高效液相色譜法測(cè)定金樸消積顆粒清潔殘留物

李 靜，顧 林，何 娟，馮小雪

（揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)南京海陵藥業(yè)有限公司，江蘇 南京 210049）

高效液相色譜法測(cè)定金樸消積顆粒清潔殘留物

李 靜，顧 林，何 娟，馮小雪*

（揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)南京海陵藥業(yè)有限公司，江蘇 南京 210049）

目的 建立高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定金樸消積顆粒清潔殘留物。方法 采用Agilent SB C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-醋酸-水（35:4:61）為流動(dòng)相，流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)283 nm，柱溫30℃，進(jìn)樣10 μL。結(jié)果 在0.700932 μg/ml～2.803726 μg/ml濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=10.784x+0.4351（r=0.9974，n=6），重復(fù)性RSD為1.5%。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、快速、專屬性好、重復(fù)性好，可用于金樸消積顆粒清潔殘留物測(cè)定。

高效液相色譜法（HPLC）；外標(biāo)法金樸消積顆粒；殘留物

金樸消積顆粒主要成分為厚樸、枳實(shí)、陳皮等，主要功能為運(yùn)脾除濕，導(dǎo)滯和中，用于小兒厭食之脾失健運(yùn)證，癥見(jiàn)食欲不振，食量減少，大便干或粘滯不爽，噯氣，惡心，干嘔等。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局標(biāo)準(zhǔn)中記載用薄層掃描法測(cè)定金樸消積顆粒含量（以橙皮苷計(jì)），其中橙皮苷（C28H34O15）含量主要來(lái)自枳實(shí)及陳皮，目前還沒(méi)有關(guān)于采用高效液相色譜法檢測(cè)其殘留物的報(bào)道，本文參照《中國(guó)藥典》[1]2015年版一部陳皮項(xiàng)下的色譜條件首次采用高效液相色譜法對(duì)金樸消積顆粒的清潔殘留物進(jìn)行測(cè)定，并且也有研究報(bào)道[2-4]，采用高效液相色譜法測(cè)定不同產(chǎn)地、不同藥材中橙皮苷的含量，方法較為簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確。

1 儀器設(shè)備與試藥

1.1 儀器設(shè)備

高效液相色譜儀（UHPLC1290美國(guó)Agilent）、電子天平（梅特勒-托利多）。

1.2 試劑與試藥

橙皮苷對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)110721-201316，純度95.3%），醋酸為分析純，甲醇為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

取本品，照高效液相色譜法測(cè)定（《中國(guó)藥典》2015年版[1]二部通則0512），取每一棉簽上的擦拭物，精密加甲醇5ml，振搖使溶解，濾過(guò)，作為供試品溶液。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取橙皮苷對(duì)照品適量，加甲醇適量溶解并稀釋成每1ml中約含1.4 μg/ml的溶液，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

2.3 色譜條件

采用Agilent SB C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱，以甲醇-醋酸-水（35:4:61）為流動(dòng)相，流速1.0 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)283 nm，柱溫：30℃，進(jìn)樣量：10 μL。

2.4 測(cè)定方法

按照2.3項(xiàng)下的色譜條件，精密量取對(duì)照品及供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.5 溶液穩(wěn)定性

按2.3項(xiàng)下所述操作，制備對(duì)照品溶液，室溫避光放置，分別于0小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、16小時(shí)、20小時(shí)、24小時(shí)、28小時(shí)、32小時(shí)、36小時(shí)、40小時(shí)、44小時(shí)及48小時(shí)，精密量取10 μL注入高效液相色譜儀，以其峰面積計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD（%），各時(shí)間點(diǎn)的RSD（除28小時(shí)外）均大于1.0%，為保證結(jié)果的可靠性，該溶液應(yīng)臨用新配。

2.6 精密度

按2.2項(xiàng)下對(duì)照品溶液的配制方法配對(duì)照品溶液，精密量取10 μL注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果6次峰面積的RSD為1.5%，小于5.0%，表明該方法精密度良好。

2.7 線性關(guān)系考察

取橙皮苷對(duì)照品加甲醇分別配制成濃度每1 ml中含橙皮苷為0.700932 μg、1.051397 μg、1.401863 μg、1.752329 μg、2.102795 μg和2.803726 μg的溶液，在283 nm波長(zhǎng)下測(cè)定的峰面積為8.01188、11.62282、15.23375、20.14048、22.85687、30.56622。以橙皮苷濃度（μg/ml）為X軸，吸光度為Y軸，進(jìn)行線性回歸，求得回歸方程為：y=10.784x+0.4351（r=0.9974，n=6）。結(jié)果表明橙皮苷在0.700932 μg/ml～2.803726 μg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.8 檢測(cè)限

取橙皮苷對(duì)照品14.71 mg，置200 ml量瓶中，加甲醇適量，超聲使橙皮苷溶解，再加甲醇稀釋至刻度，精密量取上述溶液1.0 ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，再精密量取2.5 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，此時(shí)溶液濃度為0.175233 μg/ml，精密量取10 μL注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣2次，其信噪比分別為3.5和3.7，符合規(guī)定，即該方法的檢測(cè)限濃度為0.175233 μg/ml。

2.9 定量限

取橙皮苷對(duì)照品14.71 mg，置200 ml量瓶中，加甲醇適量，超聲使橙皮苷溶解，再加甲醇稀釋至刻度，精密量取上述溶液1.0 ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，此時(shí)溶液濃度為0.700932 μg/ml，精密量取10 μL注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣2次，其信噪比分別為12.0和10.7，符合規(guī)定，即該方法的定量限濃度為0.700932 μg/ml。

3 討 論

首次以高效液相色譜法測(cè)定金樸消積顆粒清潔殘留物，相對(duì)于薄層色譜法而言，準(zhǔn)確度高，精密度高，且線性、回收率、穩(wěn)定性等結(jié)果均符合要求。

[1] 《中國(guó)藥典》2015年版一部.

[2] 禤雪梅.HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地藥材陳皮中橙皮苷的含量[J].北方藥學(xué),2015,12(2).

[3] 蔡 萍,張水寒,肖 娟,劉新義,蔡光先,等.HPLC測(cè)定湖南道地藥材陳皮中橙皮苷的研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2006(4):65-67.

[4] 袁金斌,周志炎.HPLC測(cè)定陳皮提取物及其制劑中橙皮苷的含量,中成藥,2006(3):455-456.

本文編輯：吳 衛(wèi)

Determination of clean residues of gold and vegetable particles by HPLC

LI Jing,GU Lin,HE Juan,FENG Xiao-xue*

(Yangtze River Pharmaceutical Group Nanjing Hailing Pharmaceutical Co.,Ltd., Jiangsu Nanjing 210049,China)

Objective To establish a method for the determination of the residue of JinPuXiaoJi particles.Methods The determination was performed on Agilent SB C18 column,with moboile phase methanol:acetic acid:water(35:4:61),The flow rate is 1 ml/min,The detection wavelength was set at 283 nm and the injection volum was 10μL.Results The liner range was 0.700932μg·mL-1～f2.803726μg·mL-1(R2=0.9974),the rsd of repeatability is 1.5 pecent.Conclusion The method is simple and accurate,and suitable for quality control of he residue of JinPuXiaoJi particles.

High Performance Liquid Chromatography;JinPuXiaoJi particles;Residue

R927.2

A

ISSN.2095-8242.2017.24.4712.02

馮小雪（1991-），女，研究員，從事藥物分析及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究工作