雪蓮培養(yǎng)物保健品制備及其功效研究

陳曉霞++楊大蘋++曹坦++蔣昌海

摘 要：雪蓮培養(yǎng)物與紅景天提取物制備膠囊形式保健品，通過小鼠模型試驗(yàn)，顯示此保健品具備抗疲勞、抗輻射功能，人體試服實(shí)驗(yàn)也顯示了具有較好的抗疲勞功效，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果為今后研究緩解體力疲勞和抗輻射等保健品方面提供了詳細(xì)資料。

關(guān)鍵詞：雪蓮培養(yǎng)物 紅景天提取物 抗疲勞 抗輻射

中圖分類號(hào)：R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2016）10（a）-0173-02

雪蓮培養(yǎng)物富含黃酮類物質(zhì)，含量高達(dá)10%以上，多酚、紫丁香甙、綠原酸、1，5-二咖啡?？崴岬乃幮Ш恳策h(yuǎn)遠(yuǎn)高于野生型天山雪蓮，是迄今為止，首個(gè)被獲批為新資源食品的細(xì)胞類產(chǎn)品。已經(jīng)被證實(shí)的功效包括：抗輻射、抗疲勞、抗炎鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化、提高骨密度、調(diào)血脂、抑菌等。紅景天具有“高原紅參”的美譽(yù)，富含紅景天苷，紅景天多糖，還含有黃酮類化合物、酚類化合物等功效物質(zhì)[1-3]。已經(jīng)被證實(shí)的功效包括：抗缺氧、抗衰老、抗輻射、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)、提高免疫力等功效。

該文針對(duì)雪蓮培養(yǎng)物與紅景天提取物制備膠囊的工藝及功效進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體臨床試驗(yàn)均證實(shí)此保健食品具備安全性，在緩解疲勞，對(duì)抗輻射上均有顯著功效[4-6]。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)材料有：雪蓮培養(yǎng)物（大連普瑞康生物技術(shù)有限公司），紅景天提取物（西藏），小鼠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 雪蓮培養(yǎng)物紅景天膠囊制備方法

膠囊制備工藝：雪蓮培養(yǎng)物與紅景天提取物膠囊制備采用膠囊的常規(guī)工藝進(jìn)行生產(chǎn)。先將雪蓮培養(yǎng)物細(xì)粉和糊精細(xì)粉混合均勻，得混合粉A；再將紅景天提取物細(xì)粉與混合粉A混合均勻，得混合粉B；最后將二氧化硅細(xì)粉與混合粉B混合均勻，得到總混合粉直接填充膠囊。

1.2.2 抗輻射小鼠實(shí)驗(yàn)方法

昆明種雌性小鼠，每組10只，隨機(jī)分組。每日給予420 mg/kg·BW（小鼠體重）受試樣品粉末，樣品用無(wú)菌水配置，每日一次，經(jīng)口給予，連續(xù)灌胃30 d后輻照動(dòng)物，輻照后仍然給予受試樣品。小鼠灌胃體積為0.1 mL/10 g·BW。設(shè)輻射模型對(duì)照組，以無(wú)菌水代替受試樣品，每日灌胃體積與實(shí)驗(yàn)組相同。白細(xì)胞數(shù)測(cè)定：對(duì)比組、實(shí)驗(yàn)組與輻射模型對(duì)照組均以同一劑量60Co-γ射線全身照射1次，照射劑量選擇3Gy。分別于照射前、照射后第14天取血20 μL，用 MEK-6318K血液分析儀進(jìn)行白細(xì)胞數(shù)測(cè)定。骨髓細(xì)胞微核率：對(duì)比組、實(shí)驗(yàn)組與輻射模型對(duì)照組均同一劑量γ射線全身照射1次，照射劑量選擇3Gy。于照射后第3天頸椎脫臼殺死動(dòng)物，鏡檢，得骨髓細(xì)胞微核率[7-8]。

1.2.3 抗疲勞小鼠實(shí)驗(yàn)

每日給予420 mg/kg·BW受試樣品粉末，樣品用無(wú)菌水配置，每日一次，稱重后經(jīng)口給予，連續(xù)灌胃30 d。小鼠灌胃體積為0.2 mL/10g·BW。設(shè)對(duì)照組，以無(wú)菌水代替受試樣品，每日灌胃體積與實(shí)驗(yàn)組相同。小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)：末次給予受試樣品30 min后，稱體質(zhì)量，每只鼠尾根部負(fù)荷5%體質(zhì)量鉛皮，置于水深（30±1）cm、水溫（25±1）℃游泳箱中游泳，不時(shí)攪動(dòng)水，使小鼠四肢保持運(yùn)動(dòng)。記錄自游泳開始至死亡時(shí)間（min）。肝糖原測(cè)定：末次給予受試樣品30 min后處死小鼠去肝臟，進(jìn)行肝糖原測(cè)定。[0118]血清尿素含量測(cè)定：末次給予受試樣品30 min后，將小鼠放入溫度30 ℃的水中不負(fù)重游泳90 min，休息60 min后，摘眼球取血，測(cè)血清尿素含量。

1.2.4 人體實(shí)驗(yàn)方法

受試者被隨機(jī)分入安慰劑組和干預(yù)組，采用雙盲的方式給予安慰劑和該保健食品，受試者每日食用2次、每次2粒，連續(xù)食用2周，食用期間以填寫食用記錄單、電話訪問及換發(fā)保健食品并回收空瓶的方式跟蹤隨訪。

在食用前和食用2周后，對(duì)受試者進(jìn)行蹬踏功率自行車耐力試驗(yàn)，蹬踏時(shí)間為10 min，設(shè)定男性為5檔的蹬踏負(fù)荷量，女性為4檔的蹬踏負(fù)荷量，測(cè)定蹬踏試運(yùn)動(dòng)前后的血乳酸值，使用Astrand—Phyming列線表推算最大耗氧量。食用2周后監(jiān)測(cè)血尿酸的情況。

1.3 觀察指標(biāo)

乳酸的測(cè)定：采指血20 μL，使用血乳酸測(cè)定儀Lactate Pro測(cè)定血乳酸值。

尿酸的測(cè)定：使用上?？菩郎锛夹g(shù)研究所提供的血清尿酸測(cè)定試劑盒。比色使用UNIC02000型&UV-2000型分光光度計(jì)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 輻射對(duì)小鼠白細(xì)胞及細(xì)胞微核率的影響

輻射對(duì)照組在輻射后白細(xì)胞數(shù)明顯降低，說(shuō)明成功建立了輻射損傷模型；而與對(duì)照組相比，對(duì)比組、實(shí)驗(yàn)組輻射后的白細(xì)胞數(shù)均有明顯提高。與對(duì)照組相比，對(duì)比組、實(shí)驗(yàn)組的骨髓細(xì)胞微核率明顯降低。

2.2 對(duì)小鼠抗疲勞效果的影響

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，對(duì)比組、實(shí)驗(yàn)組游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)，血清尿素含量降低，肝糖原含量升高；而且，與雪蓮培養(yǎng)物對(duì)比組、紅景天對(duì)比組相比，實(shí)施例3實(shí)驗(yàn)組和實(shí)施例4實(shí)驗(yàn)組更能有效延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，降低血清尿素含量，增大肝糖原含量，即抗疲勞效果更好，其中實(shí)施例4實(shí)驗(yàn)組抗疲勞效果最好。

2.3 抗疲勞人體實(shí)驗(yàn)結(jié)果

受試者食用該保健食品2周后，安慰劑組與干預(yù)組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，食用該保健食品不會(huì)明顯引起體內(nèi)尿酸代謝失衡，出現(xiàn)高尿酸血癥。受試者進(jìn)行蹬踏運(yùn)動(dòng)前后血乳酸值的差值作為運(yùn)動(dòng)負(fù)荷后血乳酸值的升高值，雖然男女性運(yùn)動(dòng)負(fù)荷量不同，但是男女性安慰劑組與干預(yù)組血乳酸值在實(shí)驗(yàn)前后升高改變值t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明，食用該保健食品可以降低受試者運(yùn)動(dòng)后血乳酸升高，增加機(jī)體的抗疲勞能力。

3 結(jié)語(yǔ)

雪蓮培養(yǎng)物、紅景天提取物復(fù)配，二者并用，可以更好地發(fā)揮緩解體力疲勞和對(duì)輻射危害的保健功能，滿足了深受這兩個(gè)健康問題困擾的消費(fèi)者的需求，節(jié)省了消費(fèi)者的經(jīng)濟(jì)支出，使其能夠擁有更健康的身體來(lái)應(yīng)對(duì)生活、工作和學(xué)習(xí)。

參考文獻(xiàn)

[1] 范文霞，張獻(xiàn)，曹坦.雪蓮培養(yǎng)物的總抗氧化能力與抗黑色素能力研究[J].生物技術(shù)世界，2014（11）：86-87.

[2] 耿欣.紅景天抗疲勞作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，

39（3）：95-97.

[3] 劉雅萍.天山雪蓮培養(yǎng)物主要功效學(xué)研究[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2010，16（10）：929-930.

[4] 王南.天山雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物體外抗骨質(zhì)疏松作用研究[D].大連理工大學(xué)，2015.

[5] 劉雅萍.雪蓮培養(yǎng)物的抗輻射抗疲勞抗氧化功能評(píng)價(jià)[D].大連理工大學(xué)，2012.

[6] 鄒曉偉.雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物成分及新型循環(huán)色譜的研究[D].大連理工大學(xué)，2014.

[7] 賈康杰，馬昆鵬，高麗華，等.雪蓮培養(yǎng)物高效液相色譜指紋圖譜研究[J].生物技術(shù)通訊，2015（5）：682-686.

[8] 郭海勇，張吉洋.雪蓮培養(yǎng)物對(duì)小鼠免疫功能的影響[J]. 生物技術(shù)世界，2015（8）：152-153.

[9] 張獻(xiàn)，楊大蘋，劉雅萍.雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物調(diào)節(jié)血脂方面的研究[J].科技致富向?qū)В?015（15）：186.

[10] 賈麗華，郭雄飛，賈曉光，魏鴻雁.天山雪蓮的開發(fā)與應(yīng)用[J].新疆中醫(yī)藥，2016（1）：126-128.