血培養(yǎng)報陽時間及病原菌分布

徐 權，譚思源，陳宗寧，吳 健，夏曉燕

(鹽城市第一人民醫(yī)院，江蘇 鹽城 224001)

·論著·

血培養(yǎng)報陽時間及病原菌分布

徐 權，譚思源，陳宗寧，吳 健，夏曉燕

(鹽城市第一人民醫(yī)院，江蘇 鹽城 224001)

目的 了解血培養(yǎng)陽性標本的菌群分布及報陽時間，為實驗室病原菌診斷及臨床制定治療方案提供依據。方法 收集2015年5—11月某院臨床各科室送檢的血標本，記錄血培養(yǎng)報陽時間并將所獲得病原菌鑒定至菌種。結果 從血培養(yǎng)標本中共分離157株病原菌，其中革蘭陽性球菌占31.85%，革蘭陰性桿菌占57.32%，真菌占10.83%。培養(yǎng)陽性病原菌及其報陽的中位時間分別為：腸桿菌科細菌0.50 d，非發(fā)酵菌0.63 d，腸球菌屬0.60 d ，鏈球菌屬0.80 d，葡萄球菌屬1.01 d，真菌1.44 d。結論 血培養(yǎng)陽性標本報陽時間從早到晚依次是：腸桿菌科細菌、腸球菌屬、非發(fā)酵菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬、真菌。引起血流感染的病原菌均在4 d內儀器陽性報警，大多數病原菌在 1 d內報陽性。

血培養(yǎng)； 病原菌； 菌群分布； 報陽時間； 中位時間

[Chin J Infect Control，2017，16(2)：173-175,178]

利用血培養(yǎng)檢測病原菌是菌血癥、敗血癥診斷中必不可少的依據，近年來由于各種侵人性操作增多，器官移植大量開展，腫瘤化學治療患者的增加，血培養(yǎng)已成為血流細菌感染診斷和危重患者病情監(jiān)測

的重要手段[1]。為了解血培養(yǎng)陽性標本的菌群分布及報陽時間，為實驗室病原菌的診斷以及臨床制定經驗治療方案提供依據，對此進行了研究，現(xiàn)將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2015年5—11月本院臨床各科室送檢的同時進行需氧及厭氧培養(yǎng)的血標本。

1.2 儀器與試劑 BacT/Alert 3D 480全自動血培養(yǎng)儀及配套的血培養(yǎng)瓶、VIETK 2 Compact全自動微生物鑒定儀及配套的鑒定板均購自法國生物梅里埃公司。

1.3 方法

1.3.1 標本的采集與培養(yǎng) 按臨床微生物血培養(yǎng)操作規(guī)范進行標本的采集與培養(yǎng)[1]。

1.3.2 標本的處理 儀器報警陽性，記錄標本報陽時間，并立即取樣涂片染色和轉種血/麥康凱平板，置35℃、5%的二氧化碳培養(yǎng)箱內培養(yǎng)18～24 h，涂片結果立即向臨床報告。

1.3.3 病原菌鑒定 病原菌經VIETK 2 Compact全自動微生物分析系統(tǒng)進行鑒定，操作過程嚴格按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行。質控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC 25923、霍米奇腸桿菌ATCC 700323、大腸埃希菌ATCC 25922、鉛黃腸球菌ATCC 700327。

1.4 統(tǒng)計學分析 應用WHONET 5.0和SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計學分析。

2 結果

2.1 病原菌分布 共分離157株病原菌，其中革蘭陽性球菌50株(31.85%)，革蘭陰性桿菌90株(57.32%)，真菌17株(10.83%)。革蘭陽性球菌以凝固酶陰性葡萄球菌( CNS)居多，占15.92%，其次為金黃色葡萄球菌、腸球菌屬，分別占5.73%、3.82%。革蘭陰性桿菌中，主要為大腸埃希菌(17.20%)，其次為肺炎克雷伯菌(15.92%)。血培養(yǎng)病原菌分布情況見表 1 。

表1 157株血培養(yǎng)病原菌分布情況

2.2 血培養(yǎng)報陽時間 157株血培養(yǎng)病原菌，報陽時間<0.5 d的病原菌46株，占29.30%；0.5～1 d內的病原菌66株，占42.04%；1～2 d內的病原菌29株，占18.47%；≥2 d的病原菌16株，占10.19%。血培養(yǎng)陽性病原菌及其報陽的中位時間分別為：腸桿菌科細菌0.50 d，非發(fā)酵菌0.63 d，腸球菌屬0.60 d ，鏈球菌屬0.80 d，葡萄球菌屬1.01 d，真菌1.44 d。血培養(yǎng)陽性標本報陽時間從早到晚依次是：腸桿菌科細菌、腸球菌屬、非發(fā)酵菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬、真菌。血培養(yǎng)病原菌報陽時間分布見表2。

表2 157株血培養(yǎng)病原菌報陽時間分布

注：1)包含1株發(fā)酵非腸桿菌科的親水氣單胞菌；2)包含2株藤黃微球菌

3 討論

本院采用BacT/Alert 3D 480全自動血培養(yǎng)儀及配套的血培養(yǎng)瓶進行培養(yǎng)，檢測原理為當培養(yǎng)瓶內有微生物生長，代謝過程中產生的二氧化碳可經過半透膜滲透至瓶底，與固定在瓶底的NoveL/co2感應器結合指示劑產生顏色變化，經光電檢測得知二氧化碳變化情況，自動連續(xù)記憶并制成曲線圖，通過計算機分析處理后，判斷陰性或陽性結果，陽性者即時發(fā)出報警，提示報陽時間并記錄，5日未生長者發(fā)出陰性報警。

本研究顯示，157株血培養(yǎng)病原菌革蘭陰性菌占57.32%，革蘭陽性菌占31.85%，真菌占10.83%，革蘭陰性菌中以大腸埃希菌、肺炎克雷伯為主，革蘭陽性細菌中以CNS、金黃色葡萄球菌為主，與文獻[2-5]報道的北方醫(yī)院不同，與南方醫(yī)院基本一致，但菌群分布有所區(qū)別；真菌中以假絲酵母菌為主，與相關文獻[6]報道基本一致。但是本組以近平滑假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌為主，與其他地區(qū)的病原菌分布有差別[7]，說明血培養(yǎng)的病原菌分布也存在地域差異，各地區(qū)臨床醫(yī)生在抗菌藥物經驗使用過程中均應參照當地的血培養(yǎng)病原菌分布情況。

血培養(yǎng)報陽時間是判斷血培養(yǎng)結果臨床意義的重要指標之一，因此總結分析報陽時間具有重要意義。分析157株血培養(yǎng)病原菌報陽時間發(fā)現(xiàn)，腸桿菌科細菌的中位時間最短(0.50 d)，真菌中位時間最長(1.44 d)，非發(fā)酵菌、腸球菌屬、鏈球菌屬的中位時間均<1 d，與文獻[8]報道一致，其主要原因是細菌的分裂周期遠短于真菌。當然血培養(yǎng)報陽時間還與血標本中菌量有關，一些皮膚表面正常菌群，如果在血培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)其報陽時間顯著長于其中位時間，說明該菌在初始血標本中的含量很低，可能來源于消毒不徹底的皮膚污染。甚至有作者認為，報陽時間>2 d的CNS，100%為污染菌[9]。另外，通過比較導管血和其他部位外周血培養(yǎng)報陽時間可以判斷該血流感染是否來源于導管，一般認為導管血培養(yǎng)報陽時間比外周血提前2 h以上即可判斷感染源是導管，應當及時拔除導管。

血培養(yǎng)的17株真菌中，報陽的中位時間為1.44 d，0.5 d以內無報陽的真菌，0.5～1 d內報陽的真菌5株，占29.41%；1～2 d內報陽的真菌7株，占41.18%；2～4 d內報告陽性的真菌5株，占29.41%；由于真菌培養(yǎng)的時間最長，污染率高，增加了臨床診斷的難度。

分析血培養(yǎng)菌群分布及報陽時間發(fā)現(xiàn)，血流感染的病原菌在血培養(yǎng)儀內培養(yǎng)2 d陽性率即可達89.81%，超過2 d則該陽性菌來源于污染的可能較大。不同種類細菌的報陽時間范圍雖有較多重疊，但又有所不同，因此，在報告血培養(yǎng)陽性時應同時報告報陽時間，豐富危急值報告的內容，為臨床制定經驗治療方案增加依據。血培養(yǎng)報陽時間還可能與血液中抗菌藥物、抑制劑等其他因素有關，有待進一步研究。

[1] 童明慶．臨床微生物血培養(yǎng)操作規(guī)范[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2004，27 (1) ：124-126.

[2] Reynolds R, Potz N, Colman M, et al. Antimicrobial susceptibility of the pathogens of bacteraemia in the UK and Ireland 2001-2002: the BSAC Bacteraemia Resistance Surveillance Programme[J]. J Antimicrob Chemother, 2004， 53(6): 1018-1032.

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[4] 褚云卓，年華，鄧宇欣，等.血培養(yǎng)的菌譜調查及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2007，17( 4 ) ：472-474．

[5] 黃烈，聶署萍，吳潤香，等．血培養(yǎng)常見病原菌分布及耐藥性分析[J].海南醫(yī)學，2011，22(12)：135-137.

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[7] 楊蓬勃，胡云建．住院患者真菌感染及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2007，17(6)：729-731.

[8] 張秀珍，胡云建，宣天芝，等．兩種全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)臨床標本平行檢測對比評價[J].中華醫(yī)學檢驗雜志，2001，24(4)：299-302.

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(本文編輯：文細毛)

Positive alarming time of blood culture and distribution of pathogens

XUQuan,TANSi-yuan,CHENZong-ning,WUJian,XIAXiao-yan

(YangchengCityNo. 1People’sHospital,Yancheng224001,China)

Objective To investigate the distribution of pathogens and positive alarming time of blood culture, and provide basis for laboratory diagnosis and clinical treatment. Methods Blood specimens from clinical departments in a hospital in May-November 2015 were collected, positive alarming time of blood culture was recorded, species of pathogens were identified. Results A total of 157 pathogenic strains were isolated from blood culture specimens, gram-positive cocci, gram-negative bacilli, and fungi accounted for 31.85%, 57.32%, and 10.83% respectively. The median positive alarming time were as follows: Enterobacteriaceae 0.50 day, non-fermenting bacteria 0.63 day,Enterococcusspp. 0.60 day,Streptococcusspp. 0.80 day,Staphylococcusspp. 1.01 days, and fungi 1.44 days, respectively. Conclusion Positive alarming time of blood culture specimens from early to late are as follows: Enterobacteriaceae,Enterococcus, non-fermentative bacteria,Streptococcusspp.,Staphylococcusspp., and fungus. Positive alarming time of pathogens causing bloodstream infection are all within 4 days, and most of them are within 1 day.

blood culture; pathogen; flora distribution; positive alarming time; median time

2016-03-01

2015年鹽城市科技立項(YK2015003)；江蘇省重點?？崎_放課題

徐權(1966-)，女(漢族)，江蘇省鹽城市人，副主任護師，主要從事醫(yī)院感染管理研究。

夏曉燕 E-mail:piaoxue1982717@sina.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2017.02.017

R446.5

A

1671-9638(2017)02-0173-04