(xué)、藥效學(xué)等臨床藥理學(xué)研究數(shù)據(jù)。那么如何將實(shí)驗(yàn)室研究成果科學(xué)合理的轉(zhuǎn)化、回歸臨床,如何將現(xiàn)代藥理學(xué)提示的量效關(guān)系在臨床上重新進(jìn)行探索,是亟待解決的課題,也是提高中醫(yī)辨治現(xiàn)代疾病臨床療效的重要途徑,是推動(dòng)中藥現(xiàn)代化走進(jìn)臨床的重要出路和舉措[40,41],也是讓廣大老百姓實(shí)實(shí)在在的受益于中藥現(xiàn)代化成就的重要體現(xiàn)。
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Current Situation and Prospect of Chinese Medicine Pharmacology onAutoimmune Thyroiditis
Yang Xiao1,Li Guoxin1,Wang Zhimin3,Zhou Xiyu2,Qu Jinqiao2,Gao Tianshu2
(1.The Second Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110034,China; 2.The Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 11087,China; 3.Graduate School,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 11032,China)
As the most common organ-specific autoimmune disease,autoimmune thyroiditis(AIT)is characterized by intrathyroidal lymphocyte infiltration and specificthyroid autoantibodies.Modern medicine is short of effective etiological treatment at present,and has no specific medicine foreuthyroidism of AIT patients,who have been followed-up passively. Chinese medicine treatmenthas the characteristics of multiple-targets,multiple-links and multiple-pathways,which plays a special superiorityrole in the prevention and treatment of AIT.The purpose of this article was to sort out and set forthmore Chinese medicine pharmacology on AIT recently,which provided evidence for further clinical apply.
Chinese medicine,autoimmune thyroiditis,immunepharmacology
10.11842/wst.2017.05.026
R581.4
A
(責(zé)任編輯:韓馥蔓,責(zé)任譯審:王晶)
2017-05-15
修回日期:2017-05-20
*國家自然科學(xué)基金委青年基金項(xiàng)目(81503474):基于microRNAs調(diào)控Th17細(xì)胞研究補(bǔ)氣健脾法對自身免疫性甲狀腺炎的干預(yù)機(jī)制,負(fù)責(zé)人:楊瀟;遼寧省科技廳博士啟動(dòng)基金(201501110):益氣化痰活血方干預(yù)自身免疫性甲狀腺炎的機(jī)制,負(fù)責(zé)人:楊瀟;遼寧省教育廳一般項(xiàng)目(L2015347):基于microRNA探討益氣化痰活血方干預(yù)自身免疫性甲狀腺炎的免疫學(xué)機(jī)制,負(fù)責(zé)人:楊瀟;科學(xué)技術(shù)部國家“十二五”重大新藥創(chuàng)制科技重大專項(xiàng)(2012ZX09303-017):中藥新藥臨床評價(jià)研究技術(shù)平臺,負(fù)責(zé)人:李國信;大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201510162000011):人參皂苷干預(yù)自身免疫甲狀腺炎小鼠免疫機(jī)制研究,負(fù)責(zé)人:張馨心。
**通訊作者:李國信,主任醫(yī)師,博士研究生導(dǎo)師,主要研究方向:中藥新藥研究;高天舒,主任醫(yī)師,博士研究生導(dǎo)師,主要研究方向:中西醫(yī)結(jié)合防治內(nèi)分泌疾病。