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      一種快捷的觀賞海棠組培苗瞬時(shí)基因沉默的方法

      2017-03-15 01:32:04
      科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào) 2016年30期
      關(guān)鍵詞:培苗昌平區(qū)海棠

      申請(qǐng)公布號(hào):CN106047920A

      申請(qǐng)公布日:2016.10.26

      申請(qǐng)人:北京農(nóng)學(xué)院

      地址:102206北京市昌平區(qū)北農(nóng)路7號(hào)

      發(fā)明人:姚允聰;田佶;宋婷婷;張杰;韓振云

      Int. Cl.:C12N15/82(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I

      摘 要:該發(fā)明公開了一種快捷的觀賞海棠組培苗瞬時(shí)基因沉默的方法,將沉默目的基因片段通過酶切連接的方式連接到TRV?GFP載體,轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌后,通過調(diào)整真空抽吸壓強(qiáng)和抽吸方式,將攜帶沉默目的基因的TRV?GFP載體侵染入觀賞海棠組培苗中;進(jìn)一步通過抗生素培養(yǎng)和手提紫外燈熒光篩選,得到觀賞海棠沉默陽性株系;沉默目的基因的觀賞海棠組培苗陽性植株在侵染7天后,進(jìn)行表型觀察和半定量PCR篩選,從而構(gòu)建完整的觀賞海棠瞬時(shí)基因沉默體系。能夠快速、高效地侵染觀賞海棠組培苗植株,并能夠方便進(jìn)行沉默陽性植株篩選,進(jìn)行基因沉默分析,改進(jìn)了木本植物瞬時(shí)表達(dá)效率低等缺陷,能夠應(yīng)用于觀賞海棠基因功能研究,為今后的觀賞海棠遺傳育種工作奠定基礎(chǔ)。

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