妊娠期女性HPV感染基因型及臨床治療

吳艷+鄭定容

【摘要】 目的：調(diào)查分析筆者所在醫(yī)院轄區(qū)范圍內(nèi)妊娠期女性人乳頭瘤病毒（HPV）感染及基因型分布情況和特點，并探討康復(fù)新液聯(lián)合保婦康栓治療妊娠期女性HPV的臨床療效。方法：隨機(jī)選取2014年1月-2015年12月筆者所在醫(yī)院門診就診的1456例妊娠期女性患者為觀察組，觀察組中372例HPV陽性者隨機(jī)平均分為試驗組和常規(guī)組（每組186），試驗組康復(fù)新液聯(lián)合保婦康栓治療，常規(guī)組保婦康栓治療；同期隨機(jī)選取婦科門診1077例非妊娠期女性為對照組。采用21種型HPV多重PCR熒光檢測法對各組患者的子宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對各組患者的檢測結(jié)果及治療結(jié)果進(jìn)行分析比較。結(jié)果：觀察組中HPV陽性者25.5%（372/1456），其中HPV11 12.9%（188/1456），HPV16 4.1%（60/1456），HPV43 1.8%（26/1456），HPV33 1.4%（20/1456）和HPV58 1.3%（19/1456）；對照組中HPV陽性者16.4%（177/1077），其中HPV11 8.0%（86/1077），HPV16 2.6%（28/1077），HPV43 1.1%（12/1077），HPV33 0.9%（10/1077）和HPV58 0.8%（9/1077）；觀察組總HPV感染陽性率及各高危HPV亞型均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。治療后，試驗組治愈率及復(fù)發(fā)率均優(yōu)于常規(guī)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：筆者所在醫(yī)院轄區(qū)范圍內(nèi)妊娠期女性高危HPV亞型感染率比較高，且以高危型為主，可能與妊娠期女性長期處于免疫功能抑制狀態(tài)有關(guān)，康復(fù)新液聯(lián)合保婦康栓對宮頸HPV感染的治療效果優(yōu)于常規(guī)治療方法。

【關(guān)鍵詞】 人乳頭瘤病毒； 妊娠； 基因； 分析； 康復(fù)新液； 保婦康栓； 療效

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.5.008 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）05-0015-03

Infected Genotype of HPV on Pregnant Women and Its Clinical Treatment/WU Yan，ZHENG Ding-rong.//Chinese and Foreign Medical Research，2017，15（5）：15-17

【Abstract】 Objective：To investigate pregnant female human papilloma virus（HPV） infection and genotype distribution and characteristics in the scope of the jurisdiction of our hospital，and to investigate the clinical efficacy of Kangfuxin combined with Baofu Kang in the treatment of pregnant women HPV.Method：From January 2014 to December 2015 in our hospital，1456 cases outpatient of pregnant women was randomly selected as the observation group，372 cases of HPV-positive in observation group were randomly divided into the experimental group（186 cases） and the conventional group（186 cases）。The experimental group used Kangfuxin combind with Baofu Kang suppository treatment，the conventional group used Baofu Kang suppository.In the same period，1077 cases of non-pregnant women in gynecology clinic were randomly selected as the control group.Cervical exfoliated cells samples were determined using 21 kinds of HPV type fluorescent multiplex PCR assay，and the test results and treatment results of patients in each group were analyzed and compared.Result：HPV-positive was 25.5%（372/1456） in the observation group，of which HPV11 12.9%（188/1456），HPV16 4.1%（60/1456），HPV43 1.8%（26/1456），HPV33 1.4%（20/1456） and HPV58 1.3%（19/1456）；in the control group，16.4%（177/1077） were positive for HPV，of which HPV11 8.0%（86/1077），HPV16 2.6%（28/1077），HPV43 1.1%（12/1077），HPV33 0.9%（10/1077） and HPV58 0.8%（9/1077）.In the observation group，the total positive rate of HPV infection and high-risk HPV subtypes were higher than those of control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.After treatment，the cure rate and recurrence rate of the experimental group was better than the conventional group，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Shenzhen pregnant women infected with high-risk HPV subtypes is relatively high，and mainly in high-risk，pregnant women may be related to long-term state of suppressed immune function，treatment of Kangfuxin combined with Baofu Kang is better than conventional treatment.

【Key words】 Human papilloma virus； Pregnancy； Gene； Analysis； Kangfuxin； Baofu Kang； Efficacy

First-authors address：Shenzhen Baoan District Central Hospital Tiegang Community Health Service Centers，Shenzhen 518102，China

尖銳濕疣（CA）是由人乳頭瘤病毒（HPV）感染所致，HPV的持續(xù)感染是宮頸癌的主要致病因素，尤其是高危HPV的感染，宮頸癌在全球女性最常見的癌癥中居第二位[1-2]。近年來，宮頸癌的發(fā)病有年輕化趨勢；由于妊娠期為女性區(qū)別于常態(tài)的特殊時期，機(jī)體免疫抵抗力下降，高危HPV感染機(jī)會增加，并通過垂直傳播增加新生兒感染高危HPV的風(fēng)險[3]。本研究對妊娠期女性的高危HPV感染情況進(jìn)行了檢測分析，探討妊娠期女性HPV基因型分布特點，積極治療妊娠期感染高危HPV亞型的重要意義，并采用康復(fù)新液聯(lián)合保婦康栓聯(lián)合治療妊娠期感染高危HPV亞型，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2014年1月-2015年12月筆者所在醫(yī)院門診就診的1456例妊娠期女性患者為觀察組，年齡22～42歲，平均（31.1±7.7）歲，孕期6～30周，平均（12.5±5.8）周，無陰道感染，均長期居住于本市，所有受試者均無心、肝和腎等重要臟器嚴(yán)重性疾病，觀察組中372例HPV陽性者隨機(jī)平均分為試驗組和常規(guī)組（每組186）；隨機(jī)選取同期婦科門診的1077例非妊娠期女性為對照組，年齡21～42歲，平均（30.8±7.6）歲；所有研究對象均同意參與試驗，并簽署知情同意書，經(jīng)筆者所在醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。兩組患者一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 標(biāo)本采集

樣本采集之前，所有患者停止陰道用藥及沖洗等處理1周，采用陰道擴(kuò)張器或窺陰器充分暴露子宮頸，首先用無菌棉拭子將宮頸口過多的分泌物輕拭干凈，將宮頸刷伸人宮頸處，輕輕搓動宮頸刷使其順時針旋轉(zhuǎn)3～5圈，慢慢抽出宮頸刷，以便取得足夠的宮頸上皮細(xì)胞標(biāo)本，并將其放入裝有專用細(xì)胞保存液的樣本管中，旋緊試管蓋，置于4 ℃專用醫(yī)用冰箱送檢，放于-20 ℃冰箱保存待測，避免細(xì)胞樣本反復(fù)凍融。

1.3 HPV-DNA的提取及檢測

（1）HPV-DNA的提取，將宮頸刷頭充分漂洗后，把洗脫液全部轉(zhuǎn)移至1.5 ml的離心管中，臺式高速冷凍離心機(jī)（珠海黑馬TGL-16R）13 000 r/min離心15 min后，棄去上清液，保留離心管底部的細(xì)胞。隨后加入裂解液50 ml（裂解液購自德國QIAGEN公司），微孔板恒溫振蕩器（杭州奧盛儀器有限公司MB1O0-2A）充分振蕩混勻，在恒溫金屬浴箱（杭州奧盛K-30B）中100 ℃加熱10 min，臺式高速冷凍離心機(jī)立即13000 r/min離心15 min后，取中間層DNA溶液待用。（2）HPV-DNA的檢測采用基因擴(kuò)增技術(shù)及導(dǎo)流雜交原理，儀器為PCR擴(kuò)增儀（PE Applied Bio systems Genome PCR System 9600）和HybriMax核酸分子快速雜交儀，HPV-DNA擴(kuò)增分型檢測試劑盒（廣東潮州凱普公司），其主要檢測的15種高危HPV型：HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66和HPV68，6種低危HPV型：HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44和HPV CP8304（81）；步驟均嚴(yán)格按照HPV-DNA分型檢測試劑盒說明書操作。

1.4 治療

常規(guī)組病例均用保婦康栓（海南碧凱藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字Z46020058）洗凈外陰部，將栓劑塞入陰道深部，或在醫(yī)生指導(dǎo)下用藥，用藥期間避免性生活，每晚1粒，重癥每天用2粒治療，1個療程7 d，治療2個療程；試驗組病例均在常規(guī)組病例治療的基礎(chǔ)上，加用康復(fù)新液（四川好醫(yī)生攀西藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字Z51021834）對陰道清洗后，再將藥液浸濕醫(yī)用紗布塞進(jìn)陰道深部，每天換藥1次，用藥期間避免性生活，1個療程7 d，治療2個療程。

1.5 療效評定標(biāo)準(zhǔn)

（1）治愈：3個月內(nèi)高危HPV亞型陰性；（2）復(fù)發(fā)：3個月內(nèi)高危HPV亞型陽性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進(jìn)行分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV陽性情況

觀察組中HPV陽性者25.5%（372/1456），其中HPV11 12.9%（188/1456），HPV16 4.1%（60/1456），HPV43 1.8%（26/1456），HPV33 1.4%（20/1456）和HPV58 1.3%（19/1456），其他高危HPV亞型4.1%；對照組中HPV陽性者16.4%（177/1077），其中HPV11 8.0%（86/1077），HPV16 2.6%（28/1077），HPV43 1.1%（12/1077），HPV33 0.9%（10/1077）和HPV58 0.8%（9/1077），其他高危HPV亞型3.0%，觀察組總HPV感染陽性率及各高危HPV亞型均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 妊娠期感染HPV療效比較

治療后，試驗組治愈率及復(fù)發(fā)率均優(yōu)于常規(guī)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

CA發(fā)生率近年來迅速增加，目前已成為僅次于淋病的性傳播疾?。⊿TD）[4]。CA是感染HPV而引起生殖器及附近皮膚黏膜鱗狀上皮的增殖性損傷[5]。HPV是一種對人黏膜和皮膚均有高度親嗜性的小分子雙鏈DNA病毒，機(jī)體的復(fù)層鱗狀上皮和黏膜鱗狀上皮均是HPV的宿主，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)HPV有200多個亞型，其中侵犯泌尿生殖系統(tǒng)的有40型以上，60%以上女性在一生的不同階段都曾經(jīng)感染過HPV，HPV感染是宮頸癌的主要致病因素之一，99%的子宮頸癌都與生殖器官感染高危型HPV有關(guān)[6-7]。HPV的主要傳播途徑是性傳播、垂直傳播及環(huán)境污染等傳播模式[8]。文獻(xiàn)[9]報道，妊娠期婦女感染性病檢出率增高。

本研究表明，妊娠期的患者總HPV感染陽性率及各高危HPV亞型均高于非妊娠期的患者，這可能與妊娠期激素的影響使陰道內(nèi)環(huán)境改變，陰道pH值下降，以上改變更適合微生物寄居，陰道菌群變化使許多陰道菌群成員可作為條件致病菌引起內(nèi)源性感染和分泌物增多有關(guān)，妊娠期女性免疫功能低下，特別是細(xì)胞介導(dǎo)的免疫功能受抑制，妊娠期盆腔的血供豐富，類固醇激素上升，體內(nèi)雌孕激素水平增加，機(jī)體的免疫力下降，陰道黏膜較孕前容易損傷，導(dǎo)致病毒和細(xì)菌的易感性上升[10]。HPV感染率最高的4種型別均為高危型的HPV11、HPV16、HPV43和HPV33，本研究發(fā)現(xiàn)這與北京、香港和臺灣地區(qū)的文獻(xiàn)報道不盡相同[11-12]。HPV感染具有明顯的異質(zhì)性，其分布也存在種族和地域差異性[13]。HPV亞型的分布在不同人群和不同地域之間存在一定差異性。另外，不健康的性生活及性行為過早發(fā)生可能會進(jìn)一步增加HPV感染率[14]。對妊娠期的女性和男性行HPV檢測，對HPV陽性的女性和男性進(jìn)行及時管理和治療，并在性事時采用安全套等措施，這樣可降低妊娠期的HPV感染率。

此次研究中，經(jīng)過康復(fù)新液聯(lián)合保婦康栓治療后，試驗組治愈率及復(fù)發(fā)率均優(yōu)于常規(guī)組?？祻?fù)新液是由美洲大鐮干燥蟲體經(jīng)過乙醇提取的藥品制劑，其有效成分為多元醇類、黏糖氨酸及肽類活性物質(zhì)，能通過刺激免疫活性細(xì)胞（ICC），包括：淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、輔佐細(xì)胞和多形核白細(xì)胞等，抗感染和釋放自由基殺滅HPV病毒，具有通利血脈，調(diào)節(jié)炎癥和組織再生，養(yǎng)陰生肌的作用，激活處于惰性的免疫細(xì)胞，改善機(jī)體的免疫狀態(tài)，恢復(fù)機(jī)體免疫功能，使宮頸所處的陰道環(huán)境不適合HPV病毒復(fù)制，能從根本上消除HPV病毒感染的內(nèi)在因素[15-16]。保婦康栓主要是由莪術(shù)油與冰片組成的一種純中藥的制劑，具有抑菌消炎、生肌排膿、防腐生肌、清熱止痛和清熱解毒的作用，保婦康栓水溶性較好[17]?？祻?fù)新液聯(lián)合保婦康栓陰道外用方法進(jìn)行治療，使康復(fù)新液及保婦康栓在陰道內(nèi)被緩慢釋放，使有效成分充滿整個陰道并滲入至黏膜皺褶部，深入到褶皺之中，藥物充分被黏膜吸收，將藥效達(dá)到最大程度，協(xié)同發(fā)揮藥物治療作用，使HPV病毒失去了生存的環(huán)境，抑制局部炎癥反應(yīng)，控制HPV病毒感染，加強(qiáng)了局部組織修復(fù)與愈合能力，治療效果明顯提高，HPV病毒復(fù)發(fā)率明顯下降。

綜上所述，筆者所在醫(yī)院轄區(qū)妊娠期女性高危HPV亞型感染率比較高，可能與妊娠期女性長期處于免疫功能抑制狀態(tài)有關(guān)，康復(fù)新液聯(lián)合保婦康栓對宮頸HPV感染的治療效果優(yōu)于常規(guī)的治療方法。

參考文獻(xiàn)

[1]李丹，張霞，曾碧冰.203例女性外陰尖銳濕疣患者宮頸HPV基因型檢測及分析[J].中國性科學(xué)，2012，21（3）：26-29.

[2] Alvarez-Salas L M，Benitez-Hess M L，DiPaolo J A.Advances in the development of ribozymes and antisense oligodeoxynu-cleotides as antiviral agents for human papillomaviruses[J].Antivir Ther，2003，8（4）：265-278.

[3]胡雪濤，雷亞平.北京市房山地區(qū)妊娠期女性人乳頭瘤病毒感染狀況及基因型分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，36（11）：1630-1631.

[4]李安信，尹銳，鐘白玉，等.人乳頭瘤病毒感染檢測及其臨床意義[J].中華試驗和臨床病毒學(xué)雜志，2006，20（2）：49-51.

[5] Matsha T，Erasmus R，Kafuko A B，et al.Human papillomavims associated with oesophageal cancer[J].J Clin Pathol，2002，55（8）：587-590.

[6]朱曉玨，耿建祥.308例宮頸瘤組織中HPV感染基因型分布的對比研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2014，35（23）：3180-3182.

[7]王玉豐，林玲，劉春雨，等.三亞地區(qū)婦女人乳頭瘤病毒感染的分子流行病學(xué)調(diào)查[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2012，27（8）：628-630.

[8] Leyb ovich M，Bissada N F，Teich S，et al.Treatment of noncarious cervical lesions by a subepithelial connective tissue graft versus a composite resin restoration[J].Int J Periodontics Restorative Dent，2014，34（5）：649-654.

[9]王鳳英，周齊，張海珍，等.1946例妊娠期與產(chǎn)后宮頸細(xì)胞學(xué)檢查異常的分析[J].中國康復(fù)理論與實踐，2005，11（8）：649-650.

[10]訾聃，楊英捷，任念.婦科門診妊娠期婦女下生殖道人乳頭狀瘤病毒感染狀況調(diào)查[J].貴州醫(yī)藥，2011，35（9）：832-834.

[11] Lin H，Ma Y Y，Moh J S，et al.High prevalence of genital human papillomavirus type 52 and 58 infection in women attending gynecologic practitioners in South Taiwan[J].Gynecol Oncol，2006，101（1）：40-45.

[12]韓品，王培昌，張?zhí)N秀，等.北京地區(qū)妊娠期女性HPV感染調(diào)查及基因型分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（20）：2763-2764.

[13]李曉嬌，盧曉佳，張群峰.上海市奉賢區(qū)人乳頭瘤病毒感染狀況及型別分布特征[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2014，35（20）：2792-2793.

[14]汪明，李雯，袁樂永，等.湖北地區(qū)宮頸疾病患者HPV基因型及其年齡分布[J].微循環(huán)學(xué)雜志，2014，24（4）：49-53.

[15]周偉，王興遠(yuǎn)，龍翔宇，等.康復(fù)新聯(lián)合自制漱口液治療口腔黏膜急性放射性損傷的效果觀察[J].臨床合理用藥，2015，8（7A）：67-68.

[16]代文潔，鄭麗麗，王馨宇.康復(fù)新液聯(lián)合西藥保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎40例[1].中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2011，19（1）：52-53.

[17]霍順璞.保婦康栓聯(lián)合堿性成纖維細(xì)胞生長因子治療宮頸柱狀上皮異位的療效觀察[J].河北醫(yī)藥，2014，18（3）：2772-2774.

（收稿日期：2016-10-18）