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    細(xì)胞增殖指數(shù)TK1、Ki67對大腸癌的臨床價值比較

    2017-03-02 19:00:07王成楓余養(yǎng)生何燕珠
    中外醫(yī)療 2016年33期
    關(guān)鍵詞:大腸癌免疫組化

    王成楓 余養(yǎng)生 何燕珠

    [摘要] 目的 探討并比較大腸癌中細(xì)胞增殖指數(shù)TK1、Ki67的表達(dá)及臨床意義。 方法 整群選取2009年9月—2011年3月該院收治的142例大腸癌患者的手術(shù)標(biāo)本,通過免疫組化來對于大腸癌組織與其周邊粘膜組中的TK1的檢驗(yàn)結(jié)果、大腸癌組織中Ki67的檢查情況進(jìn)行分析。著重分析檢查結(jié)果與當(dāng)前病理參數(shù)之間的具體關(guān)系(差異),并進(jìn)行相關(guān)性和生存分析等工作。 結(jié)果 TK1在大腸癌癌組織及周圍腸黏膜中的陽性表達(dá)率分別為82.4%(117/142)和10.6%(15/142),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);大腸癌患者TK1表達(dá)在不同的年齡、性別、發(fā)病部位、大小、癌組織深度,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度和TNM分期方面的統(tǒng)計學(xué)上沒有呈現(xiàn)出顯著不同。大腸癌Ki67擁有94.4%(127/142)的陽性表達(dá)率,但Ki67在不同分化階段的癌組織中陽性表達(dá)結(jié)果差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P <0.05 ),高分化組分別與中、低分化組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 )。TK1與Ki67之間具有相關(guān)性,但關(guān)聯(lián)性不強(qiáng)。大腸癌患者生存時間與TK1無關(guān),與Ki67有關(guān)。 結(jié)論 TK1可能與大腸癌的發(fā)生有關(guān),而與大腸癌的發(fā)展及預(yù)后無關(guān)。Ki67是提示大腸癌預(yù)后的指標(biāo)。細(xì)胞增殖指數(shù)TK1在大腸癌中的臨床價值低于Ki67,其應(yīng)用價值不大。

    [關(guān)鍵詞] 大腸癌;TK1;Ki67;免疫組化;預(yù)后

    [中圖分類號] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742(2016)11(c)-0007-04

    [Abstract] Objective To investigate and compare the expression and clinical significance of the cell proliferation index TK1 and Ki67 in colorectal cancer. Methods Group selection 142 cases of colorectal cancer from September 2009 to March 2011 were selected, and the results of TK1 examination in colorectal cancer tissue and peripheral mucosal tissue,Ki67 examination in colorectal cancer tissuewere analyzed by immunohistochemistry. Focus on the analysis of the specific relationship between the results and the current pathological parameters(differences), and the correlation and survival analysis, etc. Results TK1in colorectal carcinoma and its surrounding normal intestinal mucosa, the positive expression rate reached 82.4%(117/142)and 10.6% (15/142), there is a significant difference (P < 0.05); patients with colorectal cancer TK1 expression in different age, gender, onset location, size, tumor tissue depth, lymph node metastasis and TNM staging statistics showed no significantly different. Rate has reached 94.4%(127/142), the positive expression of Ki67 in colorectal cancer, and it is worth noting is Ki67 in the expression of different degree of differentiation of colorectal cancer is still differences (P < 0.05), high differentiation group respectively between middle and low differentiation group in a statistically exists with difference (P < 0.05). There is a correlation between TK1 and Ki67, but the correlation is not strong. The survival time of patients with colorectal cancer has nothing to do with TK1, which is related to Ki67. Conclusion TK1 may be related to the occurrence of colorectal cancer, but it has nothing to do with the development and prognosis of colorectal cancer. Ki67 is an indicator of the prognosis of colorectal cancer. The clinical value of cell proliferation index TK1 in colorectal cancer is lower than that of Ki67, and its clinical application value is not very large.

    [Key words] Colorectal Cancer;TK1;Ki67;Immunohistochemistry;Prognosis

    當(dāng)前,得益于分子生物學(xué)及腫瘤分子生物學(xué)的快速發(fā)展,部分蛋白質(zhì)分子在惡性腫瘤的臨床診斷和治療中都能夠得到應(yīng)用,其臨床表現(xiàn)結(jié)果也達(dá)到了人們預(yù)期。相關(guān)研究[1-3]表明TK1、Ki67與某些蛋白質(zhì)分子一樣也具有對于各類腫瘤進(jìn)行有效評估的標(biāo)記物之一。當(dāng)前,國內(nèi)外對于TK1在大腸癌的表達(dá)和臨床意義方面的研究相對較少,特別是其實(shí)際的案例性研究幾乎是空白。該論文將應(yīng)用免疫組化方法檢測2009年9月—2011年3月該院收治的142例大腸癌中TK1、Ki67的表達(dá),旨在明確它們與大腸癌之間的預(yù)后關(guān)系,同時為大腸癌的診斷、治療等提供一定的參考,現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    該文中所有研究對象均是整群選取福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院腫瘤外科于2009年9月—2011年3月收治的大腸癌病人,共計142例,這也是該次免疫組化檢測的主要對象,并將這142例患者癌癥組織旁正常粘膜作為論文的分析對照組。總計142例大腸癌患者中男性患者為86例,女性患者56例,其中年齡最小者28歲,最大者84歲,中位年齡為63歲,所有患者均已進(jìn)行過手術(shù)治療。其中76例直腸癌患者,40例降乙型結(jié)腸癌患者及20例升結(jié)腸癌、6例橫結(jié)腸癌患者。樣本中,I期結(jié)腸癌患者共30例(21.7%),II期共45例(31.7%),III期共60例(42.3%),IV期7例(4.9%)。高中低分化結(jié)腸癌患者各占52例、65例、25例。淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移的比重為53.5%:45.1%,此外,也有2例患者為確定淋巴結(jié)是否已經(jīng)轉(zhuǎn)移。浸潤深度T1、T2、T3、T4分別為3例、30例、17例、92例。

    1.2 試驗(yàn)儀器和試劑

    儀器:①全自動脫水機(jī)和生物組織包埋機(jī)均選用了TS-12N型號全自動脫水機(jī)及BM-VIII生物組織包埋機(jī)。②LEICA切片子。③恒溫培養(yǎng)箱的型號是GHP9080。實(shí)驗(yàn)主要試劑包括:①TK1-IgG即用型鼠抗人。②Ki-67單克隆抗體。③即用型免疫組織化學(xué)SABC試劑盒。④DAB顯色試劑盒。

    1.3 方法

    以上樣本患者的資料保存完整,相關(guān)腫塊的標(biāo)本也按照一般性處理方式進(jìn)行了脫水保存,并通過石蠟包埋的方式進(jìn)行存放。連續(xù)組織切片則采用組織化學(xué)染色法進(jìn)行陽性比對。

    1.4 結(jié)果判斷

    TK1的陽性染色大多在細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)之中,在細(xì)胞膜上并無明顯表達(dá),但也有一部分在細(xì)胞核上出現(xiàn)了表達(dá)結(jié)果,且呈現(xiàn)棕褐色或棕黃色以顆粒狀態(tài)存在。具體的染色強(qiáng)度值為:<10%為陰性(-);10%~25%為弱陽性(+);26%~50%為陽性(++);>50%為強(qiáng)陽性(+++)[4]。

    1.5 統(tǒng)計方法

    通過SPSS 16.0 for window這一統(tǒng)計學(xué)軟件對于數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析:其中對年齡、腫瘤的具體資料選用M, Mean±Sd等描述性分析、率的比較;對TK1、Ki67與年齡等資料的比較選擇秩和檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)等方法;兩個指標(biāo)之間的相關(guān)性應(yīng)用Spearman相關(guān)性檢驗(yàn);生存分析會選取Kaplan-Meier生存曲線來進(jìn)行確定。在一般情況下均以 α=0.05雙側(cè)檢驗(yàn)的值為整體檢驗(yàn)中的顯著性水準(zhǔn)。

    2 結(jié)果

    2.1 TK1陽性表達(dá)主要位于細(xì)胞質(zhì)

    見附圖1~5。在上述所有患者的癌組織中TKI的陽性表達(dá)率達(dá)到了82.4%,腸粘膜的TKI陽性表達(dá)率則是10.6%。大腸癌及周圍正常組織間的TK1表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。而性別、年齡、部位、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、大小、病理類型、分化程度不同的情況下,TK1的陽性表達(dá)結(jié)果在統(tǒng)計學(xué)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。

    2.2 Ki67的陽性表達(dá)存在于細(xì)胞核

    見附圖6~8。所有大腸癌病理組織中的陽性高達(dá)127例,占比94.4%。 Ki67在不同性別、年齡、部位、病理類型中,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05 ),但其在不同分化程度下的統(tǒng)計學(xué)結(jié)果則恰恰相反,詳見表2。高與中分化組、高與低分化組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05 ),中低分化組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表3。

    2.3 TK1與Ki67之間關(guān)系

    TK1與Ki67之間具有相關(guān)性,但關(guān)聯(lián)性不強(qiáng)。見表4。

    2.4 TK1、Ki67與大腸癌患者術(shù)后生存時間的關(guān)系

    142例大腸癌患者中失訪13例,129例獲得5年以上隨訪,最長隨訪時間78個月。Kaplan-Meier生存曲線顯示大腸癌患者TK1低表達(dá)與高表達(dá)生存時間之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05,見圖1,表5),而不同程度表達(dá)的Ki67的生存時間之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,見表2,表6)。

    3 討論

    大腸癌是已知的較為常見的惡性腫瘤之一,隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展,現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)已經(jīng)能夠?qū)τ诖竽c癌的預(yù)后作出貢獻(xiàn),然而很多大腸癌患者依然飽受大腸癌帶來的身心折磨,無法進(jìn)行理想的預(yù)后判斷和指導(dǎo)治療,更是會導(dǎo)致病情治療期間出現(xiàn)反復(fù),甚至轉(zhuǎn)移。正因如此,探尋出新的指標(biāo)判斷預(yù)后對于指導(dǎo)醫(yī)務(wù)工作者開展大腸癌的相關(guān)治療具有極強(qiáng)的幫助。

    Ki-67抗原和細(xì)胞增殖之間存在著一定聯(lián)系,其是細(xì)胞周期相關(guān)的增殖細(xì)胞核抗原。當(dāng)前國內(nèi)外學(xué)者的相關(guān)研究[5-8]表明:大腸癌組織的Ki67表達(dá)要明顯的高于腺瘤和其周邊粘膜,這表明Ki67與癌組織之間存在著正相關(guān)的關(guān)系;大腸癌中Ki67與癌癥的特性、變化等都有密切聯(lián)系,但與與性別、年齡等非關(guān)鍵因素之間的相關(guān)性較低;大腸癌5年生存率與Ki67有關(guān)。提示Ki-67的表達(dá)與大腸癌的預(yù)后有可能相關(guān)。當(dāng)前,理論界對于關(guān)于Ki-67表達(dá)與大腸癌臨床病例參數(shù)之間的管理尚未理清,也沒有形成一種認(rèn)可度高的共識,基于不同側(cè)重進(jìn)行研究的學(xué)者其研究結(jié)果通常是相對立、矛盾的,但這也不能否認(rèn)Ki-67在大腸癌預(yù)后上所能作出的貢獻(xiàn)。

    TK1(胸苷激酶1)與Ki-67一樣均為一種跟細(xì)胞周期存在密切關(guān)系的蛋白質(zhì),是一種磷酸轉(zhuǎn)移酶。胸苷激酶在細(xì)胞裂變的DNA合成期可以發(fā)揮出正向作用。同樣也是介導(dǎo)脫氧胸苷進(jìn)入DNA合成的一種路徑。TK1對于DNA補(bǔ)救合成具有關(guān)鍵作用,其能夠參與到細(xì)胞周期調(diào)控和細(xì)胞增殖的進(jìn)程之中。一般來說,正常細(xì)胞中TK1存在于G1晚期和S期早期。然而在腫瘤細(xì)胞中,S期、G2期的細(xì)胞比例明顯較高,這也使得TK-1 在S期、G2期的濃度隨之上升。理論界的研究普遍認(rèn)為TK1是一種能夠評判腫瘤細(xì)胞是否增值的標(biāo)記物,并在腫瘤的診斷治療發(fā)揮一系列作用。吳鴻雁等人[5]進(jìn)行的研究表明:TK1在大腸正常黏膜組織、腺瘤以及腺癌三組中的陽性表達(dá)率分別為:27.27%(3/11,均為極弱表達(dá))、100%(19/19,其中18例均為低表達(dá))、100%(120/120,中等強(qiáng)度表達(dá)43例,高表達(dá)10例),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。該研究顯示:TK1在大腸癌癌組織及周圍腸黏膜中的陽性表達(dá)率分別為82.4%和10.6%(15/142),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在性別、年齡、部位、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、大小、病理類型、分化程度不同的情況下,TK1的陽性表達(dá)結(jié)果在統(tǒng)計學(xué)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這與目前的醫(yī)學(xué)界研究結(jié)果[9-10]基本一致。盡管該研究中TK1與Ki67之間具有相關(guān)性,但其相關(guān)性不強(qiáng);大腸癌5年生存率與TK1無關(guān),與Ki67有關(guān)。這說明該研究中TK1與大腸癌的發(fā)展可能無關(guān)。鑒于此,TK1在大腸癌的預(yù)后及預(yù)測中很可能無法獨(dú)立發(fā)揮出作用。

    綜上所述,TK1可能與大腸癌的發(fā)生有關(guān),而與大腸癌的發(fā)展及預(yù)后無關(guān)。Ki67是提示大腸癌預(yù)后的指標(biāo)。細(xì)胞增殖指數(shù)TK1在大腸癌中的臨床價值低于Ki67,其應(yīng)用價值不大。

    [參考文獻(xiàn)]

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    [5] 吳鴻雁 ,樊祥山,孟凡青,等. TK1、Ki 67在大腸癌發(fā)生發(fā)展中作用及其相關(guān)性[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2009, 25(3):282-286.

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    (收稿日期:2016-08-22)

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