益母生化飲長期穩(wěn)定性研究

馬夢黎 莊彥 侯躍華 文金隆 孫嬌 陳建芬

摘要：目的根據(jù)益母生化飲的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對其穩(wěn)定性進(jìn)行考察。方法按長期穩(wěn)定性試驗方法對其質(zhì)量進(jìn)行穩(wěn)定性跟蹤考察。結(jié)果益母生化飲質(zhì)量穩(wěn)定，有效期可定為2年。結(jié)論在現(xiàn)行的包裝材料、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的控制下，經(jīng)2年考查益母生化飲質(zhì)量穩(wěn)定。

關(guān)鍵詞：益母生化飲；質(zhì)量；穩(wěn)定性研究

中圖分類號：R283文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B文章編號：1007-2349（2017）01-0079-02

益母生化飲是玉溪市中醫(yī)醫(yī)院自主研發(fā)的院內(nèi)制劑，由當(dāng)歸、赤芍、益母草等10味中藥組成，具有益氣健脾、活血化瘀、溫經(jīng)止痛的功效。用于產(chǎn)后惡露不絕，小腹冷痛，氣血虛月經(jīng)不調(diào)等。批準(zhǔn)文號：滇藥制字（Z20082810F）。首次獲批效期為6個月。隨著臨床用量的擴大，生產(chǎn)量也在逐漸增大。效期短成為嚴(yán)重影響日常生產(chǎn)與使用的瓶頸。為考察其質(zhì)量穩(wěn)定性，本試驗依據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和長期穩(wěn)定性實驗方法，對其質(zhì)量進(jìn)行2年的考查?，F(xiàn)將有關(guān)結(jié)果報道如下。

1儀器與試藥

SB5200DT超聲波清洗器（SHANGHAI BRANSON）；BSA224S電子天平（塞多利斯科學(xué)儀器有限公司）；H·H·S21-4B恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械五廠）；ZF-2型三用紫外儀（上海安亭電子儀器廠）；303-□型隔水式培養(yǎng)箱（上海金滬電熱儀器聯(lián)營廠）；隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海市躍進(jìn)醫(yī)療器械一廠）；YJ-1300A醫(yī)用凈化工作臺（蘇州凈化設(shè)備公司）；PHS-3C型PH計（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；附溫比重瓶（江蘇海門市測溫儀器廠）。

當(dāng)歸對照藥材（中國食品藥品檢定研究院，批號：120927-200315）；芍藥苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：0736-200219）；試劑均為分析純。試藥益母生化飲（20080703、20090104、20090919），蒸餾水均為自制。

2方法

實驗按照“益母生化飲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)”，參考《中國藥典》2005版二部附錄XIX C）的第二部份 藥物制劑項下（二）長期試驗的相關(guān)規(guī)定。將3批待考查的供試品，市售包裝在溫度（25±2）℃，相對濕度60%±10%的條件下放置24個月。每3個月取樣一次，分別于0、3、6、9、12、18、24個月取樣，按照益母生化飲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)項下的方法進(jìn)行檢測。

2.1性狀本品為棕色至棕褐色的液體；久置可產(chǎn)生經(jīng)振搖易散的沉淀。味苦、微甘。

2.2鑒別

2.2.1取益母生化飲100 mL，加乙醚30 mL振搖提取，分取乙醚液，濾液揮至1 mL，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材0.5 g，加乙醚30 mL，超聲處理5 min，濾過，濾液揮至1 mL，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄 VI B）試驗，吸取供試品溶液10～15 μL、對照品溶液10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（19：1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜主斑點相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

2.2.2取益母生化飲100 mL，置水浴上蒸干，加乙醇20 mL，分兩次溫?zé)釘嚢枞芙猓瑸V過。濾液蒸至近干，殘渣加水15 mL，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇溶液20 mL分兩次振搖提取，合并正丁醇提取液。用正丁醇飽和的水15 mL分兩次洗滌，正丁醇液蒸干，加乙醇4 mL分兩次溶解，乙醇液通過聚酰胺柱（聚酰胺5 g，內(nèi)徑1.2 cm），用水50 mL洗脫，洗脫液蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄 VI B），吸取供試品溶液10～15 μL、對照品溶液8～10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。

2.2.3吸取[鑒別]（2）項下未通過聚酰胺柱前的第一次乙醇溶解液，點于濾紙上（宜分多次點樣，注意勿使斑點擴散過大）晾干溶劑，沿點樣處滴加稀碘化鉍鉀試液，斑點呈橘紅色圈。

2.3通則檢查項

2.3.1PH值參照《中國藥典》2005年版一部PH值測定法，結(jié)果應(yīng)為4.0～5.5。

2.3.2相對密度參照《中國藥典》2005年版一部相對密度測定法，結(jié)果應(yīng)不低于1.01。

2.3.3微生物限度參照《中國藥典》2005年版一部微生物限度檢查法，結(jié)果：細(xì)菌數(shù)<100 cfu/g；霉菌和酵母菌數(shù)<100 cfu/g；大腸埃希菌不得檢出。

3結(jié)果

3.1性狀3、6、9、12、18、24個月與0月比較，隨著時間的變化，合劑顏色略變淺，沉淀物略有增加，經(jīng)振搖均可分散。24月觀察玻璃瓶上略有色素附著。

3.2鑒別當(dāng)歸、赤芍的薄層鑒別，3、6、9、12、18、24個月與0月比較，均檢出與對照藥材或?qū)φ掌废鄬?yīng)的斑點；

益母草生物堿定性鑒別項，3、6、9、12、18、24個月與0月比較，均顯正反應(yīng)。即鑒別項均符合規(guī)定。

3.3pH值3、6、9、12、18、24個月與0月比較，3批益母生化飲的pH值在0.1范圍波動，結(jié)果符合規(guī)定。結(jié)果見表1。

3.4相對密度3、6、9、12、18、24個月與0月比較，3批益母生化飲的PH值無明顯變化，結(jié)果符合規(guī)定。試驗結(jié)果見表2。

3.5微生物限度3、6、9、12、18、24與0月比較，3批益母生化飲均細(xì)菌數(shù)<100 cfu/g，霉菌數(shù)<100 cfu/g，大腸埃希菌未檢出。符合規(guī)定。

4討論

4.1該制劑采用傳統(tǒng)湯藥的煎煮方法，不添加任何防腐劑，結(jié)合現(xiàn)代濕熱蒸汽滅菌技術(shù)制作而成。包裝采用玻璃輸液瓶，瓶蓋為溴化丁基膠塞，以鋁蓋加壓密封而成。成品是一個密封的液體制劑，制劑不開封基本處于一個無菌狀態(tài)。在24個月的長期穩(wěn)定性實驗中，性狀隨貯存時間的延長略有改變，顏色略變淺，沉淀物略有增多，但經(jīng)振搖均可分散均勻，所以注意事項注明服時搖勻?？紤]可能因組方復(fù)雜，其中存在的某些高分子物質(zhì)可能引起沉淀。三個鑒別項在規(guī)定時間均能檢出，且無明顯區(qū)別。提示三個鑒別項在該狀態(tài)下基本穩(wěn)定。相對密度項結(jié)果基本不變。在中藥制劑中，相對密度一定程度上可指控溶液的濃稠程度。相密度基本不變提示制劑的整體濃度未發(fā)生明顯變化。pH值在一個較小范圍波動，統(tǒng)計無意義，考慮可能是實驗誤差。微生物檢測均無菌生長。pH值與制劑微生物污染密切相關(guān)，中藥的酸敗變質(zhì)時，pH值和微生物檢測均會出現(xiàn)明顯變化。該制劑開蓋敞口在空氣中放置，有的三天后逐漸出現(xiàn)酸敗現(xiàn)象。pH值檢測明顯異常，微生物檢測也不合格。所以在注意事項中特別提出本品開封后應(yīng)在2日內(nèi)服完。

4.2該制劑長期穩(wěn)定性實驗按實際批量生產(chǎn)的產(chǎn)品在規(guī)定條件下進(jìn)行，24個月長期試驗結(jié)果表明，在現(xiàn)有生產(chǎn)工藝、規(guī)格、包裝材料和包裝工藝條件下制成的益母生化飲，在試驗條件下質(zhì)量穩(wěn)定。根據(jù)長期穩(wěn)定性試驗?zāi)康氖菫榱酥朴喫幤返挠行谔峁┮罁?jù)，可定有效期為2年。

4.3在傳統(tǒng)湯藥的應(yīng)用中，空氣中微生物污染導(dǎo)致湯藥不能長期貯存。該制劑采用的工藝和包材很好地解決了這個問題，使最終產(chǎn)品為無菌制劑，從而解決了微生物污染問題。我院已將該工藝用于多個臨床經(jīng)驗方的初期產(chǎn)品開發(fā)使用中，均獲得不錯的效果。對于濕熱蒸汽滅菌技術(shù)在中藥制劑的適應(yīng)性以及相關(guān)技術(shù)參數(shù)，課題組將進(jìn)一步立題進(jìn)行研究。

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（收稿日期：2016-09-08）