bFGF和Endostatin在宮頸癌中的表達(dá)

柴姣

【摘 要】目的：探討堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）和內(nèi)皮抑素（endostatin）在宮頸癌侵襲性發(fā)生中的作用。方法：應(yīng)用免疫組化法測(cè)定75例宮頸癌標(biāo)本中bFGF和endostatin的表達(dá)水平。結(jié)果：bFGF和endostatin在宮頸癌組織中的表達(dá)都與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，bFGF與endostatin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論：宮頸癌侵襲性的發(fā)生可能與bFGF的表達(dá)增高和endostatin的表達(dá)下調(diào)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】宮頸癌 bFGF endostatin 免疫組化

大量研究表明，腫瘤的侵襲性與其血管的生成密切相關(guān)，而血管的形成受到內(nèi)源性刺激因子和抑制因子之間的相互作用。癌基因可通過對(duì)各種血管促進(jìn)因子和抑制因子表達(dá)的調(diào)控，打破腫瘤中血管的生成平衡，增加血管形成，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。bFGF和endostatin在血管形成平衡的調(diào)控中分別起著促進(jìn)和抑制血管生成的關(guān)鍵作用。本實(shí)驗(yàn)通過研究bFGF和endostatin在宮頸癌中的表達(dá)，探討bFGF和endostatin與宮頸癌血管生成及侵襲性的關(guān)系。

1 材料與方法

（1）研究對(duì)象 標(biāo)本隨機(jī)取自安陽市第三人民醫(yī)院收入切除的存檔蠟塊75例。中位年齡61歲（41—71歲）。常規(guī)淋巴結(jié)檢查淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例。所有標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋切片?？贵w及免疫組化試劑盒均購(gòu)自北京中杉公司。

（2）采用免疫組化S-P法：切片常規(guī)脫蠟水化，高壓抗原熱修復(fù)，其余步驟按照試劑說明書上進(jìn)行。兩者的抗體稀釋度均為1：80。用已知陽性切片做陽性對(duì)照，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

（3）結(jié)果判定：細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)見均勻一致的棕黃色顆粒為陽性，根據(jù)陽性細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行結(jié)果判定，陽性細(xì)胞數(shù)<5%為陰性，陽性細(xì)胞數(shù)≥5%為陽性。

（4）統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的的宮頸癌組織中bFGF表達(dá)的陽性率為81.3%（39/48），無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組織陽性率為33.3%（9/27），兩者差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組織中endostatin表達(dá)的陽性率為37.5%（18/48），無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組織中endostatin表達(dá)的陽性率為74.1%（20/27），兩者差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)，bFGF和endostatin的表達(dá)存在負(fù)相關(guān)關(guān)系。

3 討論

bFGF是重要的促有絲分裂因子，也是形態(tài)發(fā)生和分化的誘導(dǎo)因子。其主要生物學(xué)作用有：（1）作為血管生長(zhǎng)因子；（2）促進(jìn)組織再生；（3）促進(jìn)創(chuàng)傷愈合與組織修復(fù)；（4）參與神經(jīng)再生等。bFGF是最早發(fā)現(xiàn)的一種血管形成因子，它能夠促進(jìn)腫瘤新生血管的形成，加快腫瘤生長(zhǎng)，在腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮重要作用[1]。研究表明，在大腸癌[2]、食管癌、肝癌等多種惡性腫瘤的晚期，均伴有bFGF表達(dá)的增高。本次實(shí)驗(yàn)中，bFGF在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌中和不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌相比表達(dá)增高，這提示它可能參與了宮頸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

內(nèi)皮抑素是一種內(nèi)源性血管生成抑制劑，為20kd 分子量的蛋白質(zhì)。endostatin是一種內(nèi)源性血管生成抑制因子，大量研究發(fā)現(xiàn)[3]，它能特異性的抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管生成，從而抑制腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移。在本實(shí)驗(yàn)中，endostatin在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達(dá)降低，其與宮頸癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，這提示endostatin的表達(dá)降低可能與宮頸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有關(guān)，endostatin的表達(dá)產(chǎn)物可能具有抑制宮頸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的作用。

bFGF和endostatin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示bFGF的表達(dá)增高和endostatin的表達(dá)降低可能共同參與了宮頸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。兩者在宮頸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中具體的作用機(jī)制，以及還有那些基因參與了宮頸癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，這些我們將在以后的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]Pien Tze Huang inhibits tumor angiogenesis in a mouse model of colorectal cancer via suppression of multiple cellular pathways.Shen A， Lin J， Chen Y， Lin W， Liu L， Hong Z， Sferra TJ， Peng J.Oncol Rep. 2013 Oct；30（4）：1701-1706.

[2]The clinical implications of platelet derived growth factor B， vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor in colorectal cancer.Ionescu C， Berindan-Neagoe I， Burz C， Balacescu O，et al.2011 Apr-Jun；16（2）：274-276.

[3]Comparisons of biophysical properties and bioactivities of mono-PEGylated endostatin and an endostatinanalog.Wang S， Fu Y， Luo Y.Chin J Cancer. 2016 Jan 20；35：14.