血清胰島素、瘦素及CRP在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表達(dá)水平及其臨床意義

郭伍斌　馬新　劉翔

【摘要】 目的：探究血清胰島素、瘦素及C反應(yīng)蛋白（CRP）在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表達(dá)水平及其臨床意義。方法：選擇2008-2015年入住本院進(jìn)行治療的120例患者為研究對象，根據(jù)研究參與者類型的不同，分為A組（乳腺癌合并糖尿病患者，40例）、B組（單純?nèi)橄侔┗颊撸?0例）、C組（單純2型糖尿病患者，40例）；另選取主動參與本次研究的健康志愿者40例作為對照組。160例受試者均靜脈采血，離心分離血清后，采用ELISA方法測定受檢者血清LEP水平，采用酶聯(lián)免疫測定法測定胰島素及CRP水平。分別測定四組患者血清瘦素水平、空腹血漿胰島素（FINS）、CRP指數(shù)，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果：A組、B組、C組的血清胰島素、瘦素、CRP的水平與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：血清胰島素、瘦素及CRP在乳腺癌合并2型糖尿病患者中具有顯著的表達(dá)，三項(xiàng)指標(biāo)對于乳腺癌合并2型糖尿病的早期診斷與治療具有重大意義。

【關(guān)鍵詞】 血清胰島素； 瘦素； CRP； 乳腺癌合并2型糖尿病

Expression and Clinical Significance of Serum Insulin，Leptin and CRP in Breast Cancer Patients with Type 2 Diabetes Mellitus/GUO Wu-bin，MA Xin，LIU Xiang.//Medical Innovation of China，2017，14（03）：013-016

【Abstract】 Objective：To investigate the expression and clinical significance of serum insulin，leptin and C reactive protein（CRP） in breast cancer patients with type 2 diabetes mellitus.Method：120 patients in our hospital from 2008 to 2015 were selected as research subjects，according to the study participants of different types，they were divided into A group（40 cases with breast cancer combined with diabetes mellitus，B group（40 cases of breast cancer patients，C group（40 patients with type 2 diabetes mellitus），this study selected the active participation of 40 healthy volunteers as control group.160 cases were taken venous blood samples，centrifuged serum，ELISA method was used to determine the level of serum LEP，the level of insulin and CRP were measured by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）.The levels of serum leptin，fasting plasma insulin（FINS） and CRP index were measured and analyzed in four groups.Result：The serum insulin，leptin，CRP levels of A group，B group，C group compared with the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：The serum insulin，leptin and CRP in breast cancer patients with type 2 diabetes have significant expression，the three indicators for breast cancer with type 2 diabetes early diagnosis and treatment is of great significance.

【Key words】 Serum insulin； Leptin； CRP； Mammary cancer combined with type 2 diabetes

First-authors address：The Affiliated TCM Hospital of Southwest Medical University，Luzhou 646000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.03.004

近年來，糖尿病及乳腺癌患者日益增多，老年女性是該病的主要發(fā)病人群。胰島素抵抗和高胰島素血癥是2型糖尿病患者的主要特征。國內(nèi)外的研究表明，乳腺癌的發(fā)生與2型糖尿病有著一定的關(guān)聯(lián)。特別是2型糖尿病患者的高胰島素血癥、高血糖等，其作用十分重大。2型糖尿病患者的瘦素明顯升高，且與胰島素抵抗密切相關(guān)[1]，這是因?yàn)槭菟鼐哂写龠M(jìn)乳腺細(xì)胞生長的作用。Larsson等[2]從Medline中搜索了大量有關(guān)糖尿病與乳腺癌的研究資料，發(fā)現(xiàn)患有2型糖尿病的女性發(fā)生乳腺癌的危險增加20%，在統(tǒng)計學(xué)上有明顯差異。對于妊娠期糖尿病的研究，也得出了相同的結(jié)論[3]。但也有不同的研究結(jié)果，Stattin等[4]的研究發(fā)現(xiàn)，<49歲還未絕經(jīng)的女性中，空腹血糖的升高與患乳腺癌風(fēng)險增高相關(guān)；在≥49歲的女性中，血糖升高與患乳腺癌的風(fēng)險無關(guān)。C反應(yīng)蛋白（CRP）是低水平炎癥的敏感標(biāo)志物，在多種惡性腫瘤患者中升高，且在糖尿病患者當(dāng)中也明顯升高。本次研究選取了120例不同類型的患者和40例健康對照者作為參考，對這160例參與者進(jìn)行研究，探究血清胰島素、瘦素及CRP在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表達(dá)水平與臨床意義，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008-2015年入住本院進(jìn)行治療的120例患者為研究對象，根據(jù)研究參與者類型的不同，分為A組（乳腺癌合并糖尿病患者，40例）、B組（單純?nèi)橄侔┗颊撸?0例）、C組（單純2型糖尿病患者，40例）；另選取主動參與本次研究的健康志愿者40例作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：乳腺癌組，病理結(jié)果診斷為乳腺癌，全組病例均未接受術(shù)前放、化療或內(nèi)分泌治療；對照組，身體各項(xiàng)指標(biāo)均正常，無乳腺癌、糖尿?。凰谢颊叩奶悄虿≡\斷均采用1999年WHO制訂的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定[5]。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在急慢性感染的患者；存在嚴(yán)重肝腎功能障礙的患者；對照組同時排除乳腺癌和其他惡性腫瘤。四組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 主要儀器 全自動酶標(biāo)儀（美國THEROM公司），高速臺式冷凍離心機(jī)，普通冰箱（青島海爾公司），移液器（p-10/p-200/p-1000）（德國Eppendorf公司），超凈化工作臺。

1.3 試劑 血清瘦素（Leptin，LEP）試劑盒（美國eBioscience公司）；胰島素檢測試劑盒（美國eBioscience 公司）；C反應(yīng)蛋白（CRP）測定試劑盒（德國Diasays公司）。

1.4 檢測方法 160例受試者均過夜空腹8 h以上，次晨靜脈采血，離心分離血清，立即置于-20 ℃冰箱保存，集中測定。

1.4.1 血清LEP水平 使用人LEP酶聯(lián)免疫測定試劑盒（Human Leptin Enzyme-Linked Immunosorbent Kit）采用ELISA方法測定受檢者血清LEP水平，操作嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)行。按照說明書配置洗滌液和分析液，用分析液將樣品稀釋至25倍。將含有標(biāo)準(zhǔn)品的溫控放置在A1-H1的位置，將100 μL雙蒸水加入樣品孔，隨后分別在標(biāo)準(zhǔn)孔和樣品孔當(dāng)中加入雙蒸水各150 μL，完成后將已經(jīng)稀釋的樣品50 μL計入，隨后封板。在常溫下靜置3 h，洗板拍干后，在每個微孔加入100 μL底物溶液，避光放置10 min。完成后快速給每個孔加入100 μL終止液[6-7]。在1 h內(nèi)采用酶標(biāo)儀測定各個孔的吸光度，計算樣品濃度。

1.4.2 胰島素測定 采用酶聯(lián)免疫法測定法（ELISA）測定空腹血漿胰島素（FINS），操作嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行。分別對四組患者的血清瘦素水平、空腹血漿胰島素（FINS）進(jìn)行測定。

1.4.3 CRP測定 采用酶聯(lián)免疫測定法，采用96孔反應(yīng)試劑盒進(jìn)行測定，標(biāo)本采用平行雙孔實(shí)驗(yàn)，操作嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行，應(yīng)用酶標(biāo)儀進(jìn)行吸光度檢測。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

A組、B組、C組的血清胰島素、瘦素及CRP水平均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.816，P<0.01，t=5.162，P<0.01，t=3.164，P<0.01；t=3.272，P<0.05，t=2.578，P<0.05，t=4.437，P<0.05；t=2.491，P<0.01；t=4.520，P<0.01，t=3.340，P<0.01），見表1。

*與對照組比較，P<0.01；△與對照組比較，P<0.05

3 討論

乳腺癌是婦科疾病中常見的一種惡性腫瘤，近年來，乳腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)出上升趨勢，主要在45～50歲人群中發(fā)病率較高，目前對于乳腺癌的發(fā)病機(jī)制還不是很明確，但是遺傳因素、抑郁情緒、生育狀況、不良的生活習(xí)慣等都有可能會引發(fā)乳腺癌，早期乳腺癌的臨床表現(xiàn)不是很明顯，患者大多是在出現(xiàn)較為明顯的臨床癥狀或者體檢過程中發(fā)現(xiàn)，有明顯癥狀的患者主要表現(xiàn)為乳腺腫塊、皮膚改變、乳頭異常等。做好早期的診斷對于及時的治療以及改善患者的生活質(zhì)量具有重要影響[8]。

近年來，糖尿病與乳腺癌之間的關(guān)系研究逐漸得到醫(yī)學(xué)界更多的重視，且眾多的研究數(shù)據(jù)顯示糖尿病與乳腺癌之間的關(guān)系密切，且已經(jīng)成為了一項(xiàng)造成糖尿病患者出現(xiàn)乳腺癌的因素之一。大量的研究數(shù)據(jù)表明，糖尿病患者發(fā)生惡性腫瘤的概率顯著高于健康人群。褚美珍等[9]采用回顧性分析，發(fā)現(xiàn)2型糖尿病可能是乳腺癌的一個潛在預(yù)后不良的因素。對2型糖尿病合并乳腺癌的患者更應(yīng)加強(qiáng)術(shù)后隨訪，以便盡早發(fā)現(xiàn)包括第二原發(fā)癌在內(nèi)的腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)事件。文獻(xiàn)[10]表明T2DM與乳腺癌存在關(guān)聯(lián)，高血糖、高胰島素血癥以及胰島素樣生長因子對乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展具有重要作用。目前，能夠?qū)θ橄侔┻M(jìn)行早期診斷的方式在降低乳腺癌死亡率方面大有益處。胰島素能夠促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂、抑制細(xì)胞凋亡。Rose等[11]研究證明在體外胰島素通過磷脂酰肌醇3激酶和絲裂原活化蛋白激酶/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路刺激一些人類乳腺癌細(xì)胞株增殖。同時，胰島素還能夠通過旁分泌機(jī)制，刺激乳腺癌細(xì)胞增生，進(jìn)而加重乳腺癌的病情[12-13]。在針對絕經(jīng)后女性的調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗和高胰島素血癥是乳腺癌發(fā)生的獨(dú)立危險因素[14]，本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌合并糖尿病患者的血清胰島素、瘦素、CRP均明顯升高，其中以乳腺癌合并糖尿病組患者的水平最高。由于患者體內(nèi)的瘦素分泌受到胰島素的調(diào)節(jié)，糖尿病患者的胰島素水平明顯提高，進(jìn)而對瘦素的升高形成刺激作用，在數(shù)據(jù)特點(diǎn)上，瘦素與胰島素之間呈現(xiàn)出一種正相關(guān)的關(guān)系，進(jìn)而刺激乳腺癌細(xì)胞增生。而單純2型糖尿病患者的胰島素水平明顯較高。

瘦素（Leptin，LEP）是肥胖基因OB表達(dá)產(chǎn)物，通常具有促進(jìn)能量消耗的作用。研究發(fā)現(xiàn)LEP還具有免疫調(diào)節(jié)和抗炎作用，對創(chuàng)傷愈合、代謝和生殖功能有重要影響[15]。在人體的乳腺、脂肪組織和胰島細(xì)胞表面當(dāng)中，瘦素有著廣泛的分布。研究發(fā)現(xiàn)肥胖患者中瘦素水平增高是乳腺癌發(fā)病的危險因素，并且瘦素增高是乳腺癌預(yù)后不良的因素之一[16]；盛俊等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌MCF-7細(xì)胞中，LEP可能通過STAT3途徑促進(jìn)hTERT（端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶）的表達(dá)，并最終上調(diào)端粒酶的活性。而在腫瘤細(xì)胞中端粒酶活性的增加是極為重要的，并與其侵襲表型密切相關(guān)。陳薇等[18]的研究在中國人群中證實(shí)了OB和ObR在乳腺癌組織中廣泛表達(dá)，陽性率分別為79.8%和85.1%，且OB與ObR的表達(dá)相關(guān)（r=0.342，P<0.01）。

本次研究中，LEP在2型糖尿病時的表達(dá)升高，而單純?nèi)橄侔┗颊叩腖EP也明顯升高，而乳腺癌合并糖尿病組患者的水平升高最為明顯，三組患者的LEP與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），明確LEP水平的升高是2型糖尿病合并乳腺癌的危險因素。

C反應(yīng)蛋白（CRP）是一種能與肺炎鏈球菌C多糖反應(yīng)的急性時相蛋白，在組織損傷、感染等刺激下，被激活的單核細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素-1（IL-1），刺激肝細(xì)胞加速合成CRP。機(jī)體受到傷害和組織損傷后，CRP水平迅速升高，對參與宿主的防御、控制炎癥有重要作用[19]。Rolland等[20]研究證實(shí)，CRP與乳腺癌的發(fā)生有密切關(guān)系。本次研究顯示，A、B、C三組患者的血清CRP指標(biāo)均明顯提高，且以乳腺癌合并糖尿病患者的增高水平最為顯著，提示糖尿病與乳腺癌之間的關(guān)系密切。本研究中，乳腺癌合并糖尿病患者的CRP水平比其他三組都高，且2型糖尿病組患者也明顯高于對照組（P<0.05）。而單純2型糖尿病患者的CRP水平也顯著升高，推測可能是單純2型糖尿病患者的血清胰島素較高，胰島素能夠促進(jìn)蛋白細(xì)胞形成，并對纖維蛋白原和CRP合成形成抑制作用[21]。且2型糖尿病患者存在胰島素抵抗，胰島素敏感性較低，導(dǎo)致CRP合成明顯增加。

本研究通過檢測四組患者的血清瘦素水平，A組、B組、C組均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），表明瘦素與乳腺癌合并糖尿病、單純?nèi)橄侔渭?型糖尿病之間的關(guān)系密切。通過此研究，表明胰島素、瘦素及CRP是2型糖尿病患者發(fā)生乳腺癌的預(yù)測因子，這三項(xiàng)指標(biāo)可以作為2型糖尿病患者早期診斷乳腺癌的有效檢測指標(biāo)。

綜上所述，血清胰島素、瘦素及CRP在乳腺癌合并糖尿病、單純?nèi)橄侔渭?型糖尿病患者中均有顯著的表達(dá)，通過對不同類型患者的血清胰島素、瘦素及CRP表達(dá)水平的比較，表明以上三項(xiàng)指標(biāo)可以作為乳腺癌合并2型糖尿病的預(yù)測指標(biāo)，對該病的早期診斷與治療具有積極的臨床意義。

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（收稿日期：2016-10-19） （本文編輯：張爽）