雙歧桿菌對12種中藥的發(fā)酵與抗菌活性檢測分析

王惠蕓 呂雄

(1浙江省天正設(shè)計工程有限公司，浙江杭州300012)

(2博世包裝技術(shù)（杭州）有限公司，浙江杭州300012)

雙歧桿菌對12種中藥的發(fā)酵與抗菌活性檢測分析

王惠蕓1呂雄2

(1浙江省天正設(shè)計工程有限公司，浙江杭州300012)

(2博世包裝技術(shù)（杭州）有限公司，浙江杭州300012)

主要總結(jié)了中藥在雙歧桿菌的作用之下抗菌活性發(fā)生的明顯變化，12種中藥包括連翹、淡豆豉、大黃、黃芩、當(dāng)歸、五味子、甘草、黨參、半夏、茯苓、赤芍、白芍。對于這12種中藥進行雙歧桿菌的發(fā)酵處理，使用相應(yīng)的管碟法進行活性檢測和分析。

雙歧桿菌；12種中藥；發(fā)酵；抗菌活性；檢測分析

中藥炮制中一個非常重要的方法也是比較常見的方法就是發(fā)酵法，發(fā)酵法主要促進微生物發(fā)揮自身的積極作用，改變被發(fā)酵的中藥的成分和藥性，從而達到提高中藥的藥性并且將副作用有效降低的效果。比較傳統(tǒng)的中藥具有自身的突出特點，主要通過口服用藥，并且為湯劑形式服用。人體吸收口服中藥促使這些中藥發(fā)揮作用，中藥的化學(xué)成分以及相關(guān)抗菌活性受到人體菌的代謝作用的影響較大。一般情況下，中藥通過消化道菌的作用進行轉(zhuǎn)化并且發(fā)揮自身作用，達到治療效果。本文選取了12種中藥基質(zhì)，對抗菌的檢測效果進行相互之間的對比，從而了解雙歧桿菌12種中藥的發(fā)酵的抗菌活性的改變情況。

1 實驗準(zhǔn)備階段

在實驗的準(zhǔn)備階段，必須對實驗當(dāng)中所需要的儀器以及材料準(zhǔn)備充分。首先，從權(quán)威的中藥同濟堂選購12種中藥，包括連翹、淡豆豉、大黃、黃芩、當(dāng)歸、五味子、甘草、黨參、半夏、茯苓、赤芍、白芍。其次，從相關(guān)的保藏中心選購嬰兒雙歧桿菌，準(zhǔn)備充足的變形桿菌、黃色葡萄球菌以及大腸埃希菌等菌株，并且將這些菌株完好保存。最后，準(zhǔn)備相應(yīng)的試劑以及所需的培養(yǎng)基。

2 具體的試驗方法以及實驗過程

2.1 制作并且準(zhǔn)備中藥發(fā)酵液

首先將12種中藥進行切片并且剪碎處理，分別取5克放到三角瓶中，隨后向瓶裝加入30毫升的自來水，將三角瓶處于121℃的環(huán)境當(dāng)中進行滅菌處理，處理30分鐘便可取出。冷卻之后，在12個三角瓶中分別加入100毫升雙歧桿菌培養(yǎng)液，隨后再加入0.5毫升的經(jīng)過24小時處理的雙歧桿菌菌液。一種中藥不加雙歧桿菌，另一種中藥加雙歧桿菌，對兩種進行對比。

2.2 樣品的正確處理

對于12種中藥進行發(fā)酵處理，并且10天以后進行對比，使用濾紙過濾液體，過濾之后的液體進行中藥的抗菌活性檢測。

2.3 使用管碟法進行抑菌試驗

第一，制作實驗當(dāng)中所需要的培養(yǎng)基，按照說明書取出42克瓊脂粉，并且在蒸餾水中進行溶解處理，高壓環(huán)境之下20分鐘滅菌處理。并且在合適的條件之下冷卻培養(yǎng)基，在無菌的器皿當(dāng)中注入培養(yǎng)基。這便可以成功地制作MH瓊脂平板培養(yǎng)基。關(guān)于MH肉湯培養(yǎng)基的制作，按照相關(guān)說明書取出21克的肉湯，在蒸餾水中進行溶解處理，隨后同以上方法進行試驗。

第二，制作準(zhǔn)備菌液，在MH肉湯培養(yǎng)基當(dāng)中接種金黃色葡萄球菌以及大腸桿菌等菌株，處于37℃的環(huán)境當(dāng)中24個小時。再用正確的方法確定濃度情況，使用生理鹽水進行校正處理。

第三，進行抑菌實驗，應(yīng)該采用管碟法進行實驗，將已經(jīng)準(zhǔn)備好的菌液進行稀釋處理，并將處理后的菌液放置到M H瓊脂平板的中心位置，進行均勻的涂抹。無菌操作條件之下，在培養(yǎng)基上放置牛津杯，并且使牛津杯和培養(yǎng)基之間沒有空隙，在向器皿當(dāng)中加入需要檢測的實驗樣品，用濾紙進行覆蓋處理，隨后進行觀察。實驗結(jié)果應(yīng)該取每次實驗結(jié)果的平均值，如果沒有抑菌圈生成就說明抑菌活性也是不存在的。如果抑菌圈比較小，說明抗菌活性比較弱。

3 實驗的結(jié)果分析

通過抑菌相關(guān)結(jié)果明確的表示，雙歧桿菌培養(yǎng)液對變形桿菌具有較弱的抗菌效果，12種中藥通過雙歧桿菌的發(fā)酵作用，使得抗菌活性發(fā)生不同程度的變化。連翹受到雙歧桿菌的改變比較明顯。其他中藥發(fā)酵前以及發(fā)酵之后對于細菌的抑制作用并沒有非常明顯的變化。

4 結(jié)語

通過實驗表明，傳統(tǒng)的中藥的給藥途徑多為口服，在中藥發(fā)揮自身作用之前必須停留在胃腸道當(dāng)中一段時間，在此期間中藥可能會與腸道菌發(fā)生作用，在整個過程當(dāng)中腸道菌可能會對中藥產(chǎn)生影響。實驗結(jié)果顯示，雙歧桿菌中藥都能夠在正常情況之下生長，這就說明中藥不會受到其他菌類的影響。中藥和雙歧桿菌共同作用之下，藥物活性會有明顯的提高，造成這種現(xiàn)象的原因為化學(xué)成分對于雙歧桿菌產(chǎn)生作用，也可能是雙歧桿菌抗菌活性產(chǎn)生作用。種種現(xiàn)象都明確的顯示，中藥會在微生物發(fā)酵作用之后產(chǎn)生明顯的變化，中藥所產(chǎn)生的這些變化都可以促進活性化合物的產(chǎn)生和選擇。因此，雙歧桿菌對于不同種類的中藥有著不同程度的發(fā)酵以及抗菌活性的影響。

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