王愛華
摘要:目的 應(yīng)用3種不同的血清學(xué)方法測定血清標(biāo)本梅毒抗體并評價(jià)檢測結(jié)果。方法 將180份門診皮膚科及住院患者輸血前篩查已確診為梅毒陽性血清標(biāo)本分別使用CHEMCLIN600型全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀法、TP-ELISA法、RPR法測定,觀察三者的敏感度及特異性。結(jié)果 180例血清標(biāo)本中,CHMCLIN600法檢測陽性179例,陽性率為99.44%;TP-ELISA法檢測176例,陽性率為97.78%;RPR法檢測陽性121例,陽性率為62.22%。結(jié)論 CHEMCLIN600法檢測梅毒螺旋體特異性抗體具有操作簡便,結(jié)果易于保存,敏感度優(yōu)于TP-ELISA及RPR法等特點(diǎn),越來越廣泛地得到臨床的認(rèn)可和應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀;梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);梅毒快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)
梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種慢性全身性傳播疾病,主要通過性傳播。本病表現(xiàn)極為復(fù)雜,幾乎可侵犯全身各器官,造成多器官損害。目前,檢測梅毒的血清學(xué)檢測方法有很多種[1]。現(xiàn)臨床上常用的實(shí)驗(yàn)室檢測方法有梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA)、梅毒快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)、CHEMCLIN600全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光法等。為了解這些方法準(zhǔn)確性和特異性,現(xiàn)對近期我院180份門診皮膚科及住院患者輸血前篩查已確診為梅毒陽性血清標(biāo)本檢測的結(jié)果分析如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 ①標(biāo)本:本院近期門診皮膚科及住院患者輸血前篩查梅毒陽性共180份血清標(biāo)本。其中男性107例,女性73例。一期梅毒98例,二期梅毒65例,三期17例。年齡為18~60;②試劑:RPR試劑盒為由上海科華生物工程股份有限公司產(chǎn)品,TP-ELISA試劑盒為英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司產(chǎn)品,CHEMCLIN600試劑盒為北京科美生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。
1.2方法 試驗(yàn)操作步驟及結(jié)果判斷嚴(yán)格按試劑盒說明書執(zhí)行。
2 結(jié)果
三種方法檢測結(jié)果見表1,由表1可以看出,180例血清標(biāo)本中,CHEMCLIN600法檢出陽性179例,占99.44%;TP-ELISA法檢出陽性176例,占97.78%;RPR法檢出陽性121例,占62.22%。CHEMCLIN600法檢測陽性率優(yōu)于TP-ELISA及RPR法。
3 討論
梅毒螺旋體感染后,機(jī)體可產(chǎn)生特異性的梅毒螺旋體抗體。CHEMCLIN600法是采用雙抗原夾心法化學(xué)發(fā)光免疫分析原理,屬于梅毒螺旋體特異性抗原結(jié)合試驗(yàn),使用多種梅毒螺旋體特異性蛋白抗原包被固相發(fā)光微孔板,它們與樣本中梅毒螺旋體抗體形成抗原-抗體復(fù)合物,溫育后加入用辣根過氧化物酶標(biāo)記相同梅毒螺旋體抗原的酶標(biāo)抗原,充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液,然后測定其發(fā)光值(RLU),根據(jù)臨界值判斷樣本中是否含有梅毒螺旋體特異性抗體[2]。
CHEMCLIN600法對一期梅毒的陽性率為98.98%,二期梅毒的陽性率為100.00%,具有敏感性高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn),并且全自動(dòng)免疫分析儀的使用大大提高了檢驗(yàn)質(zhì)量,避免人為因素影響,不僅提高了工作效率,也提高了梅毒血清學(xué)的陽性率,以便梅毒患者能得到及時(shí)有效的診治。TP-ELISA是采用雙抗原夾心法檢測梅毒螺旋體抗體。在微孔條預(yù)包被基因表達(dá)梅毒抗原,與血清中抗TP抗體反應(yīng),再加入HRP標(biāo)記基因工程重組梅毒抗原與之結(jié)合,然后用TMB系統(tǒng)作用顯色。在梅毒各期均有較高的敏感性,是一種適合大規(guī)模篩查和臨床診斷的方法,而且結(jié)果和原始數(shù)據(jù)易于保存,可作為早期梅毒檢測較理想的方法,梅毒患者在治愈后相當(dāng)長的時(shí)間的時(shí)間內(nèi)梅毒抗體IgG仍可陽性。所以梅毒抗體陽性只能說明正處于感染期或曾經(jīng)感染過,不能判斷梅毒疾病活動(dòng)與否,更不能作為療效監(jiān)測手段。但ELISA法也可能出現(xiàn)拖帶現(xiàn)象、鉤狀效應(yīng)、前帶現(xiàn)象而導(dǎo)致假陽性、假陰性;另有報(bào)道,老年人也會出現(xiàn)假陽性;如果血標(biāo)本處理不完全,標(biāo)本溶血等也可能造成ELISA結(jié)果的假陽性。
梅毒螺旋體感染機(jī)體后可產(chǎn)生非特異性的類脂質(zhì)抗體,RPR是一種非特異性的血清學(xué)方法,能快速簡便測定患者血清中的反應(yīng)素,梅毒患者血清中存在著能與VDRL抗原發(fā)生凝集反應(yīng)的反應(yīng)素,將VDRL抗原吸附于活性炭顆粒表面,當(dāng)待測血清中存在反應(yīng)素時(shí)即與其發(fā)生凝集反應(yīng),出現(xiàn)肉眼可見的黑色凝塊[3]。該反應(yīng)素經(jīng)治療后滴度迅速下降,在疾病非活動(dòng)期和治療后容易消失,結(jié)果易受試驗(yàn)條件及梅毒之外疾病的影響。該方法對梅毒診斷和監(jiān)測梅毒患者療效,是否復(fù)發(fā)或再感染的判斷有非常重要意義[4]。
綜上所述,根據(jù)三種方法在臨床意義的不同,CHEMCLIN600法是梅毒篩查的理想方法,優(yōu)點(diǎn)在于敏感度高,特異性好,操作簡便,試劑成本低,線性范圍寬,結(jié)果易于保存,適合大批量篩查,已越來越廣泛的得到臨床應(yīng)用。用于評價(jià)療效可用RPR法。必須重視的是,梅毒血清學(xué)檢查僅作為患者總體臨床評估的一部分,臨床診斷必須根據(jù)患者的病史,臨床癥狀、體檢、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果及抗梅毒治療情況等進(jìn)行綜合分析,慎重作出診斷。
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編輯/蔡睿琳