薄層色譜一標(biāo)多測方法在小兒咳喘靈顆粒中的應(yīng)用

崔宇宏1，王 玳1，任建平

(1.山西省食品藥品檢驗(yàn)所，山西 太原 030001；2.山西職工醫(yī)學(xué)院，山西 太原 030012)

小兒咳喘靈顆粒具有宣肺、清熱、止咳功效，用于上呼吸道感染，氣管炎，肺炎，咳嗽等。收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第四冊，處方中有麻黃、板藍(lán)根、苦杏仁、金銀花、甘草、瓜蔞、石膏7味藥材，原標(biāo)準(zhǔn)鑒別項(xiàng)只收載2個(gè)理化鑒別，包括1個(gè)試管顏色反應(yīng)及1個(gè)泡沫反應(yīng)，未能完全控制成藥質(zhì)量。為了提高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，控制成藥質(zhì)量，并提高實(shí)驗(yàn)效率，達(dá)到省時(shí)省力的效果，采用薄層鑒別一標(biāo)多測方法，可在一個(gè)薄層色譜條件下盡可能地鑒別多味藥材。本實(shí)驗(yàn)使用一個(gè)供試品溶液、兩種展開系統(tǒng)，鑒別了方中板藍(lán)根、苦杏仁、金銀花、及甘草4味藥材。板藍(lán)根、苦杏仁為一個(gè)色譜條件；金銀花、甘草為另一個(gè)色譜條件。麻黃主含生物堿成分，未能與上述4味藥材鑒別合并。

1 試藥及試劑

對照藥材及對照品：麻黃堿(714-8501)、板藍(lán)根(121177-200302)、苦杏仁(121554-200601)、R，S告伊春(111753-201304)、金銀花(110718-200507)、甘草(121303-200502)、綠原酸(110753-200413)、苦杏仁苷(820-9401)、鹽酸麻黃堿(714-8501)均購自中國藥品生物制品檢定所。

樣品：多個(gè)企業(yè)生產(chǎn)樣品。

試劑：硅膠G預(yù)制板(青島海洋化工廠，merck板)，其余均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)與結(jié)果

2.1 苦杏仁和板藍(lán)根薄層鑒別

采用同一供試品溶液、以苦杏仁對照藥材及板藍(lán)根特征成分R，S告伊春為對照，在同一塊薄層板上同時(shí)鑒別2味藥材。

2.1.1 供試品溶液的制備 處方中藥材均經(jīng)過水煎，故選擇水飽和正丁醇超聲處理提取藥材中的成分。取本品8 g，研細(xì)，加水飽和正丁醇60 mL，超聲處理40 min，濾過，取濾液20 mL備用，其余濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對照藥材及其對照品溶液的制備 取苦杏仁對照藥材各1 g，分別加水100 mL，煎煮30 min，放冷，濾過，濾液用水飽和正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為對照藥材溶液。再取R，S告伊春對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.1.3 陰性對照品溶液的制備(所用藥材由生產(chǎn)單位提供) 分別取處方中各藥味(除板藍(lán)根、苦杏仁)1/100處方量，模擬“制法”，按供試品溶液的制備方法，分別制備缺板藍(lán)根、苦杏仁的對照溶液。

供試品色譜具有苦杏仁對照藥材及R，S告伊春對照品的特征斑點(diǎn)，陰性對照無干擾，重復(fù)性、耐用性均符合要求。見圖1，2。

圖1 苦杏仁薄層鑒別

圖2 板藍(lán)根薄層鑒別1缺苦杏仁陰性 2苦杏仁對照藥材 3供試品溶液 4供試品溶液 5供試品溶液 6告伊春對照品 7缺板藍(lán)根陰性 8供試品溶液

2.2 甘草、金銀花的薄層鑒別

將處方中甘草、金銀花的薄層鑒別合并，以一塊薄層板、一種展開系統(tǒng)，同時(shí)鑒別甘草、金銀花兩種藥材。

2.2.1 供試品溶液的制備 取苦杏仁鑒別項(xiàng)下的供試品溶液。

2.2.2 對照藥材及其對照品溶液的制備 取甘草對照藥材及金銀花對照藥材各0.5 g，加水100 mL，煎煮30 min，放冷，濾過，濾液用水飽和正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為對照藥材溶液。再取綠原酸對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.3 陰性對照品溶液的制備(所用藥材由生產(chǎn)單位提供) 分別取處方中各藥味(除甘草、金銀花)1/100處方量，模擬“制法”，分別制備缺甘草、金銀花的對照溶液,按供試品溶液的制備方法制備，即得。

供試品色譜具有甘草對照藥材、金銀花對照藥材及綠原酸對照品的特征斑點(diǎn)，陰性對照無干擾，重復(fù)性、耐用性均符合要求。見圖3，4。

圖3 金銀花鑒別

圖4 甘草鑒別1供試品溶液 2缺甘草陰性液 3供試品溶液 4供試品溶液 5缺金銀花陰性液 6供試品溶液 7供試品溶液 8甘草對照藥材 9供試品溶液 10供試品溶液 11綠原酸對照品 12供試品溶液 13供試品溶液 14金銀花對照藥材

2.3 麻黃薄層鑒別

麻黃主含生物堿，未能與上述薄層合并。

2.3.1 供試品溶液的制備 根據(jù)麻黃藥材中麻黃堿有效成分的性質(zhì)，堿化后用有機(jī)溶劑萃取，濃縮后作為供試品溶液，經(jīng)驗(yàn)證方法簡單易行、提取速度快，效率高。取本品3 g，加水20 mL使溶解，加氨試液使成堿性，再加氯仿15 mL振搖提取，分取氯仿液，濃縮至約1 mL，作為供試品溶液。

2.3.2 對照品溶液的制備 取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.3.3 陰性對照品溶液的制備(所用藥材由生產(chǎn)單位提供) 分別取處方中各藥味(除麻黃)1/30處方量，模擬制劑工藝, 并按供試品溶液的制備方法，制備缺麻黃的陰性溶液。

圖5 麻黃的薄層鑒別1供試品溶液 2供試品溶液 3供試品溶液 4供試品溶液 5供試品溶液 6麻黃堿對照品 7麻黃堿對照品 8缺麻黃陰性液

3 討論

為了控制中成藥的質(zhì)量， 薄層色譜是最主要的鑒別方法，但中成藥處方通常藥味較多，需建立多個(gè)薄層色譜條件與方法，以鑒別不同的藥材，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。薄層鑒別的一標(biāo)多測方法，即采用一個(gè)供試品溶液、一種色譜條件下鑒別多味藥材的方法，已成為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的趨勢。

將處方中板藍(lán)根、苦杏仁2味藥材的薄層鑒別合并，金銀花、甘草2味藥材的薄層鑒別合并。本研究建立了使用3塊薄層板鑒別處方中5味藥材的方法。

供試品溶液的制備，中藥材的提取方法通常比較復(fù)雜，提取步驟繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。不同的藥材采用同一供試品溶液將會(huì)大大提高效率。小兒咳喘靈顆粒中的藥材均經(jīng)過水煎煮，故采用水飽和正丁醇作為提取溶劑以提取制劑中的水溶性成分，苦杏仁、板藍(lán)根、甘草、金銀花的供試品溶液均采用同一個(gè)供試品溶液。

展開劑與顯色劑的選擇，金銀花和甘草的鑒別，首先參考藥典甘草項(xiàng)下的展開劑展開后[1]，在UV(365 nm)下檢視，發(fā)現(xiàn)金銀花和綠原酸斑點(diǎn)清晰，再噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰后，觀察甘草的斑點(diǎn)?？嘈尤屎桶逅{(lán)根的鑒別，首先參考藥典苦杏仁與板藍(lán)根[1]的鑒別方法，均未成功，經(jīng)過多次摸索，在UV365 nm下觀察到苦杏仁的熒光斑點(diǎn)，再置碘蒸氣中熏觀察板藍(lán)根中特征成分R，S告伊春的斑點(diǎn)。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(2015年版一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.