藥用輔料苯甲醇新版藥典微生物限度檢查適用性實(shí)驗(yàn)

易巧　劉緒平　張銀花

【摘要】 目的：建立苯甲醇微生物限度檢查法并進(jìn)行方法適用性實(shí)驗(yàn)。方法：按《中國(guó)藥典》2015年版四部制劑通則1105、1106、1107項(xiàng)下要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。需氧菌總數(shù)檢查、霉菌和酵母菌總數(shù)檢查和控制菌檢查均采用薄膜過濾法，采用上述方法對(duì)苯甲醇藥用輔料各實(shí)驗(yàn)菌進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，并對(duì)控制菌檢查方法進(jìn)行適用性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中各菌的回收比值均符合《中國(guó)藥典》2015年版規(guī)定，控制菌檢查方法可行。結(jié)論：該方法適用于苯甲醇輔料的微生物限度檢查。

【關(guān)鍵詞】 苯甲醇輔料； 微生物限度； 薄膜過濾法； 方法學(xué)驗(yàn)證

【Abstract】 Objective：To establish a method of microbial limit test for pharmaceutical excipient benzyl alcohol and make a applicability test for this method.Method：The test method was carried out according to the raw material and pharmaceutical excipients requirements in volume Ⅳ of Chinese Pharmacopoeia 2015.The membrane filtration method was applied to the tests for total viable aerobic count，total combined yeasts and molds count detection and specified bacteria.The bacteria，fungi or yeasts count method for microbial limit test was validated as described above for each of the microorganism tested.And the method for specified bacteria test was also validated.Result：The results showed that the recovery ratios of all the tested strains were in accordance with the acceptance criteria of the pharmacopoeia and the method for specified bacteria test was reliable.Conclusion：The method is suitable for the microbial limit test of pharmaceutical excipient benzyl alcohol.

【Key words】 Pharmaceutical excipient benzyl alcohol； Microbial limit test； Membrane filtration method； Method validation

First-authors address：Jiangxi Institute for Drug Control，Nanchang 330029，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.04.013

微生物檢查作為藥品安全的重要指標(biāo)，其標(biāo)準(zhǔn)制定也隨著藥品產(chǎn)業(yè)的發(fā)展及對(duì)藥品質(zhì)量高要求的需求而不斷提高。2015年版《中國(guó)藥典》對(duì)微生物限度檢查法做了較大的修訂，新版藥典將2010年版藥典附錄中的Ⅺ J微生物限度檢查法拆分為三個(gè)部分，分別為微生物計(jì)數(shù)法、控制菌檢查法和微生物限度標(biāo)準(zhǔn)[1]。其中檢驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)菌液、檢驗(yàn)方法、培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度等都做了不同程度的更改。新版藥典更加關(guān)注生產(chǎn)過程中的微生物控制，在藥品生產(chǎn)、儲(chǔ)藏和流通各個(gè)環(huán)節(jié)中，藥品生產(chǎn)企業(yè)均應(yīng)嚴(yán)格遵循GMP的指導(dǎo)原則。制劑、原料及輔料、中藥提取物及中藥飲片的微生物限度與2010年版《中國(guó)藥典》比較給出了具體的限度標(biāo)準(zhǔn)。本文按照2015年版《中國(guó)藥典》的操作要求及指導(dǎo)原則，對(duì)苯甲醇藥用輔料微生物限度檢查法進(jìn)行研究及適用性實(shí)驗(yàn)，以確定出適宜、有效的檢查方法[2]。苯甲醇也稱芐醇，英文名Benzyl alcohol，是最簡(jiǎn)單的含有苯基的脂肪醇，苯甲醇為無顏色透明液體，有微弱的芳香氣味，稍溶于水，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑[3-4]。苯甲醇用途廣泛，主要應(yīng)用于環(huán)氧樹脂及涂料領(lǐng)域，也廣泛應(yīng)用于日化、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。近年來隨著相關(guān)行業(yè)的發(fā)展，國(guó)內(nèi)外對(duì)苯甲醇的需求量不斷增加，2011年醫(yī)藥領(lǐng)域苯甲醇的消費(fèi)量約為1200 t。由于其具有麻醉、鎮(zhèn)痛的功效，苯甲醇在制劑中用作防腐劑和局部止痛劑，但因不良反應(yīng)較大，嬰兒使用時(shí)有過致死案例，目前主要用作防腐劑。

1 儀器與材料

1.1 儀器 BKQP-50L型高壓蒸汽滅菌器（濟(jì)南博鑫生物技術(shù)有限公司）；M1-211A微波爐（美的集團(tuán)有限公司）；XP-S電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；SW-CJ-2D凈化工作臺(tái)（蘇州凈化有限公司）；Heal Force-900C 生物安全柜（上海力申科學(xué)儀器有限公司）；HWS-250恒溫恒濕實(shí)驗(yàn)箱（天津市萊玻特瑞儀器設(shè)備有限公司）；3758CN低溫培養(yǎng)箱（賽默飛世爾科技中國(guó)有限公司）；HH.S21-6電熱恒溫水浴鍋（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）；ZW-2008智能集菌儀（溫州維科生物實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；薄膜過濾器（浙江泰林生物技術(shù)股份有限公司）。

1.2 主要試劑 苯甲醇，批號(hào)：20151201、20151202、20151203三個(gè)批次，由江西阿爾法高科藥業(yè)有限公司提供；培養(yǎng)基有：胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，批號(hào)160119；胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)160128；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)160119；沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基，批號(hào)151222；腸道菌增菌液體培養(yǎng)基，批號(hào)：160203；紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)160614；麥康凱液體培養(yǎng)基，批號(hào)160511；麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)160511；甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)151124；溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)151102，以上培養(yǎng)基均來源于北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司。實(shí)驗(yàn)菌種有：枯草芽孢桿菌[CMCC（B） 63501]、金黃色葡萄球菌[CMCC（B） 26003]、銅綠假單胞菌[CMCC（B） 10104]、大腸埃希菌[CMCC（B） 44102]、白色念珠菌[CMCC（F） 98001]、黑曲霉[CMCC（F） 98003]，以上菌種均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.3 驗(yàn)證方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)菌株菌液制備 將金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置35 ℃培養(yǎng)24 h，分別取以上新鮮培養(yǎng)物各1 mL，用0.9%無菌氯化鈉溶液10倍稀釋至10-3～10-7，做活菌計(jì)數(shù)備用。將白色念珠菌的沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基置25 ℃培養(yǎng)2 d，取新鮮培養(yǎng)物1 mL，用0.9%無菌氯化鈉溶液10倍稀釋至10-2～10-4，做活菌計(jì)數(shù)備用。將黑曲霉的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基置25 ℃培養(yǎng)7 d，加5 mL 0.9%無菌氯化鈉溶液將黑曲霉孢子洗脫，吸取出孢子懸液1 mL，用0.9%無菌氯化鈉溶液適量稀釋，用標(biāo)準(zhǔn)比濁管比濁，其濁度與標(biāo)準(zhǔn)比濁管相比后，取1 mL稀釋后的孢子懸液，用0.9%無菌氯化鈉溶液10倍稀釋至10-2～10-4，做活菌計(jì)數(shù)備用。

1.3.2 供試液制備 取供試品10 mL，置無菌錐形瓶中，用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液稀釋至100 mL，混勻，作為1∶10供試液，備用。

1.3.3 細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)計(jì)數(shù)適用性實(shí)驗(yàn)

1.3.3.1 實(shí)驗(yàn)組 （1）需氧菌計(jì)數(shù)：取上述1∶10供試液1 mL，置薄膜過濾器中，采用薄膜過濾法，每筒用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液300 mL分3次沖洗，在最后一次沖洗液中加入不大于100 cfu的實(shí)驗(yàn)菌（金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、黑曲霉），濾干，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂平板上，實(shí)驗(yàn)平板置35 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌培養(yǎng)3 d，白色念珠菌、黑曲霉分別培養(yǎng)5 d，逐日觀察平板生長(zhǎng)情況。（2）霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)：取上述供試液10 mL，置薄膜過濾器中，采用薄膜過濾法，每筒用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液300 mL分3次沖洗，在最后一次沖洗液中加入不大于100 cfu的實(shí)驗(yàn)菌（白色念珠菌、黑曲霉），濾干，轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂平板上，實(shí)驗(yàn)平板置25 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)5 d，逐日觀察平板生長(zhǎng)情況。

1.3.3.2 供試品對(duì)照組 取上述1：10供試液，以稀釋液代替菌液，同實(shí)驗(yàn)組操作，測(cè)定供試品本底菌落數(shù)。

1.3.3.3 菌液對(duì)照組 取相應(yīng)稀釋液替代供試液，同實(shí)驗(yàn)組操作加入實(shí)驗(yàn)菌液并進(jìn)行微生物回收實(shí)驗(yàn)。

1.3.3.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) 計(jì)數(shù)方法適用性實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組菌落數(shù)減去供試品對(duì)照組菌落數(shù)的值與菌液對(duì)照組菌落數(shù)的比值應(yīng)在0.5～2范圍內(nèi)。

1.3.4 控制菌檢查方法的適用性實(shí)驗(yàn)

1.3.4.1 金黃色葡萄球菌檢查 實(shí)驗(yàn)組：取上述1∶10供試液10 mL，置薄膜過濾器中，采用薄膜過濾，用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液300 mL分3次沖洗，加入不大于100 cfu金黃色葡萄球菌實(shí)驗(yàn)菌（將實(shí)驗(yàn)菌加入最后一次沖洗液中），取膜置于100 mL胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，35 ℃培養(yǎng)24 h，取上述培養(yǎng)物劃線接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上，35 ℃培養(yǎng)72 h，觀察平板生長(zhǎng)情況。陰性對(duì)照組：取稀釋液10 mL替代1∶10供試液，照金黃色葡萄球菌檢查法操作。

1.3.4.2 銅綠假單胞菌檢查法 實(shí)驗(yàn)組：取上述1∶10供試液10 mL，置薄膜過濾器中，采用薄膜過濾，用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液300 mL分3次沖洗，加入不大于100 cfu銅綠假單胞菌實(shí)驗(yàn)菌（將實(shí)驗(yàn)菌加入最后一次沖洗液中），取膜置于100 mL胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，35 ℃培養(yǎng)24 h，取上述培養(yǎng)物劃線接種于溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基平板上，35 ℃培養(yǎng)72 h，觀察平板生長(zhǎng)情況。陰性對(duì)照組：取稀釋液10 mL替代1∶10供試液，照銅綠假單胞菌檢查法操作。

1.3.4.3 大腸埃希菌檢查法 實(shí)驗(yàn)組：取上述1∶10供試液10 mL，置薄膜過濾器中，采用薄膜過濾法，每筒用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液300 mL分3次沖洗，濾干，取膜置于100 mL胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，同時(shí)加入不大于100 cfu的大腸埃希菌液，35 ℃培養(yǎng)24 h，取上述培養(yǎng)物1 mL接種至100 mL麥康凱液體培養(yǎng)基中，42 ℃培養(yǎng)24 h。取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂平板上，35 ℃培養(yǎng)48 h。取麥康凱瓊脂平板上菌落劃線接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板進(jìn)行分離純化，經(jīng)純化后的培養(yǎng)物，接種至含5 mL MUG培養(yǎng)基的試管內(nèi)，培養(yǎng)，于5、24 h在366 nm紫外線下觀察，同時(shí)用未接種的MUG培養(yǎng)基作本底對(duì)照。觀察后，沿管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，觀察MUG培養(yǎng)基顏色變化。陰性對(duì)照組：取稀釋液10 mL替代1∶10供試液，照大腸埃希菌檢查法操作。

1.3.4.4 耐膽鹽革蘭陰性菌檢查法 實(shí)驗(yàn)組：將上述1：10供試液置于25 ℃預(yù)培養(yǎng)2 h。取上述預(yù)培養(yǎng)供試液10 mL（2份），置薄膜過濾器中，采用薄膜過濾法，每筒用pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液300 mL分3次沖洗，分別加入不大于100 cfu的大腸埃希菌液和不大于100 cfu的銅綠假單胞菌液（將實(shí)驗(yàn)菌液加入最后一次沖洗液中），取膜置于100 mL腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，35 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后，上述培養(yǎng)物劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂平板上，置35 ℃培養(yǎng)24 h，觀察平板生長(zhǎng)情況。若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂平板上有菌落生長(zhǎng)，代表檢出耐膽鹽革蘭陰性菌。陰性對(duì)照組：取稀釋液10 mL替代1∶10供試液，照耐膽鹽革蘭陰性菌檢查法操作。

2 結(jié)果

2.1 需氧菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)論 在三次獨(dú)立的需氧菌計(jì)數(shù)方法適用性實(shí)驗(yàn)中，5種菌株的回收比值均在0.5～2.0范圍內(nèi)，符合藥典規(guī)定。因此可照此方法測(cè)定苯甲醇的需氧菌總數(shù)。在三次獨(dú)立的霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)方法適用性實(shí)驗(yàn)中，白色念珠菌和黑曲霉的回收比值均在0.5～2.0范圍內(nèi)，符合藥典規(guī)定。因此可照此方法測(cè)定苯甲醇的霉菌和酵母菌總數(shù)。見表1。

2.2 控制菌檢查方法學(xué)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)論 在進(jìn)行金黃色葡萄球菌檢查、銅綠假單胞菌檢查、大腸埃希菌檢查和耐膽鹽革蘭陰性菌檢查四種控制菌的適用性實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組均檢出陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)菌，陰性對(duì)照組無菌生長(zhǎng)。因此，可照此方法進(jìn)行苯甲醇的控制菌檢查。見表2～5。

3 討論

與2010年版藥典相比，2015年版藥典在微生物控制方面做了很大幅度的改變。新版藥典將“方法驗(yàn)證”改為了“方法適用性”，適用性是把實(shí)驗(yàn)條件、供試品等因素作為一個(gè)整體來評(píng)價(jià)，更為完整科學(xué)。新版藥典中的培養(yǎng)體系也有變化，首先是培養(yǎng)基的改變，需氧菌計(jì)數(shù)所使用的培養(yǎng)基為胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基[5-9]，霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)使用沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。培養(yǎng)溫度也做出了適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，需氧菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)溫度由35～37 ℃調(diào)整為30～35 ℃，霉菌和酵母計(jì)數(shù)培養(yǎng)溫度由25～28 ℃變?yōu)?0～25 ℃。測(cè)試菌株也發(fā)生了改變，采用金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和銅綠假單胞菌三株菌進(jìn)行方法適用性實(shí)驗(yàn)，其中銅綠假單胞菌替換了2010版藥典中的大腸埃希菌。而且需氧菌計(jì)數(shù)的適用性實(shí)驗(yàn)中，需要使用5種菌株，相較于2010版藥典的3菌株增加了白色念珠菌和黑曲霉[10-11]。此外，計(jì)數(shù)回收方法中增加了新的檢測(cè)方法-MPN法，可作為平板計(jì)數(shù)法和薄膜過濾法不適用時(shí)的補(bǔ)充。

控制菌檢查方面，新版藥典控制菌檢查法除梭菌和白色念珠菌外，其余檢查指標(biāo)在預(yù)培養(yǎng)和增菌培養(yǎng)這一步驟中都統(tǒng)一使用了胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，大大方便了實(shí)驗(yàn)操作。新版藥典新增了耐膽鹽革蘭陰性菌的檢查，替代了《中國(guó)藥典》2010年版的大腸菌群的檢查。在各控制菌項(xiàng)下，生化實(shí)驗(yàn)和“應(yīng)進(jìn)行分離、純化及適宜的鑒定實(shí)驗(yàn)”改為“采用其他適宜方法進(jìn)一步鑒定”，檢測(cè)方法更加靈活多變，實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自身情況靈活選擇適宜的方法，調(diào)高檢驗(yàn)效率和結(jié)果可靠性[12-14]。

藥用輔料是藥品重要的組成部分，它們的質(zhì)量關(guān)系到所有藥品的安全性[15-16]。與原版藥典相比，2015年版藥典對(duì)原料及輔料的微生物限度控制更加嚴(yán)格規(guī)范[17-18]?！吨袊?guó)藥典》2010年版附錄ⅪJ微生物限度檢查法中對(duì)“原料及輔料”的微生物限度的描述為“參照相應(yīng)制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行”[19]。而《中國(guó)藥典》2015年版四部1107非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)中，第5點(diǎn)明確規(guī)定了“非無菌藥用原料及輔料的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)”[20]。其中，需氧菌總數(shù)限度為103 cfu/g或cfu/mL，霉菌和酵母菌總數(shù)限度為102 cfu/g或cfu/mL?？刂凭醋鼋y(tǒng)一規(guī)定，需要根據(jù)原輔料及其制劑的特性和用途、制劑的生產(chǎn)工藝等因素檢查具有潛在危害的微生物[17-18]。由于苯甲醇為藥用輔料，考慮在醫(yī)藥領(lǐng)域中苯甲醇主要作為防腐劑、局部止痛及藥物溶劑作用，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)控制菌檢查大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌和耐膽鹽革蘭陰性菌檢查。

苯甲醇作為防腐劑廣泛應(yīng)用于藥品制劑中，為更好的控制本產(chǎn)品的質(zhì)量，本研究建立了其微生物檢查方法，并對(duì)方法適用性進(jìn)行了研究。由于苯甲醇作為防腐劑具有一定的抗菌作用，采用平皿法進(jìn)行需氧菌總數(shù)計(jì)數(shù)適用性實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)本品對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株具有較強(qiáng)的抑制能力，回收率比值達(dá)不到要求。為消除苯甲醇的抑菌干擾，本文采用薄膜過濾法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)檢查和控制菌檢查，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)性，從而保證臨床用藥安全有效。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（四部）[S].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：140-153.

[2]孫占松.國(guó)內(nèi)苯甲醇生產(chǎn)及應(yīng)用分析[J].精細(xì)與專用化學(xué)品，2012，20（12）：12-14.

[3]呂秋軍，曹萍.藥用輔料的不良反應(yīng)及其安全性管理[J].藥物不良反應(yīng)雜志，2010，12（6）：410-414.

[4]廖彬，劉雁鳴，龍海燕，等.氣相色譜法測(cè)定藥用輔料苯甲醇的有關(guān)物質(zhì)[J].中國(guó)藥師，2015，18（8）：1315-1319.

[5]楊曉莉，李輝，馬英英，等.《中國(guó)藥典》2015年版非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法解讀與對(duì)策[J].中國(guó)藥師，2016，19（4）：748-752.

[6]楊曉莉，李輝，馬英英，等.中國(guó)藥典2015年版非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法解讀[J].藥物分析雜志，2016，36（6）：1101-1107.

[7]馮震，范一靈，楊美成.《中華人民共和國(guó)藥典（2015年版）》（四部）中微生物檢驗(yàn)相關(guān)通則的增、修訂情況介紹[J].上海醫(yī)藥，2016，37（7）：11-15.

[8]唐菱，侯曉軍，周劍，等.硫酸新霉素凝膠微生物限度檢查方法的適用性試驗(yàn)[J].中國(guó)抗生素雜志，2016，41（9）：680-683.

[9]吳朝陽(yáng).淺談注射劑中抑菌劑引起的不良反應(yīng)[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)工程，2012，20（3）：180.

[10]姚靜.藥用輔料應(yīng)用指南[S].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2011：157-159.

[11]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）[S].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄107-116.

[12] The United States Pharmacopoeial Convention.United States Pharmacopoeia35th Edition （USP35） and National Formulary30th Edition（NF30）[S].The United States by United Book Press，Inc，Baltimore，MD，2012：1713-1715.

[13] The Council of Europe and Council DE L Euerope.European Pharmacopoeia7th Edition（EP7.0）[S].Acid-free paper by Druckerei C.H.Beck，Nordlingen，2011：1469-1470.

[14] Japanese Pharmacopoeial committee.Japanese Pharmacopoeia16th Edition（JP16）[S].The Minister of Health，Labor and Welfare，2011：432-433.

[15]羅明生，高天蕙.藥劑輔料大全（第二版）[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2006：1088-1089.

[16]周國(guó)斌.中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)（操作規(guī)程）[S].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄310-325.

[17]宋永熙，趙煒鐳.注射用添加劑引起藥物不良反應(yīng)事件原因與對(duì)策[J].藥事管理，2010，45（5）：396-398.

[18]李雪.藥品在微生物限度檢驗(yàn)中的誤差影響因素[J].藥物研究，2016，11（3）：12-14.

[19]張海燕，鄔偉魁，宋民憲，等.《中國(guó)藥典》2010年版藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)探討[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（11）：289-291.

[20]孫會(huì)敏，楊銳，張朝陽(yáng)，等.2015年版《中國(guó)藥典》提升藥用輔料科學(xué)標(biāo)準(zhǔn)體系強(qiáng)化我國(guó)藥品質(zhì)量[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2015，50（15）：1353-1358.

（收稿日期：2016-12-30） （本文編輯：周亞杰）