結(jié)締組織生長因子的檢測在腦膠質(zhì)瘤患者中的應(yīng)用意義

張碩

[摘要]目的研究分析結(jié)締組織生長因子在人腦膠質(zhì)瘤腫瘤組織中的表達(dá)情況，進(jìn)一步探討其表達(dá)結(jié)果與腫瘤分級情況的關(guān)系。方法選取本院2013年10月～2015年10月間本院腫瘤科收治的腦膠質(zhì)瘤患者93例作為本次研究的觀察分析對象，作為研究組，同時將研究組按照腦膠質(zhì)瘤等級劃分標(biāo)準(zhǔn)分成四級，其中Ⅰ級21例、Ⅱ級32例、Ⅲ級26例和Ⅳ級14例，并同時選取正常腦組織30例作為對照，即為對照組。采用免疫熒光定時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法針對所選研究對象的腦組織中結(jié)締組織生長因子進(jìn)行檢測，進(jìn)一步分析結(jié)締組織生長因子的表達(dá)與人腦膠質(zhì)瘤級別的關(guān)系。并比較研究組治療前后該因子的表達(dá)情況。結(jié)果研究組腦組織中結(jié)締組織生長因子水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。不同腫瘤分級與結(jié)締組織生長因子水平相關(guān)性分析結(jié)果顯示，二者間具有一定相關(guān)性，且正向相關(guān)。即腫瘤分級患者的結(jié)締組織生長因子水平隨著腫瘤級別的升高結(jié)締組織生長因子水平也隨之升高，此外，研究組治療前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論研究表明，結(jié)締組織生長因子在人腦膠質(zhì)瘤患者中表達(dá)情況與腫瘤分級有著密切的聯(lián)系，且呈正向相關(guān)，因此，結(jié)締組織生長因子可以作為人腦膠質(zhì)瘤診斷的參考依據(jù)，同時還可作為腫瘤惡性程度高低的判斷，對于臨床預(yù)后判斷也有一定的價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]結(jié)締組織生長因子；腦膠質(zhì)瘤；檢測；應(yīng)用價(jià)值

腦膠質(zhì)瘤是腫瘤科常見的顱內(nèi)惡性腫瘤，鑒于該類腫瘤具有自身獨(dú)特的腫瘤生長環(huán)境，一般臨床治療較為困難。本病的診斷以及惡性程度的判斷也一直困擾著臨床醫(yī)生。結(jié)締組織生長因子是在1991年首次發(fā)現(xiàn)的一種在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞條件下培養(yǎng)出的一種分泌肽，人體結(jié)締組織生長因子基因是一種早期快速反應(yīng)的基因，最早有研究發(fā)現(xiàn)這種因子能夠促進(jìn)有絲分裂，同時還具有促進(jìn)血管形成的作用。在不同的腫瘤組織中結(jié)締組織生長因子的表達(dá)存在不同程度的差異。而有關(guān)結(jié)締組織生長因子表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤之間的關(guān)系的研究目前還比較少。有研究同時實(shí)驗(yàn)證實(shí)其在腦膠質(zhì)瘤腫瘤組織中呈高表達(dá)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取自2013年10月～2015年10月問本院腫瘤科收治的人腦膠質(zhì)瘤患者93例作為本次研究的對象，作為研究組，其中男51例，女42例，年齡14～73歲，平均（51.0±5.3）歲。按照腫腦膠質(zhì)瘤等級劃分標(biāo)準(zhǔn)（Ⅰ級：一般為良性，以毛細(xì)胞型星形細(xì)胞為主，占膠質(zhì)瘤的5%左右；Ⅱ級：一般是星形細(xì)胞瘤或者星形一少突細(xì)胞瘤，占膠質(zhì)瘤30%～40%；Ⅲ級：主要為問型星形細(xì)胞瘤，占膠質(zhì)瘤15%～25%，通常由Ⅱ級演變而來；Ⅳ級：為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，占膠質(zhì)瘤的1/3）分成四級，其中Ⅰ級21例、Ⅱ級32例、Ⅲ級26例和Ⅳ級14例。并同時選取同期在院進(jìn)行顱內(nèi)減壓手術(shù)的顱腦損傷患者的正常腦組織標(biāo)本30份作為對照，其中男16例，女14例，年齡15～74歲，平均（50.5±6.0）歲。兩組年齡、性別等一般資料進(jìn)行比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具有可比性。

1.2試劑、設(shè)備及檢測方法

總RNA提取（采用源自上海申能博彩生物技術(shù)有限公司的Total RNA Purification Kit RNA快速制備試劑盒）及cDNA的轉(zhuǎn)錄合成，具體操作方法嚴(yán)格按照內(nèi)附的說明書進(jìn)行操作。結(jié)締組織生長因子基因的表達(dá)采用熒光定量PCR檢測儀進(jìn)行檢測。

1.3研究方法

本次研究通過對比正常人體腦組織和腦膠質(zhì)瘤患者腫瘤組織中的結(jié)締組織生長因子的表達(dá)結(jié)果，綜合分析結(jié)締組織生長因子在腦膠質(zhì)瘤的診斷方面的應(yīng)用價(jià)值；通過對比腫瘤不同分級患者結(jié)締組織生長因子表達(dá)，分析其對于腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度的判斷；此外通過對比腦膠質(zhì)瘤患者治療前后結(jié)締組織生長因子的變化情況，分析其對于判斷腦膠質(zhì)瘤患者臨床預(yù)后的價(jià)值。

1.4觀察指標(biāo)

主要觀察研究對象腦組織結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)情況。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS18.0對本次研究所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者腦組織中結(jié)締組織生長因子的表達(dá)情況比較

經(jīng)過對比兩組結(jié)果發(fā)現(xiàn)，研究組中腦膠質(zhì)瘤患者腦組織結(jié)締組織生長因子的表達(dá)明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），這一結(jié)果提示腦膠質(zhì)瘤患者腦組織結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)情況較健康人而言，顯著升高。因此，可以將結(jié)締組織生長因子在腦組織內(nèi)的相對表達(dá)作為診斷腦膠質(zhì)瘤的重要指標(biāo)。見表1。

2.2研究組中不同惡性程度患者的腫瘤組織內(nèi)的結(jié)締組織生長因子相對表達(dá)情況比較

四組患者腫瘤組織內(nèi)的結(jié)締組織生長因子相關(guān)性分析，r=0.924，具有相關(guān)性，可以進(jìn)行比較。隨著腫瘤惡性程度的不斷升高，腫瘤組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子相對表達(dá)較高，這一結(jié)果提示腦組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)情況可以作為判斷腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度的重要指標(biāo)，見表2。

2.3研究組治療前后腦組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子表達(dá)情況比較

結(jié)果顯示，經(jīng)過治療后，研究組患者結(jié)締組織生長因子表達(dá)明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果表明，腦組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)情況可以作為腦膠質(zhì)瘤患者臨床預(yù)后效果的判斷指標(biāo)，通常情況下經(jīng)過治療后，結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)有所下降，若未見下降則表治療效果不佳，需進(jìn)一步改進(jìn)治療方案。見表3。

3討論

膠質(zhì)瘤是常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤，其臨床預(yù)后一般較差，特別是腫瘤級別較高膠質(zhì)瘤。腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見的惡性腫瘤，一般采用術(shù)后結(jié)合化療的方式進(jìn)行治療。有臨床研究者表示，腫瘤的分級越高患者臨床預(yù)后越差，并且術(shù)后患者的生存期越短，但組織學(xué)檢查一般受病理學(xué)的限制，然而分子生物學(xué)技術(shù)將對該類腫瘤的研究上升到基因分子水平，進(jìn)一步為腦膠質(zhì)瘤的治療提供便利。組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子屬于CCN家族，是一種早期基因，其編碼的蛋白具有較強(qiáng)的趨化性和撕裂原性，能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞增值、分泌細(xì)胞外基質(zhì)，并參與細(xì)胞增殖和分化。從組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的促有絲分裂作用以及在腫瘤中的高表達(dá)可初步判斷其在腫瘤發(fā)展過程中的意義。但在不同的腫瘤組織中組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的表達(dá)情況不同，有的呈高表達(dá)，有的呈低表達(dá)。

目前有關(guān)組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制還不明確，有研究者指出可能與腫瘤以及周圍問質(zhì)微環(huán)境有關(guān)（如微血管的生成），腫瘤組織的生長有賴于新生血管的生成，腫瘤的惡性程度一般與血供有關(guān)，且一般呈正相關(guān)。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)資料報(bào)道，組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子無論是在體外還是體內(nèi)均具有促進(jìn)血管生成的作用，并且通過試驗(yàn)還證實(shí)了內(nèi)源性組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的表達(dá)情況還與血管內(nèi)皮細(xì)胞的增值、遷移息息相關(guān)。也有研究者表示，組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子之所有能夠促進(jìn)腫瘤的生長，還可能是對細(xì)胞凋亡的抑制作用導(dǎo)致。有研究者通過對比癌組織與癌旁組織組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相關(guān)性表達(dá)發(fā)現(xiàn)，癌組織內(nèi)組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的表達(dá)程度明顯高于癌旁組織，并且癌旁組織間質(zhì)中微血管的密度又明顯高于正常的組織，并且生長速度較快。這一結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子是誘導(dǎo)和促進(jìn)腫瘤組織發(fā)展的重要調(diào)控因子之一。此外，還有研究通過對比不同腫瘤分級患者腫瘤組織中組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，Ⅰ～Ⅱ級腫瘤患者中組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)為（229.7±143.7）%，在Ⅱ～Ⅲ級腫瘤患者腦組織中組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子相對表達(dá)為（394.8±246.2）%，而在Ⅲ～Ⅳ級腫瘤患者腦組織中組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)為（564.0±367.9）%，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，伴隨腫瘤分級的增加，組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的含量呈現(xiàn)上升趨勢。這一研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子對于膠質(zhì)瘤的進(jìn)展具有至關(guān)重要的作用。有關(guān)以上論點(diǎn)通過本次研究結(jié)果也可以看出，從比較研究組和對照組腦組織內(nèi)的組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子表達(dá)發(fā)現(xiàn)，研究組患者表達(dá)明顯高于對照組。并且比較研究組中不同腫瘤級別患者腦組織中組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，Ⅳ級腫瘤患者腦組織內(nèi)組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子表達(dá)明顯高于前三級，Ⅲ級患者組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子相對表達(dá)又較Ⅱ級、Ⅰ級高，Ⅱ級相對表達(dá)較Ⅰ級高。本次研究結(jié)果與很多研究成果一直，均證實(shí)了組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子在組織內(nèi)的相對表達(dá)情況與腫瘤的分級相關(guān)，并且呈正相關(guān)。

目前出現(xiàn)了另一種有關(guān)組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子促腫瘤生長的相關(guān)機(jī)制。腫瘤的發(fā)生一般與細(xì)胞周期的紊亂導(dǎo)致的細(xì)胞出現(xiàn)無法控制的增值相關(guān)，其中促進(jìn)有絲分裂進(jìn)一步導(dǎo)致組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子在腫瘤組織中的高表達(dá)。透過本次研究結(jié)果可以看出組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子在腦膠質(zhì)瘤患者臨床診斷以及治療和臨床預(yù)后中的重要意義，通過表1可以得出，臨床中可以通過分析腦組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的超高表達(dá)性對其作出進(jìn)一步診斷，也可以根據(jù)其相對表達(dá)的程度對腫瘤的嚴(yán)重程度進(jìn)行判斷。通常情況下，其表達(dá)隨著腫瘤級別的增加表達(dá)也增加。本研究結(jié)果進(jìn)一步說明了，其可以作為臨床治療效果的評價(jià)，實(shí)施治療后的患者組織內(nèi)結(jié)締組織生長因子的相對表達(dá)會隨著疾病的好轉(zhuǎn)而下降。這一結(jié)果可以初步證明，結(jié)締組織生長因子能夠提示膠質(zhì)瘤患者臨床預(yù)后效果。

綜上所述，結(jié)締組織生長因子對于膠質(zhì)瘤患者的臨床診療具有重要的意義，同時還能提示患者臨床預(yù)后，值得臨床參考應(yīng)用。