卷丹百合不同發(fā)育期鱗莖中四種活性物質(zhì)含量的變化

陳越++趙春莉++李鳳飛++郭太君

摘要：以生長(zhǎng)期的卷丹百合（Lilium. lancifolium Thunb）鱗莖為試驗(yàn)材料，分別在植株生長(zhǎng)的現(xiàn)蕾期、綠蕾期、紅蕾期I、紅蕾期II、紅蕾期、開(kāi)花期、枯萎期和鱗莖收獲期取樣，研究多糖、總皂苷、酚類和生物堿含量的變化規(guī)律。結(jié)果表明，上述4種活性物質(zhì)在鱗莖中的積累表現(xiàn)出相似的變化規(guī)律，即4種化學(xué)物質(zhì)的含量從現(xiàn)蕾期至鱗莖收獲期，均有兩個(gè)高峰和兩個(gè)低峰的積累時(shí)期；其中最大峰值呈現(xiàn)的時(shí)期因測(cè)定的物質(zhì)不同而不同，相對(duì)較小的高峰值均出現(xiàn)在鱗莖收獲期；低峰出現(xiàn)的時(shí)期為現(xiàn)蕾期和開(kāi)花期。最大峰值與相對(duì)較小峰值比較，除多糖含量達(dá)到顯著差異外，其他3種活性物質(zhì)的含量差異不明顯。

關(guān)鍵詞：卷丹百合（Lilium. lancifolium Thunb）；鱗莖；活性物質(zhì)

中圖分類號(hào)：S688.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）01-0080-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.01.020

The Four Bioactive Substances Content Change of Lilium. lancifolium Thunb Bulbus in Different Growth Period

CHEN Yue，ZHAO Chun-li，LI Feng-fei，GUO Tai-jun

（College of Horticulture， Jilin Agricultural Unversity， Changchun 130118， China）

Abstract：Taking the bulbus of Lilium. lancifolium Thunb as test materials， the contents of polysaccharides， total saponins， phenolic compounds and total alkaloid was determined during eight growth periods of plants. The results showed that， the accumulation of four bioactive substances in bulbus presented the same change rule， that is， from squaring stage to bulb harvest， the accumulation of four bioactive substances all had two top and bottom periods. The most top period is different in every bioactive substances， and the second top appeared in the period of bulb harvest. The bottom periods were the growing and flowering periods. The top are the similar to the bottom in total saponins， phenolic compounds and total alkaloid， except in polysaccharides.

Key words： Lilium. lancifolium Thunb； bulb； bioactive substance

卷丹百合（Lilium.lancifolium Thunb）是百合科百合屬植物，是重要的觀賞花卉，其鱗莖可食用和藥用，亦是《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定入藥的三種百合之一[1-3]。目前，有關(guān)百合的藥用成分研究中，主要包括多糖、皂苷、多酚、生物堿等重要藥用化學(xué)成分的提取工藝及分離純化[4-7]，而植株發(fā)育不同時(shí)期鱗莖中活性物質(zhì)動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的研究，在國(guó)內(nèi)除李紅娟等[8]報(bào)道了不同栽培條件下鱗莖活性物質(zhì)的變化特點(diǎn)外，尚鮮見(jiàn)報(bào)道。為此，試驗(yàn)選擇卷丹百合植株生長(zhǎng)發(fā)育不同時(shí)期鱗莖，進(jìn)行了多糖、皂苷、多酚、生物堿共4種重要活性物質(zhì)含量的測(cè)定，旨在為合理利用卷丹百合的鱗莖提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料取自吉林伊通滿族自治縣百合產(chǎn)業(yè)基地的卷丹百合，栽培采用大田直播的栽培方式，使其常年開(kāi)放。

試驗(yàn)中按下述植株生長(zhǎng)發(fā)育各時(shí)期的特征，取鮮嫩鱗莖，烘干，打粉，過(guò)40目篩，備用。

1）現(xiàn)蕾期。植株花蕾出現(xiàn)的時(shí)期，時(shí)間為2015年7月2日。

2）綠蕾期。植株出現(xiàn)大部分綠蕾的時(shí)期，時(shí)間為2015年7月13日。

3）紅蕾期I。植株少部分花蕾出現(xiàn)微紅，花蕾手感堅(jiān)實(shí)，時(shí)間為2015年7月25日。

4）紅蕾期II。植株大部分花蕾出現(xiàn)微紅，花瓣尚未開(kāi)裂，時(shí)間為2015年7月30日。

5）紅蕾期。植株花蕾全部呈現(xiàn)紅色，花蕾手感蓬松，花瓣略微開(kāi)裂但尚未展開(kāi)，時(shí)間為2015年8月6日。

6）開(kāi)花期。植株花瓣開(kāi)展，達(dá)到其花冠的典型特征，時(shí)間為2015年8月15日。

7）枯萎期。植株部分葉片枯萎，蒴果顏色呈深褐色，尚未開(kāi)裂，時(shí)間為2015年9月4日。

8）收獲期。植株葉片全部枯萎，蒴果開(kāi)裂，開(kāi)始收獲鱗莖，時(shí)間為2015年9月29日。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 多糖含量的測(cè)定 采用超聲波沉淀法測(cè)定[9]。取上述備用樣品1 g溶于5 mL蒸餾水中，超聲2 h，8 000 r/min離心10 min，取其上清液，之后加入無(wú)水乙醇，使醇濃度達(dá)到90%，4 ℃靜置過(guò)夜，10 000 r/min離心10 min，取沉淀溶于10 mL的水中，加入氯仿∶正丁醇=5∶1，10 000 r/min離心10 min，上清液稀釋100倍后，取2 mL再加入5%苯酚1.0 mL、濃硫酸5 mL，搖勻，沸水浴20 min，靜置10 min。在490 nm處測(cè)定吸光度，以葡萄糖為對(duì)照品，根據(jù)吸光值進(jìn)行含量的測(cè)定。

1.2.2 總皂苷含量的測(cè)定 按文獻(xiàn)[10]進(jìn)行。以薯蕷皂苷為對(duì)照品，根據(jù)甾體皂苷類化合物的香草醛-高氯酸顯色反應(yīng)，用分光光度法在535 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品中總皂苷的含量。

1.2.3 總酚含量的測(cè)定 按文獻(xiàn)[11]進(jìn)行。以沒(méi)食子酸為對(duì)照品，通過(guò)總酚類化合物的Folin-Cioealteu比色法（FC法），用分光光度法在760 nm處測(cè)得其吸光度計(jì)算總酚含量。

1.2.4 總生物堿的測(cè)定 稱取樣品百合2 g與30 mL鹽酸（0.01 mol/L）超聲提取2 h，5 000 r/min離心10 min后取上清液，調(diào)pH到12～13（40% NaOH），8 000 r/min離心10 min取沉淀，分別用10、5、5 mL氯仿萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，稱其質(zhì)量得其總生物堿量[12]。

2 結(jié)果與分析

2.1 多糖含量的變化

從圖1可以看出，多糖含量的變化表現(xiàn)為現(xiàn)蕾期迅速上升，至綠蕾期到最大值592.8 mg/g，然后開(kāi)始下降，至開(kāi)花期達(dá)到最低值，此期鱗莖多糖的含量為綠蕾期的46.54%。開(kāi)花期后又開(kāi)始緩慢上升，至鱗莖收獲期達(dá)到第二個(gè)多糖積累高峰期，此高峰期的多糖含量為綠蕾期的77.01%，但高于其他各取樣測(cè)定時(shí)期的多糖含量。由圖1可以看出，綠蕾期多糖含量顯著高于鱗莖收獲期等其他各個(gè)時(shí)期，鱗莖收獲期的多糖含量與現(xiàn)蕾期和紅蕾期Ⅰ差異不明顯，但顯著高于紅蕾期Ⅱ、紅蕾期、開(kāi)花期和枯萎期。

2.2 總皂苷含量的變化

從圖2可以看出，總皂苷含量的變化表現(xiàn)為雙峰曲線，兩個(gè)高峰期分別為紅蕾期Ⅱ和鱗莖收獲期?，F(xiàn)蕾期總皂苷積累呈現(xiàn)直線上升，至紅蕾期Ⅱ達(dá)到最大值7.89 mg/g，較現(xiàn)蕾期提高了39.15%。第二個(gè)高峰期為鱗莖收獲期，總皂苷含量為7.57 mg/g，較開(kāi)花期上升了15.75%。兩個(gè)高峰期的總皂苷含量比較，紅蕾期Ⅱ較鱗莖收獲期僅提高了4.23%，差異不明顯， 且二者與紅蕾期I和枯萎期、開(kāi)花期的總皂苷含量亦基本相似。因此，總皂苷含量自植株現(xiàn)蕾期至植株地上部分完全枯亡，總皂苷含量差異不太大。

2.3 總酚含量的變化

多酚類化合物具有抗動(dòng)脈硬化、降低膽固醇、抗氧化和抗輻射等活性[13，14]。從圖3可以看出，卷丹百合鱗莖中總酚含量最高的時(shí)期出現(xiàn)在紅蕾期Ⅰ，含量為18.21 mg/g，其次是鱗莖收獲期，為17.96 mg/g。紅蕾期Ⅰ與紅蕾期II和鱗莖收獲期的總酚含量差異不明顯，但顯著高于其他取樣時(shí)期。表明卷丹百合鱗莖的最佳收獲時(shí)期為紅蕾期Ⅰ和鱗莖收獲期。

2.4 總生物堿含量的變化

從圖4可以看出，卷丹百合現(xiàn)蕾期總生物堿含量迅速上升，至紅蕾期Ⅰ達(dá)到最大值，總生物堿含量為8.11 mg/g，較現(xiàn)蕾期增加了42.78%。之后開(kāi)始下降，至開(kāi)花期出現(xiàn)總生物堿含量積累的第二個(gè)低峰期。方差分析結(jié)果顯示，除紅蕾期Ⅰ總生物堿含量顯著高于現(xiàn)蕾期外，其他各時(shí)期的總生物堿含量差異均不明顯。說(shuō)明卷單百合鱗莖總生物堿含量在植物發(fā)育的不同時(shí)期變化較小，鱗莖的采收時(shí)期對(duì)卷單百合總生物堿的生物活性可能無(wú)明顯的影響。

3 小結(jié)

卷丹百合植株自花蕾出現(xiàn)至鱗莖收獲期的年生長(zhǎng)發(fā)育周期中，鱗莖中多糖、皂苷、多酚和生物堿等生物活性物質(zhì)含量的變化均有兩個(gè)高峰和兩個(gè)低峰的積累時(shí)期。最大峰值呈現(xiàn)的時(shí)期先后順序依次為多糖（綠蕾期）、酚類和生物堿（紅蕾期I）及皂苷（紅蕾期II）。這與李紅娟[4]提出生物堿含量最大值出現(xiàn)在多糖之前的研究結(jié)果有所不同。第二個(gè)高峰值均出現(xiàn)在鱗莖收獲期，此時(shí)4種活性物質(zhì)的含量除多糖外，其他3種活性物質(zhì)均與最大峰值時(shí)無(wú)明顯差異。李紅娟[4]在卷丹百合營(yíng)養(yǎng)成分、活性物質(zhì)及栽培特性的研究中，指出鱗莖多糖和生物堿的含量在鱗莖收獲期基本處于最低水平，這與本研究結(jié)果不同。因此，認(rèn)為卷丹百合鱗莖收獲期在植株地上部位完全枯萎后進(jìn)行采收比較合理，也與傳統(tǒng)上百合鱗莖收獲期相符。

在百合的年生長(zhǎng)發(fā)育周期中，自葉片生長(zhǎng)到花蕾出現(xiàn)，是葉片生長(zhǎng)旺盛期，光合產(chǎn)物開(kāi)始由地上部分向地下部分轉(zhuǎn)移，促進(jìn)鱗莖糖類物質(zhì)的積累[15]。百合鱗莖中多糖、皂苷酚類化合物的形成，都需要有糖類物質(zhì)為基礎(chǔ)[5]。百合鱗莖發(fā)育期間可溶性總糖含量的高峰值出現(xiàn)的時(shí)期也基本在現(xiàn)蕾期[16]。本研究結(jié)果中卷丹百合鱗莖中多糖、酚類和皂苷的含量最大值均出現(xiàn)在花蕾期，基本與百合生長(zhǎng)發(fā)育不同階段生理生化的變化規(guī)律相吻合。

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