艾滋病、成人T淋巴細(xì)胞白血病的感染與血清學(xué)檢驗(yàn)

●曾小敏

艾滋病、成人T淋巴細(xì)胞白血病的感染與血清學(xué)檢驗(yàn)

●曾小敏

艾滋病、成人T淋巴細(xì)胞白血病目前尚無(wú)根治方法，患病后對(duì)人類(lèi)生命安全威脅較大，如了解其感染傳播途徑，從根本上切斷感染源，對(duì)于保證健康意義重大，早期進(jìn)行有效的疾病診斷，早期采取措施進(jìn)行治療，可在一定程度上遏制疾病進(jìn)展。

艾滋??；成人T淋巴細(xì)胞白血病；感染；血清學(xué)檢查

現(xiàn)在臨床行血清學(xué)常規(guī)檢驗(yàn)的內(nèi)容已經(jīng)包括艾滋病病毒抗體（HIV-1或H IV-2抗體）和成人T淋巴細(xì)胞白血病病毒抗體（ALT/HTLV-1抗體）檢查。美國(guó)，日本較早就已經(jīng)開(kāi)展了該項(xiàng)檢測(cè)[1]?，F(xiàn)對(duì)上述兩種疾病的傳播途徑，發(fā)病機(jī)理及現(xiàn)階段通用的血清學(xué)檢驗(yàn)方法進(jìn)行簡(jiǎn)要概述。

1 艾滋病

艾滋病全稱(chēng)獲得性免疫缺陷綜合征，發(fā)病原因?yàn)楦腥玖巳祟?lèi)免疫缺陷病毒。該病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，慢病毒亞科。最早在AIDS患者血液，淋巴結(jié)中得到。

1.1 傳播途徑

（1）男同性戀性生活或雙重（同性或異性）性接觸，具有較多性伴侶；（2）吸毒患者使用未經(jīng)消毒的注射器；（3）需輸血患者接受了含H IVⅧ因子或直接含HIV的血液發(fā)生感染；（4）母嬰傳播：母體感染病毒后經(jīng)胎盤(pán)感染胎兒或分娩時(shí)新生兒接觸母體血液而感染。因機(jī)體先天對(duì)HIV病毒無(wú)抵抗力，故在感染HIV后血清張可發(fā)現(xiàn)HIV-1或HIV-2 抗體[2]。

1.2 發(fā)病機(jī)理

人體感染HIV病毒后，并不會(huì)立即患病，該病毒在體內(nèi)潛伏數(shù)月或數(shù)年后才會(huì)發(fā)病。機(jī)體感染病毒后，病毒表面的糖蛋白GP120結(jié)合輔助T淋巴細(xì)胞CD4，病毒的RNA轉(zhuǎn)移至細(xì)胞內(nèi)，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下被分解為DNA進(jìn)入細(xì)胞核，繼而進(jìn)入各部位的宿主細(xì)胞。當(dāng)被侵入T細(xì)胞活化后，DNA再次轉(zhuǎn)錄為RNA，核蛋白轉(zhuǎn)化為病毒蛋白，結(jié)合細(xì)胞膜脂質(zhì)變?yōu)椴《绢w粒，破壞細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)。病毒顆粒被釋放后繼續(xù)感染其他T細(xì)胞，循環(huán)往復(fù)，病毒被大量繁殖。機(jī)體表現(xiàn)出免疫力降低，早期僅有輕癥AIDS相關(guān)復(fù)合病，隨著病情的加重，逐漸出現(xiàn)重癥AIDS，并伴各種病原微生物的感染。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)的全世界范圍內(nèi)的確診病例已達(dá)25萬(wàn)例，感染者約1000萬(wàn)，說(shuō)明疾病呈現(xiàn)蔓延趨勢(shì)。

2 成人T淋巴細(xì)胞白血病

疾病在1977年由日本人首先發(fā)現(xiàn)，日本西南地區(qū)患者所占比例較大，1981年日本人使用血清學(xué)方法證明了發(fā)現(xiàn)成人T淋巴細(xì)胞白血病病毒即ALT/HTLV-1。

2.1 ALT病型

根據(jù)其不同的臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果被分為三種類(lèi)型，分別為白血病型，淋巴瘤型及皮膚病型。

2.2 傳播途徑

目前可以確定的傳播方式主要有夫婦感染，親子感染，輸血感染。疾病的發(fā)病率約為1/1300，具有較高的死亡率，現(xiàn)已證實(shí)，ALT/HTLV-1抗體陽(yáng)性者肯定攜帶病毒[3]。

3 AIDS，HIV-1抗體檢測(cè)

目前所用的檢測(cè)手段主要包括酶聯(lián)免疫法，明膠微粒凝集法，酶染色法，蛋白印跡法，免疫熒光法，確證性ELISA法，放免沉淀法，Kcrpas法。這些檢查方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，對(duì)AIDS是HIV-1抗體初篩試驗(yàn)需通過(guò)兩種方法進(jìn)行，如初篩結(jié)果為陽(yáng)性，需最后再做一次確證性試驗(yàn)。

固相酶免疫法（示例為Abbott公司試劑盒） （1）試驗(yàn)原理：致敏于聚苯乙烯珠上精制的病毒包膜蛋白抗原，使被檢測(cè)血清中的抗體結(jié)合抗原，再結(jié)合酶標(biāo)記的抗人抗體行固相酶免間接試驗(yàn)。（2）明教微粒凝集試驗(yàn)：該檢查方法首創(chuàng)于1986年，檢查無(wú)需特殊設(shè)備，操作簡(jiǎn)單，可在2h內(nèi)快速得出結(jié)論，檢查方法為PA法，PA法檢查原理為HIV產(chǎn)生細(xì)胞MOLT-4/H IV-1 B的培養(yǎng)上清用蔗糖你讀李新發(fā)精制病毒，將其使用0.5%的NP40溶解后在家鞣酸作用后，于明膠粒子表面致敏，如被檢測(cè)血漿或血清中存在HIV-1抗體，則可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)。（3）確證性試驗(yàn)：試驗(yàn)方法為在聚苯乙烯珠上包被分子量為41kd的病毒包膜抗原和分子量為24kd病毒核蛋白抗原，使被檢測(cè)血清中的HIV-1抗體與兩種抗原發(fā)生反應(yīng)，再與酶標(biāo)記的抗人抗體做固相酶免疫間接試驗(yàn)，相較于篩檢試驗(yàn)，確證性試驗(yàn)的特異性更高[4]。

4 ALT/HTLV-1抗體的檢驗(yàn)

4.1 固相酶免疫試驗(yàn)

檢驗(yàn)原理及操作方法同上，使用去氧膽酸鈉溶解MT-2細(xì)胞精制抗原，將其使用微量板或特制帶蓋小杯固相，向其中加入被檢血清使其發(fā)生反應(yīng)，清洗后向其中加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgG單克隆抗體，以P-硝基苯磷酸二鈉做底物，顯色后加NaOH使反應(yīng)中終止，經(jīng)450nm對(duì)其吸光度進(jìn)行測(cè)定，判定檢查結(jié)果[5]。

4.2 明膠微粒凝集試驗(yàn)

檢驗(yàn)原理為使用緩沖液適當(dāng)稀釋被檢血清后，向其中加入TCL-Kan株培養(yǎng)上清病毒精制抗原致敏的明膠微粒，放置在室溫下，經(jīng)肉眼對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行判定。

5 小結(jié)

艾滋病、成人T淋巴細(xì)胞白血病早期病變較輕時(shí)，經(jīng)積極治療，疾病可得到有效控制，行血清學(xué)檢查，采用上述方法診斷，對(duì)于早期診斷出疾病，早期治療意義重大。臨床應(yīng)重視發(fā)展上述檢查方法[6]。

（作者單位：廣安市疾病預(yù)防控制中心）

[1] 單多,段松,高潔等.我國(guó)某艾滋病高流行地區(qū)主動(dòng)提供艾滋病檢測(cè)咨詢(xún)?cè)缙诎l(fā)現(xiàn)感染者狀況分析[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2015,49(11):962-966.

[2] 陳吳康,張曉菲,呂翠霞等.跨性別女性的特征及艾滋病相關(guān)知識(shí)行為調(diào)查[J].中華流行病學(xué)雜志,2016,37(1):76-79.

[3] 張玉潔,趙俊峰,祝慶等.受艾滋病影響兒童的自我和諧、感恩與人際信任[J].中國(guó)心理衛(wèi)生雜志,2013,27(12):907-912.

[4] 王文娟,孫愛(ài)寧,陳廣華等.成人急性T淋巴細(xì)胞白血病JAK1基因突變[J].江蘇醫(yī)藥,2011,37(8):908-910.

[5] 王曉桃,劉玲,唐愛(ài)林等.小白菊內(nèi)酯聯(lián)合阿霉素抑制白血病Jurkat細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J].臨床腫瘤學(xué)雜志,2014,(5):396-400.

[6] 姚利,陳子興,岑建農(nóng)等.成人急性T淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞受體β鏈基因重排的特點(diǎn)及其在微小殘留病定量檢測(cè)中的意義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,33(5):409-413.