胰腺實(shí)性假乳頭狀瘤臨床病理學(xué)與術(shù)后復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

高漢青，龐 霞，趙香田，王青杰，馬怡暉

胰腺實(shí)性假乳頭狀瘤(solid-pseuopapillary neoplasm, SPN)是一種罕見的胰腺囊實(shí)性腫瘤，隨著近年來影像學(xué)技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展，SPN發(fā)病率有所提高[1]。WHO(2000)胰腺腫瘤分類將SPN分為具有交界性惡性潛能的SPN和實(shí)性假乳頭狀癌，并指出血管侵犯、神經(jīng)周圍侵犯以及周圍胰腺實(shí)質(zhì)的深部浸潤提示惡性生物學(xué)行為；WHO(2010)胰腺腫瘤分類則直接將SPN歸入惡性腫瘤范疇。雖然SPN預(yù)后良好，手術(shù)完整切除腫瘤，患者5年生存率可達(dá)95%以上[2]，但仍有部分患者出現(xiàn)轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)。目前關(guān)于SPN復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的研究較少。作者搜集了具有完整的臨床病理資料和隨訪記錄的73例手術(shù)切除的胰腺SPN，分析其臨床病理學(xué)特征，探討臨床病理學(xué)特征與其術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，以期更深入地認(rèn)識與SPN復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素。

1 材料與方法

1.1材料收集2008年1月～2016年6月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院手術(shù)切除的具有完整的臨床資料及隨訪資料的SPN患者73例，由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師復(fù)查切片。

1.2方法手術(shù)切除標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚切片后行HE染色。免疫組化采用SP法，染色步驟按照試劑盒操作說明書在自動免疫組化儀上進(jìn)行，一抗Ki-67以及所需試劑均購自福州邁新公司。

1.3Ki-67結(jié)果判定于熱點(diǎn)區(qū)隨機(jī)選擇10個高倍視野，計數(shù)1 000個腫瘤細(xì)胞，以其中陽性腫瘤細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)表示Ki-67的增殖指數(shù)。

1.4隨訪采用電話隨訪患者的方法，以患者手術(shù)后第1天為隨訪起始點(diǎn)，以各種原因死亡為隨訪終止點(diǎn)，截止隨訪日期為2017年6月底。

1.5統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，對非復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組與復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組患者性別、年齡、腫瘤大小采用兩獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)，對腫瘤發(fā)生部位、腫瘤病理學(xué)特點(diǎn)采用χ2或Fisher確切概率法檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1臨床特征73例胰腺SPN中女性57例(78%)，男性16例(22%)，發(fā)病年齡7～68歲，平均28歲，中位年齡27歲。25例(34.2%)無明顯臨床癥狀，于體檢時發(fā)現(xiàn)胰腺占位，5例(6.8%)因觸及腹部腫塊就診，41例(56.2%)出現(xiàn)腹痛、惡心、嘔吐等癥狀，1例(1.4%)出現(xiàn)肝功能異常，1例(1.4%)出現(xiàn)黃疸。73例胰腺SPN患者術(shù)前均行CT和(或)MRI檢查，其中30例(41.1%)術(shù)前考慮胰腺SPN，其余43例(58.9%)考慮為胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、胰腺囊腺瘤、胰母細(xì)胞瘤或間葉來源腫瘤等。10例(13.7%)行胰十二指腸切除術(shù)，23例(31.5%)行胰體尾及脾臟切除術(shù)，7例(9.6%)行胰體尾切除術(shù)，33例(45.2%)行腫物切除術(shù)。所有手術(shù)均是R0切除，未發(fā)現(xiàn)有腫物殘留。30例SPN(41.1%%)位于胰頭、9例(12.3%)位于胰體、33例(45.2%)位于胰尾，1例(1.4%)為多發(fā)病灶，分別位于胰頭及胰尾。根據(jù)WHO(2010)胰腺腫瘤TNM分期對73例患者進(jìn)行分期，ⅠA期3例(4.1%)，ⅡA期61例(83.6%)，ⅡB期9例(12.3%)。

2.2病理檢查

2.2.1眼觀 73例胰腺SPN瘤體平均直徑為6.47 cm(范圍0.13～14 cm)，43例(59.0%)切面呈實(shí)性，15例(20.5%)呈囊性，15例(20.5%)呈囊實(shí)性。

2.2.2鏡檢 SPN實(shí)性區(qū)由細(xì)胞豐富的實(shí)性巢團(tuán)構(gòu)成，間質(zhì)內(nèi)血管豐富纖細(xì)，遠(yuǎn)離血管的腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)退變、黏附性差，圍繞血管周圍形成所謂的假乳頭狀排列；囊性區(qū)常可見出血、壞死、泡沫細(xì)胞聚集及膽固醇結(jié)晶沉積。40例(54.8%)伴有壞死，20例(27.3%)伴有膽固醇結(jié)晶，20例(27.3%)伴有鈣化，9例(12.3%)伴有泡沫細(xì)胞，2例(2.7%)細(xì)胞核有異型性(圖1)。40例(54.8%)有完整纖維性包膜，但可見瘤組織侵入包膜并平行穿插在包膜中生長(未突破包膜)(圖2)；33例(45.2%)包膜不完整或無包膜，于胰腺組織內(nèi)浸潤性生長(圖3)或侵及胰腺外。16例(21.9%)見神經(jīng)周圍侵犯(圖4)；3例見脈管內(nèi)瘤栓(圖5)；10例(13.7%)見胰腺外侵犯，包括1例同時侵犯脾臟被膜及結(jié)腸漿膜面，2例侵犯脾臟被膜(圖6)，3例侵犯腸壁(2例侵犯十二指腸固有肌層，1例侵犯十二指腸漿膜面)，4例侵犯周圍脂肪及網(wǎng)膜組織。

2.2.3免疫表型 73例胰腺SPN中66例(90.4%)Ki-67增殖指數(shù)<4%；7例(9.6%)Ki-67≥4%。

2.3非復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組和復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組病理學(xué)特征的差異比較73例患者隨訪12～99個月，平均隨訪34.8個月。3例出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，其余患者術(shù)后均無瘤生存至今。1例患者于術(shù)后84個月復(fù)發(fā)，原發(fā)SPN中存在脈管瘤栓、神經(jīng)侵犯、包膜不完整并浸潤性生長，局部侵犯結(jié)腸漿膜面及脾臟被膜，Ki-67增殖指數(shù)約10%；該患者后帶瘤生存至今。1例患者于術(shù)后27個月發(fā)現(xiàn)肝臟多發(fā)轉(zhuǎn)移(圖7)，原發(fā)腫瘤包膜完整，有脈管瘤栓及神經(jīng)侵犯，細(xì)胞核異型性大，Ki-67增殖指數(shù)約20%(圖8)；該患者發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移后行肝右葉及部分肝左葉切除，目前仍健在。另1例患者于術(shù)后10個月復(fù)發(fā)，原發(fā)腫瘤包膜不完整，于胰腺組織內(nèi)浸潤性生長并局部浸潤胰腺周圍脂肪組織，Ki-67增殖指數(shù)約2%；該患者未治療生存至今。進(jìn)一步分析非復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組和復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組臨床病理學(xué)特征結(jié)果顯示：患者性別(P=0.119)、年齡(P=0.707)、瘤體大小(P=0.558)、瘤體部位(P=0.166)、切面囊性變(P=0.630)、壞死(P=0.247)、鈣化(P=0.557)、膽固醇結(jié)晶(P=0.180)、泡沫細(xì)胞(P=1.000)、細(xì)胞核異型性(P=0.081)、神經(jīng)侵犯(P=0.119)、浸潤性生長(P=0.586)等病理特征與SNP的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移無明顯差異，而脈管內(nèi)瘤栓(P<0.005)、胰腺外侵犯(P<0.05)以及Ki-67增殖指數(shù)≥4%(P<0.05)在非復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組與復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組間存在差異(表1)。

①②③④⑤⑥⑦⑧

圖1腫瘤細(xì)胞核重度異型性圖2腫瘤組織在包膜內(nèi)平行生長圖3腫瘤與周圍胰腺浸潤性生長圖4神經(jīng)周圍侵犯圖5脈管內(nèi)瘤栓圖6腫瘤侵犯脾臟被膜圖7腫瘤肝臟轉(zhuǎn)移圖8胰腺實(shí)性假乳頭狀瘤肝轉(zhuǎn)移患者胰腺原發(fā)灶腫瘤細(xì)胞散在陽性表達(dá)Ki-67，增殖指數(shù)約20%，SP法

表1 胰腺實(shí)性假乳頭狀瘤患者組織病理學(xué)特點(diǎn)在非復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組和復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移組中的差異

*P<0.05

3 討論

SPN是一種少見的具有惡性潛能的胰腺腫瘤，好發(fā)于20～40歲年輕女性，臨床表現(xiàn)往往無特異性，常因體檢發(fā)現(xiàn)[3]。病理學(xué)將鏡下神經(jīng)侵犯、血管侵犯、胰腺實(shí)質(zhì)的侵犯和胰外組織浸潤作為判定惡性SPN的指標(biāo)[4]，但關(guān)于SPN臨床病理特征與惡性潛能之間相關(guān)性的研究結(jié)果卻有所不同。Kang等[5]認(rèn)為，腫瘤直徑大于8 cm、淋巴血管侵犯、包膜侵犯、廣泛腫瘤性壞死以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是預(yù)測SPN復(fù)發(fā)的重要因素。Yang等[6-8]認(rèn)為血管內(nèi)瘤栓形成、胰腺外侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及Ki-67增殖指數(shù)≥4%與腫瘤復(fù)發(fā)有關(guān)。有文獻(xiàn)報道老年男性腫瘤不完整切除術(shù)后可能具有更高的復(fù)發(fā)和死亡風(fēng)險[9]。但也有學(xué)者認(rèn)為，病理學(xué)的惡性特征不能可靠地反映腫瘤的惡性生物學(xué)行為，缺乏這些特征的SPN也會出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移[10]。WHO(2010)胰腺腫瘤分類中神經(jīng)、血管侵犯及胰腺內(nèi)浸潤性生長并不提示腫瘤具有更高的惡性程度，因?yàn)闊o上述惡性組織學(xué)特征的SPN也有可能發(fā)生轉(zhuǎn)移[11]。

本組73例具有完整臨床病理資料和隨訪資料的SPN患者，經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，SPN復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移與患者性別、年齡、瘤體大小、瘤體部位、切面囊性變、細(xì)胞核異型性、壞死、鈣化、膽固醇結(jié)晶、泡沫細(xì)胞、神經(jīng)侵犯以及是否浸潤性生長等無關(guān)，但與瘤組織胰腺外侵犯、脈管內(nèi)瘤栓形成以及Ki-67增殖指數(shù)≥4%顯著相關(guān)。

脈管瘤栓常出現(xiàn)在惡性腫瘤中，胰腺癌中脈管癌栓形成后隨血液進(jìn)入肝臟更易在肝竇內(nèi)存活，是影響胰腺癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移的獨(dú)立因素[12]。本組實(shí)驗(yàn)亦發(fā)現(xiàn)脈管瘤栓的形成與SPN的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移相關(guān)。包膜是腫瘤在生長過程中與周圍正常組織之間形成的一個纖維性的分隔，惡性腫瘤較少形成包膜，即便形成也會出現(xiàn)包膜的侵犯。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)本組約半數(shù)SPN存在完整的纖維性包膜，部分包膜內(nèi)可見腫瘤成分，一定程度上顯示了SPN作為惡性腫瘤的生物學(xué)特點(diǎn)。但比較有趣的是，侵入包膜內(nèi)的瘤組織大都平行于包膜生長，僅有極個別垂直突破包膜浸潤至周圍胰腺組織內(nèi)，而且統(tǒng)計結(jié)果顯示，即便SPN呈浸潤性生長，也并沒有提示更高的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移率，只有當(dāng)SPN瘤組織侵犯到胰腺外時才和更高的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移率顯著相關(guān)。因此，作者認(rèn)為SPN這種生長方式一定程度反映其相對“惰性”的特點(diǎn)。另外，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SPN瘤組織在侵犯神經(jīng)束時，均表現(xiàn)為環(huán)周緊密包繞神經(jīng)束，而非侵入并破壞神經(jīng)束，曾有文獻(xiàn)報道將這種神經(jīng)侵犯稱為“神經(jīng)嵌頓”[13]，作者認(rèn)為，SPN在神經(jīng)侵犯中表現(xiàn)出的這種相對“溫和”的特征也同樣反映了其生長方式的相對“惰性”。Ki-67是評估細(xì)胞增殖的有效指標(biāo)，很多惡性腫瘤的不良預(yù)后均與其有關(guān)[14]。SPN作為一種低度惡性腫瘤，絕大多數(shù)Ki-67增殖指數(shù)較低，所以Ki-67的增殖指數(shù)對于SPN預(yù)后的預(yù)測一直存在疑問，尤其是其臨界值的界定。Yang等[8]通過ROC分析尋找并判定SPN的Ki-67臨界值，最終發(fā)現(xiàn)Ki-67增殖指數(shù)≥4%是預(yù)測SPN的有效因素。在本組實(shí)驗(yàn)中也證實(shí)了Ki-67增殖指數(shù)≥4%對于預(yù)測SPN的轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)有意義。

綜上所述，SPN雖然具有某些病理學(xué)的惡性特征，但其相對“溫和”生長方式和良好的預(yù)后說明SPN是一種“惰性”的惡性腫瘤，手術(shù)完整切除后很少復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移[15]。對于脈管內(nèi)瘤栓形成、胰腺外侵犯及Ki-67增殖指數(shù)≥4%的患者，因術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移風(fēng)險較高，臨床應(yīng)對這部分SPN患者需長期隨訪。

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