卵巢癌患者血清Galectin-3水平及診斷價(jià)值研究

馬國(guó)慶 藍(lán)玲 李艷

·論著·

卵巢癌患者血清Galectin-3水平及診斷價(jià)值研究

馬國(guó)慶 藍(lán)玲 李艷

目的 觀察卵巢癌患者血清半乳糖苷酶-3(Galectin-3)水平，并探討其用于卵巢癌診斷的臨床價(jià)值。方法 納入2010年6月至2015年12月就診的初治卵巢癌患者92例，并設(shè)置良性卵巢腫瘤組(n=44)及健康對(duì)照組(n=43)?；颊叱醮尉驮\時(shí)收集一般情況并檢測(cè)血清CA125及HE4，收集剩余血清檢測(cè)Galectin-3水平。分析Galectin-3與臨床檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性，并使用ROC曲線評(píng)估其用于卵巢癌的診斷價(jià)值。結(jié)果 卵巢癌患者Galectin-3[(1.64±0.68)ng/ml]顯著高于良性卵巢腫瘤組[(0.86±0.42)ng/ml]及健康對(duì)照組[(0.69±0.20)ng/ml]，臨床分期較高及存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者Galectin-3水平更高。卵巢癌組中，Galectin-3與CA125(r=0.431，P<0.001)、HE4(r=0.331，P=0.001)及臨床分期(rs=0.431，P<0.001)顯著正相關(guān)。Galectin-3單獨(dú)診斷卵巢癌的AUC為0.861(95%CI：0.804～0.918)，其聯(lián)合CA125及HE4的AUC為0.916(95%CI：0.871～0.961)。結(jié)論 卵巢癌患者血清Galectin-3顯著升高，且與臨床分期顯著相關(guān)。Galectin-3聯(lián)合CA125及HE4可提高對(duì)卵巢癌的診斷效能。

卵巢腫瘤；半乳糖苷酶-3；人附睪蛋白-4；糖類(lèi)抗原125；診斷

卵巢癌在臨床較常見(jiàn)，由于來(lái)源于生殖系統(tǒng)，因此病理類(lèi)型復(fù)雜多樣，早期確診較為困難。目前，世界范圍內(nèi)每年約22萬(wàn)女性患卵巢癌，在婦科惡性腫瘤致死病因中排第二位，如北美地區(qū)每年新增約22 500例，其病死率可達(dá)67.7%，造成了嚴(yán)重的衛(wèi)生及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[1]。卵巢癌早期缺乏典型臨床癥狀及特異性篩查方法，大部分發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于病程中晚期，無(wú)法進(jìn)行手術(shù)切除，臨床預(yù)后極差。目前對(duì)卵巢癌的確診仍依賴于病理活檢，但是其存在有創(chuàng)性及不適于大規(guī)模篩查的缺點(diǎn)，同時(shí)活檢陽(yáng)性率也受到腫瘤分期的影響。臨床上也一直在尋找更為簡(jiǎn)便準(zhǔn)確的無(wú)創(chuàng)血清學(xué)指標(biāo)來(lái)改進(jìn)對(duì)卵巢癌的早期診斷及預(yù)后。糖類(lèi)抗原125(CA125)及人附睪蛋白4(HE4)是目前臨床應(yīng)用最多的卵巢癌診斷及預(yù)后的無(wú)創(chuàng)血清學(xué)指標(biāo)，也積累了大量的臨床研究數(shù)據(jù)[2,3]。然而CA125及HE4也易受到其他腫瘤干擾，準(zhǔn)確性有待進(jìn)一步提高。半乳糖苷酶-3(Galectin-3)的分子量為31 kDa，屬于β-糖苷結(jié)合凝集素家族成員，由人14號(hào)染色體上的LGALS3基因編碼[4]。研究顯示，Galectin-3在肝細(xì)胞癌(HCC)、結(jié)直腸癌、乳腺癌及甲狀腺癌等多種惡性腫瘤中均存在異常表達(dá)，并在惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)功能[5,6]。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)卵巢癌患者血清Galectin-3水平，并探討Galectin-3單獨(dú)或聯(lián)合CA125及HE用于改進(jìn)卵巢癌無(wú)創(chuàng)診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院婦產(chǎn)科收治的2010年6月至2015年12月初治卵巢癌患者92例(卵巢癌組)，年齡(50.37±6.36)歲，其中61例(66.3%)患者已經(jīng)絕經(jīng)。卵巢癌均經(jīng)由組織活檢或術(shù)中病理活檢確診?；颊吲R床分期及病理分型按照最新的國(guó)際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)(FIGO)的指南標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期[7]。卵巢癌組患者臨床分期情況：Ⅰ期11例(12.0%)，Ⅱ期18例(19.6%)，Ⅲ期25例(27.2%)及Ⅳ期38例(41.3%)。病理分型分布情況：漿液性囊腺癌57例(62.0%)、黏液性囊腺癌14例(15.2%)、子宮內(nèi)膜樣癌10例(10.9%)、透明細(xì)胞癌5例(5.4%)、惡性畸胎瘤4例(4.3%)及分類(lèi)不明型2例(2.2%)。同時(shí)納入我院就診(體檢)的良性卵巢腫瘤患者44例(良性卵巢腫瘤組)及健康女性43例(健康對(duì)照組)，年齡分別為(51.13±7.12)及(52.45±6.44)歲。

1.2 血清Galectin-3、CA125及HE4的檢測(cè) 所有患者初次就診(或體檢)時(shí)收集常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目剩余血清，凍存于-20℃冰箱。血清Galectin-3的檢測(cè)使用成品化商業(yè)酶聯(lián)免疫試劑盒(Human Galectin-3，ELISA Kit)，購(gòu)自北京安必奇生物科技有限公司，檢測(cè)方法按照試劑盒相關(guān)步驟進(jìn)行(每份血清標(biāo)本設(shè)置2個(gè)復(fù)孔)。血清HE4的檢測(cè)使用相應(yīng)ELISA試劑盒(Human HE4，ELISA Kit)，購(gòu)自上海樊克生物科技有限公司，檢測(cè)方法按照相關(guān)步驟進(jìn)行。使用酶標(biāo)儀(Scientific Multiskan FC，Thermo公司)檢測(cè)OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品Galectin-3濃度，患者Galectin-3水平由復(fù)孔濃度取平均值確定。血清CA125使用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)(Roche，COBAS6000)。

2 結(jié)果

2.1 3組患者血清Galectin-3、CA125及HE4水平比較 卵巢癌組中，血清Galectin-3水平顯著高于良性卵巢腫瘤組及健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。卵巢癌組患者血清CA125及HE4水平也高于良性腫瘤組及健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。不同卵巢癌臨床分期患者Galectin-3水平由高至低依次為：Ⅳ期(2.01±0.75)ng/ml、Ⅲ期(1.49±0.56)ng/ml、Ⅱ期(1.37±0.43)ng/ml及Ⅰ期(1.16±0.34)ng/ml；存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(n=33)較無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(n=59)的卵巢癌患者Galectin-3水平[(1.98±0.77)ng/mlvs.1.46±0.55)ng/ml]更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004)。見(jiàn)表1，圖1。

表1 3組患者一般情況及血清Galectin-3、CA125及HE4水平比較

2.2 血清Galectin-3水平與臨床指標(biāo)及分期的相關(guān)性 卵巢癌組中，Galectin-3與CA125(r=0.431，P<0.01)、HE4(r=0.331，P=0.001)、臨床分期(rs=0.431，P<0.001)呈正相關(guān)；Galectin-3水平與年齡(r=0.103，P=0.329)、BMI(r=0.017，P=0.869)均無(wú)相關(guān)性。良性卵巢腫瘤組中，Galectin-3水平與年齡(r=0.186，P=0.227)、BMI(r=0.044，P=0.778)、CA125(r=0.216，P=0.158)及HE4(r=0.055，P=0.724)均無(wú)相關(guān)性；健康對(duì)照組中，Galectin-3水平也與年齡(r=0.011，P=0.942)、BMI(r=0.139，P=0.374)、CA125(r=0.220，P=0.157)及HE4(R=0.067，P=0.670)無(wú)相關(guān)性。見(jiàn)圖2。

2.3 Galectin-3用于卵巢癌的診斷價(jià)值分析ROC曲線分析 血清Galectin-3單獨(dú)診斷卵巢癌的AUC為0.861，95%CI為0.804～0.918；HE4的AUC為0.871，95%CI為0.871～0.924；CA125的AUC為0.844,95%CI為0.789～0.899。血清Galectin-3聯(lián)合HE4診斷卵巢癌的AUC為0.891，95%CI為0.840～0.941；Galectin-3聯(lián)合CA125的AUC為0.899，95%CI為0.851～0.948；Galectin-3聯(lián)合HE4、CA125的AUC為0.916，95%CI為0.871～0.961。見(jiàn)圖3、4。

3 討論

卵巢癌是來(lái)源于生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤，由于臨床上缺乏早期特異性檢查診斷方法，患者確診時(shí)往往處于中晚期，預(yù)后極差[8]。作為金標(biāo)準(zhǔn)的病理活檢由于有創(chuàng)且不適用于早期患者，因此臨床應(yīng)用受到一定限制。學(xué)者們也一直在探索更為優(yōu)良的無(wú)創(chuàng)血清學(xué)指標(biāo)來(lái)指導(dǎo)臨床診斷及預(yù)后[9]。Galectin-3是作為一種β-糖苷結(jié)合凝集素，廣泛表達(dá)于上皮及免疫細(xì)胞表面，同時(shí)也在多種腫瘤細(xì)胞中高度表達(dá)，與腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)、侵襲及轉(zhuǎn)移高度相關(guān)[10]。但是，Galectin-3在卵巢癌中的表達(dá)情況及其臨床價(jià)值的相關(guān)研究還較為匱乏。因此，研究通過(guò)檢測(cè)卵巢癌患者血清Galectin-3水平，并聯(lián)合經(jīng)典卵巢癌標(biāo)志物CA125及HE4分析了Galectin-3用于卵巢癌診斷的臨床價(jià)值。

圖1 不同臨床分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況的卵巢癌患者血清Galectin-3水平

圖2 血清Galectin-3與CA125、HE4、年齡及BMI的相關(guān)性分析

圖3 Galectin-3、HE4及CA125單獨(dú)用于診斷卵巢癌的ROC曲線

圖4 Galectin-3、HE4及CA125聯(lián)合用于診斷卵巢癌的ROC曲線

本研究基于較大樣本的初治卵巢癌患者隊(duì)列分析顯示，卵巢癌患者血清Galectin-3水平顯著高于良性卵巢腫瘤患者及健康女性，而且Galectin-3水平與卵巢癌臨床分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。Min等[11]的研究納入了129例卵巢癌患者，結(jié)果顯示，59.7%的患者均存在Galectin-3的表達(dá)升高，而且Galectin-3的高表達(dá)與臨床分期及不良預(yù)后相關(guān)。Serizawa等[12]的研究顯示，Galectin-3可通過(guò)激活RhoA GTP酶及肌球蛋白輕鏈2的磷酸化來(lái)調(diào)節(jié)HCC細(xì)胞的侵襲，這種機(jī)制是否也存在于其對(duì)卵巢癌的調(diào)節(jié)中也值得深入探討。靶向Galectin-3的治療可在一定程度上抑制卵巢癌的增殖及轉(zhuǎn)移，驗(yàn)證了Galectin-3在卵巢癌中的重要調(diào)節(jié)作用。Mirandola等[13]在研究中使用了內(nèi)源性Galectin-3拮抗劑(Galetic-3C)治療卵巢癌細(xì)胞株及來(lái)自患者的原始癌細(xì)胞，結(jié)果顯示Galetic-3C可以顯著降低癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)、侵襲及促血管生成能力，提示了Galectin-3是卵巢癌這些功能的重要調(diào)節(jié)因子。

我們也通過(guò)聯(lián)合血清CA125、HE4的方式，分析了Galectin-3用于卵巢癌診斷的臨床價(jià)值。結(jié)果顯示，血清Galectin-3與CA125及HE4水平呈顯著正相關(guān)，Galectin-3單獨(dú)診斷卵巢癌的價(jià)值(AUC=0.861)與CA125(AUC=0.844)及HE4(AUC=0.871)相近，Galectin-3聯(lián)合CA125及HE4時(shí)可獲得最佳的診斷價(jià)值(AUC=0.916)。CA125及HE4是目前臨床上應(yīng)用較為廣泛且得到公認(rèn)的卵巢癌診斷及預(yù)后血清指標(biāo)，Galectin-3與兩者的相關(guān)性也提示其具有卵巢診斷及預(yù)后價(jià)值。同時(shí)，我們的研究也通過(guò)ROC分析進(jìn)一步驗(yàn)證了Galectin-3的診斷卵巢癌的效能。Kim等[14]的研究中納入了71例卵巢癌患者，免疫組化結(jié)果顯示，Galectin-3在88.7%(63/71)的患者標(biāo)本中存在表達(dá)升高，而在健康對(duì)照的卵巢組織中表達(dá)并無(wú)升高。Galectin-3表達(dá)的升高還與更短的無(wú)病生存率相關(guān)(P=0.039)。此外，Lee等[15]研究也顯示，卵巢癌患者原位癌組織中Galectin-3存在顯著表達(dá)升高，而且不同的病理分型也存在一定差異，其中透明細(xì)胞癌、漿液性腺癌及粘液性腺癌中Galectin-3的表達(dá)更高。這些研究與我們的結(jié)果相似，均提示了Galectin-3作為卵巢癌診斷及預(yù)后標(biāo)志物的潛在臨床價(jià)值。

本研究檢測(cè)了卵巢癌患者血清Galectin-3水平，并探討了Galectin-3單獨(dú)或聯(lián)合CA125及HE4診斷卵巢癌的臨床價(jià)值。血清Galectin-3水平在卵巢癌患者中顯著升高，且其單獨(dú)或聯(lián)合其他指標(biāo)診斷卵巢癌的價(jià)值較高，可能作為臨床候選指標(biāo)。然而本研究也存在一定的不足，如缺少Galectin-3對(duì)患者預(yù)后影響的觀察分析。在下步的研究中還需對(duì)Galectin-3用于卵巢癌診斷及預(yù)后的價(jià)值進(jìn)行更深入的探討，以求為更準(zhǔn)確的臨床診斷及預(yù)后提供參考。

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The serum levels of Galectin-3 in patients with ovarian cancer and its clinical diagnostic value

MAGuoqing,LANLing,LIYan.

DepartmentofObstetricsandGynecology,TraditionalChineseMedicineHospitalofTongnanDistrict,Chongqing401121,China

Objective To investigate the serum levels of Galectin-3 and its clinical diagnostic value in patients with primary ovarian cancer.Methods A total of 92 patients with ovarian cancer who were treated from June 2010 to December 2015 were enrolled in the study as observation group, moreover, benign ovarian tumor group (n=44)andcontrolgroup(43healthysubjects)weresetup.Thegeneralconditionsofpatientswererecordedintheirfirstvisiting,andtheserumlevelsofCA125,HE4andGalectin-3weredetected.MoreoverthecorrelationbetweenGalectin-3andclinicalparameterswasanalyzed.TheROCcurvewasusedtoevaluatethediagnositcvalveofGalectin-3inovariancancer.Results The serum levels of Galectin-3 in observation group [(1.64±0.68)ng/ml] were significantly higher than those in benign ovarian tumor group [(0.86±0.42)ng/ml] and control group [0.69±0.20)ng/ml],and the serum levels of Galectin-3 were even higher in patients with higher clinical stage and with distant metastases. In observation group, Galectin-3 was positively correlated to CA125 (r=0.431,P<0.01),HE4 (r=0.331,P<0.01)andclinicalstages(RS=0.431,P<0.01).TheAUCofGalectin-3insingleindexdiagnosisgroupwas0.861 (95%CI:0.804～0.918),however,whichincombinationdiagnosisofGalectin-3withHE4andCA125was0.916 (95%CI: 0.871～0.961).Conclusion The serum levels of Galectin-3 are obviously increased in patients with ovarian cancer,moreover,which are closely correlated with clinical stages.The combination diagnosis of Galectin-3 with CA125 and HE4 can enhance diagnostic efficacy for ovarian cancer.

ovarian cancer；galectin-3；human epididymis protein 4；carbohydrate antigen 125；diganosis

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.02.005

401121 重慶市潼南區(qū)中醫(yī)院婦產(chǎn)科

R

A

1002-7386(2017)02-0182-04

2016-07-18)