• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    草甘膦對巴西橡膠樹芽接苗葉片莽草酸和4種激素含量的影響

    2017-01-21 15:02:34李曉娜潘敏王萌楊葉鄭服叢朱朝華
    熱帶農(nóng)業(yè)科學 2016年11期
    關鍵詞:草甘膦激素

    李曉娜+潘敏+王萌+楊葉+鄭服叢+朱朝華+張宇

    摘 要 為探究草甘膦誘導橡膠樹芽接苗葉片畸變的作用機理,以巴西橡膠樹品種‘熱研7-33-97芽接苗為材料,噴施188 g a.i/hm2的草甘膦劑量,分析芽接苗不同形態(tài)葉片莽草酸和4種激素含量變化規(guī)律。結果表明:莽草酸積累量在草甘膦施藥前后呈顯著差異,當葉片出現(xiàn)半黃半綠表型時,莽草酸積累量較未施藥前上升12.40%,而在2種再生畸形葉(葉片長度<7 cm和>7 cm)和恢復葉時分別下降75.01%、77.48%和62.69%;噴施草甘膦后各類型葉片生長素和赤霉素的含量均與未施藥前對照葉片差異不顯著,脫落酸和玉米素含量較對照差異顯著,半黃半綠葉片脫落酸含量較未施藥對照下降12.40%,玉米素較施藥前下降33.54%;2種再生畸形葉出現(xiàn)后,脫落酸含量較未施藥前分別升高30.40%和45.61%,玉米素分別升高41.48%和86.02%。說明莽草酸和植物激素共同調(diào)節(jié)著橡膠樹的生長,且影響了橡膠樹葉片畸形。

    關鍵詞 巴西橡膠樹 ;草甘膦 ;莽草酸 ;激素

    中圖分類號 S794.1 文獻標志碼 A Doi:10.12008/j.issn.1009-2196.2016.11.011

    Abstract The mechanism of glyphosate spraying on the induction to the distortion of the rubber tree grafting budding seedling leaf is unclear. In this study, rubber variety CATAS 7-33-97 grafting budding seedlings leaves sprayed 188 g a.i/hm2 of glyphosate dose, were used for analysis of shikimic acid and 4 kinds of hormone contents. Results show that the accumulation of shikimic acid in leaves before and after glyphosate spraying was significantly different. When in half yellow half green leaf phenotype, shikimic acid accumulation is up 12.40% before spraying, and in two regeneration deformed leaf (less than 7 cm and more than 7 cm length) and restoring leaf fell by 75.01%, 77.48% and 75.01%, respectively. Auxin and GA3 contents in various types of leaves after glyphosate spraying show no significant differences compared with leaves before spraying, while significant difference are found in content of abscisic acid and zeatin. Abscisic acid and zeatin contents in half yellow half green leaf fell by 12.40% and 33.54 than control leaf, respectively. In two regeneration deformed leaf, abscisic acid content is increased 30.40% and 30.40%, zeatin is increased 41.48% and 86.02% than control leaf, respectively. The results showed that shikimic acid and hormones regulated the growth of rubber tree together, and affected the the leaf of rubber tree distorted.

    Keywords Hevea brasiliensis Muell. Arg. ; glyphosate ; shikimic acid ; hormone

    草甘膦(Glyphosate)是由孟山都公司開發(fā)的高效、廣譜的內(nèi)吸傳導型滅生性除草劑[1]。在使用過程中草甘膦藥液飄移往往會使作物受到藥害,甚至會導致作物死亡[2]。草甘膦抑制5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(5-enolpyruvoylshikimate-3-phosphate-synthase, EPSPS)活性,導致莽草酸含量大量積累,從而影響植物細胞分裂和葉綠素等生理代謝功能[3]。莽草酸積累量是草甘膦對作物生理機制影響的重要指標[4-5]。

    生長素(Auxin, IAA)、玉米素(Zeatin, ZR)、赤霉素(Gibberellin, GA3)和脫落酸(Abscisic acid, ABA)是主要的植物內(nèi)源激素,與植物的基因表達、生長發(fā)育和代謝等過程密切相關[6]。IAA調(diào)控花序、花分生組織以及花器官的發(fā)育[7]。ABA在水分脅迫下對植物氣孔運動[8-9]、種子萌發(fā)、開花時間和果實成熟等生理過程中起到重要調(diào)節(jié)作用[10-12]。GA3促進種子萌發(fā)和植物生長[13],降低植物對逆境的抵御能力[14],在植物的生物合成和信號傳導方面發(fā)揮重要的作用[15]。ZR屬于細胞分裂素的一種,能夠促進細胞分裂、分化,維持蛋白質(zhì)合成的正常機能[16]。

    已有研究結果表明,在噴施草甘膦后,大豆的莽草酸積累量增加會使植株死亡[17]。草甘膦誘導棉花花藥中生長素、赤霉素、脫落酸和玉米素含量產(chǎn)生變化導致花粉?;蝃18-19]。在草甘膦的作用下,生長素含量的變化引起棉花和玉米葉片扭曲[20]。草甘膦與赤霉素作用可以促進玉米生長[21]。巴西橡膠樹(Hevea brasiliensis Muell. Arg.)幼苗生長過程中需要進行雜草防除,草甘膦噴施過程中會因人為、環(huán)境等因素沾濺到橡膠樹葉片上,被橡膠樹吸收傳導,導致草甘膦藥害產(chǎn)生。筆者推測,在草甘膦處理下,莽草酸和激素含量的變化會影響橡膠樹葉片畸形。因此,筆者采用巴西橡膠樹‘熱研7-33-97芽接苗為材料,探析草甘膦處理后巴西橡膠樹幼苗不同形態(tài)葉片中莽草酸和激素含量的變化規(guī)律,以期更深入地了解草甘膦對巴西橡膠樹幼苗葉片畸形的原因,為研究草甘膦對巴西橡膠樹作用機制打下良好的基礎。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    以中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院橡膠研究所培育的巴西橡膠樹品種‘熱研7-33-97一年生芽接苗為材料,芽接苗種植于海南大學環(huán)境與植物保護學院(儋州校區(qū))實驗基地,草炭土與粘土體積比例為3∶1的育苗袋中。

    41%草甘膦水劑,由浙江綠野農(nóng)化生物科技有限公司生產(chǎn)。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品采集

    將41%草甘膦有效劑量188 g a.i/hm2,噴施在‘熱研7-33-97芽接苗第一蓬葉,每批處理6株,每株取葉柄中間的一片葉片進行分析。以下5種形態(tài)葉片進行測定:(1)未施藥前葉片(對照);(2)3~5 d半黃半綠葉片;(3)30 d再生<7 cm畸形葉;(4)>7 cm畸形葉;(5)36 d再生恢復葉。

    1.2.2 莽草酸含量測定

    莽草酸含量測定參考Gaitonde[22]、婁遠來[23]和王迪[24]等的方法,稍作改動。用液氮分別研磨未施藥前葉片、半黃半綠葉片、小于7 cm畸形葉、大于7 cm畸形葉和新生的恢復葉,各取0.2 g樣品于2.0 mL離心管,加入0.25 mol/L HCL 1.0 mL,4℃,12 000 r/min下離心30 min。然后取200 μL上清液于10 mL離心管,加入2.0 mL氧化劑溶液(1%高碘酸和1%過碘酸鈉溶液混合),室溫靜置3 h,加入 1.0 mol/L NaOH溶液2.0 mL,最后加入0.1 mol/L甘氨酸1.2 mL 混勻,靜置5 min,用紫外分光光度計在380 nm比色,以0.25 mol/L HCL為空白對照。

    莽草酸標準曲線制作:取莽草酸的標準樣品0.01 g,溶于1 mL的0.25 mol/L HCL,混勻,分別取5、10、25、37.5、50 μL于1.5 mL離心管,加0.25 mol/L HCL溶液,定容至1.0 mL,以下步驟同莽草酸含量測定,并繪制標準曲線。

    1.2.3 4種內(nèi)源激素含量測定

    參考陳建華[25]和馬有寧[26]等的方法,稍作激素前處理改動:用液氮分別研磨未施藥前葉片、半黃半綠葉片、小于7 cm畸形葉、大于7 cm畸形葉和新生的恢復葉,各取0.5 g樣品于5 mL 80%冰凍色譜純甲醇(含0.1%酮試劑)里,4℃避光提取過夜,13 000 r/min ,4℃下離心10 min,濾紙過濾后,加入20 μL氨水,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上40℃加壓蒸發(fā)至水相,然后加入乙酸乙酯1 mL萃取,在35℃濃縮至近干,提前分別用10 mL色譜純甲醇和滅菌的超純水活化迪馬公司PXC小柱,處理好的樣品過PXC小柱,先用10 mL 0.1 mol/L的HCL淋洗柱子,再用10 mL色譜純甲醇洗脫,洗脫液在40℃下減壓蒸發(fā)至近干,用1 mL色譜純甲醇溶解,0.22 μm無機濾膜過濾,-80℃保存或待測。

    4種內(nèi)源激素含量測定:采用酶聯(lián)免疫(ELISA)分析試劑盒法(雙抗體夾心法)測定IAA(生長素)、GA(赤霉素)、ABA(脫落酸)和ZR(玉米素)4種內(nèi)源激素,加入準備好的樣品和標準品,空白對照不加樣品及酶標試劑,其余步驟相同:37℃反應30 min;洗板5次,加入酶標試劑(避光),37℃反應30 min;洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色10 min;加入終止液,15 min內(nèi)在酶標儀上讀OD值,最后制作標準曲線并帶入計算。

    1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

    實驗測定為3次重復,采用SAS 9.1.3對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析和多重比較分析,采用Excel 2013軟件進行數(shù)據(jù)處理和作圖。

    2 結果與分析

    2.1 對芽接苗不同時間形態(tài)的影響

    將草甘膦稀釋液噴施在橡膠樹幼苗第一蓬葉片上,不同時間葉片癥狀如圖1。從圖1可以看出,圖1-A為對照,草甘膦噴施3~5 d后橡膠樹幼苗葉片變黃(圖1-B),10~15 d葉片脫落。葉片脫落后,橡膠樹幼苗枝條開始分蘗、長芽,同時長出第二蓬葉。約30 d第二蓬葉片穩(wěn)定,呈細長、卷曲形(圖1-C)。約35 d第二蓬新生的葉片形狀會有所恢復,但是仍長于正常葉片(圖1-D),這說明草甘膦對橡膠樹幼苗葉片產(chǎn)生一定的影響。

    2.2 對芽接苗葉片中莽草酸和4種激素含量的影響

    2.2.1 對莽草酸含量的影響

    草甘膦噴施橡膠樹幼苗后,按照試驗方案進行采樣,并測定莽草酸含量,數(shù)據(jù)顯示,其幼苗在不同形態(tài)葉片中莽草酸含量有一定的變化(圖2)。由圖2可知,莽草酸含量未施藥前葉片、半黃半綠葉、<7 cm畸形葉、>7 cm畸形葉和恢復葉分別為1 521.13、1 709.82、380.06、342.56和567.56 μg/g FW,呈下降趨勢。葉片出現(xiàn)半黃半綠時其莽草酸有一定積累,較未施藥前升高了12.40%,隨后畸形葉出現(xiàn)時,莽草酸積累量逐漸下降,分別比未施藥前下降75.01%和77.48%;而當新生葉片恢復時莽草酸積累量有所升高,但相對未施藥前下降62.69%。說明草甘膦只在施藥前期中斷橡膠樹幼苗莽草酸的途徑,使其不能分解下游產(chǎn)物,橡膠樹幼苗后期莽草酸積累量減少,可能由于環(huán)境變化或植株自身代謝將草甘膦分解。

    2.2.2 對4種激素含量的影響

    為了探求葉片扭曲對植物內(nèi)源激素的影響,測定5種不同葉片形態(tài)下ABA(脫落酸)、GA3(赤霉素)、IAA(生長素)、ZR(玉米素)4種激素含量(圖3)。由圖3可以看出,未施藥前葉片、施藥后半黃半綠葉片、<7 cm畸形葉、>7 cm畸形葉和新生的恢復葉IAA含量分別為25.79、22.74 、24.31、25.60和27.04 pmol/L;GA3含量分別為69.0、139.60、159.92、167.26和196.45 pg/mL。橡膠苗從施藥到長出恢復葉的過程中,IAA和GA3含量都呈現(xiàn)緩慢上升,與對照差異不明顯。未施藥前葉片、施藥后半黃半綠葉片、<7 cm畸形葉、>7 cm畸形葉和新生的恢復葉ABA含量分別為100.82、88.32、131.47、146.80和124.84 μg/L,葉片處于半黃半綠時ABA含量較對照下降12.40%,而在畸形葉和恢復葉中ABA含量分別較未施藥前升高30.40%、45.61%和23.82%。橡膠苗從施藥到長出恢復葉的過程中,ZR含量分別為146.23、97.19、206.89、272.02和123.42 ng/L,葉片處于半黃半綠和恢復葉時,ZR含量較對照分別下降33.54%和15.60%,而在畸形葉中ZR含量分別較未施藥前升高41.48%、86.02%,說明草甘膦影響橡膠樹生長過程中激素含量的運輸及分布。

    3 討論與結論

    近年來,隨著勞動力成本的增加,草甘膦的用量不斷上升,已成為市面上應用最廣的除草劑品種[27]。草甘膦在施藥過程中,地面或航空噴霧的飄移對作物造成的藥害已成為生產(chǎn)中急需解決的問題[28-30]。

    草甘膦競爭性抑制莽草酸合成途徑中的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶的活性,因此,提高EPSPS活性,可以將植物體內(nèi)多余的莽草酸代謝掉,保證芳香族氨基酸的正常代謝[31]。國內(nèi)外研究結果表明:在噴施草甘膦后,正常植物體內(nèi)莽草酸含量上升,植物EPSPS酶活性受到抑制。在大豆實驗中,被草甘膦處理的常規(guī)大豆中莽草酸含量隨藥害天數(shù)逐漸增加,最終導致植株死亡[32]。對比研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)草甘膦處理后不同形態(tài)橡膠樹葉片的莽草酸含量較對照組反而下降。說明橡膠樹可能受外界因素或是自身代謝作用的影響,導致本研究結果與大豆實驗不同。另有研究結果表明,草甘膦可以降低棉花花粉活性,產(chǎn)生畸形花,可能是棉花受到草甘膦脅迫產(chǎn)生了抗性基因,具有抗性基因的EPSPS酶將莽草酸轉(zhuǎn)化為EPSP[33],使莽草酸含量沒有積累。

    植物激素既可以調(diào)節(jié)植物生長,也可以在逆境中維持植物的生長[34]。有研究結果表明,IAA、GA、ZR的含量不足會導致花藥在減數(shù)分裂時期得不到足夠的底物和能量。在劉吉燾等[18]的棉花實驗中,草甘膦作用下,棉花花粉敗育,植株體內(nèi)IAA、GA、ZR的含量低于正常植株,ABA的含量則高于正常植株。在本研究中,草甘膦處理下,橡膠樹不同形態(tài)葉片中IAA和GA3含量都呈緩慢上升,但較對照無明顯差異。說明橡膠樹在草甘膦作用下,IAA和GA3含量變化影響不大。ABA和ZR在橡膠樹畸形葉中含量顯著升高,ABA含量高,會抑制細胞生長和促進細胞衰老死亡[18]。ABA和ZR在草甘膦作用下,能夠抑制橡膠樹葉片中細胞生長,橡膠樹葉片畸形可能是其在逆境中所表現(xiàn)的一種應激反應。

    本實驗通過對巴西橡膠樹葉片中莽草酸含量和4種激素含量的分析發(fā)現(xiàn),草甘膦導致橡膠樹葉片畸形時,莽草酸含量顯著降低。脫落酸和玉米素含量顯著升高,說明莽草酸和植物激素共同調(diào)節(jié)著橡膠樹的生長,且影響了橡膠樹葉片畸形。

    參考文獻

    [1] 武 驍. 草甘膦抗性研究進展[J]. 世界農(nóng)藥,2014,36(5):15-19.

    [2] Amrhein N, Deus B, Gehrke P. The Site of the Inhibition of the Shikimate Pathway By Glyphosate:Ⅱ.Interference of Glyphosate with Chorismate Formation in Vivo and in Vitro[J]. Plant Physiol, 1980, 66(5): 830-834.

    [3] 高 越,劉 輝,陶 波. 抗草甘膦野生大豆篩選及其抗性生理機制研究[J]. 大豆科學,2013,32(1):76-79.

    [4] Stanton R A, Pratley J E, Hudson D, et al. A risk calculator for glyphosate resistance in Lolium rigidum (gaud.)[J]. Pest Manaq Sci, 2008, 64(4): 402-408.

    [5] Pline W A, Wilcut J W, Duke S O, et al. Tolerance and Accumulation of Shikimic Acid in Response to Glyphosate Applications in Glyphosate-resistant and Nonglyphosate-resistant Cotton (gossypium Hirsutum.)[J]. Agricultural and Food Chem, 2002, 50(3): 506-512.

    [6] 許智宏,李家洋. 中國植物激素研究:過去、現(xiàn)在和未來[J]. 植物學通報,2006,23(5):433-442.

    [7] Barazesh S, Mcsteen P. Hormonal control of grass inflorescence development[J]. Trends in Plant Science, 2008, 13(12): 656-662.

    [8] 李保珠,安國勇,韓 栓. 植物激素ABA在水分脅迫下的功能及信號途徑[J]. 植物生理學報,2012,48(1):11-18.

    [9] 趙 翔,李 娜,王棚濤. 脫落酸調(diào)節(jié)植物抵御水分脅迫的機制研究[J]. 生命科學,2011,23(1):115-120.

    [10] Bolle C. The role of GRAS proteins in plant signal transduction and development.[J]. Planta, 2004, 218(5): 683-692.

    [11] Fleet C M, Sun T P. A DELLAcate balance: the role of gibberellin in plant morphogenesis[J]. Current Opinion in Plant Biology, 2005, 8(1): 77-85.

    [12] Reddy K N, Bellaloui N, Zablotowicz R M. Glyphosate Effect on Shikimate, Nitrate Reductase Activity, Yield, and Seed Composition in Corn[J]. Journal of Agricultural & Food Chemistry, 2010, 58(6): 3 646-3 650.

    [13] 顧振新,陳志剛,蔣振暉. 赤霉素處理對糙米發(fā)芽力及其主要成分變化的影響[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學學報,2003,26(1):74-77.

    [14] Thomas S G, Sun T P. Update on gibberellin signaling. A tale of the tall and the short.[J]. Plant Physiology, 2004, 135(2): 668-676.

    [15] 魏靈珠,程建徽,李 琳,等. 赤霉素生物合成與信號傳遞對植物株高的調(diào)控[J]. 生物工程學報,2012,8(2):144-153.

    [16] 王兆龍,曹衛(wèi)星. 細胞分裂素對植物基因表達的調(diào)節(jié)[J]. 生理學通訊,2000,6(1):82-88.

    [17] 楊鑫浩,李香菊. 草甘膦對耐草甘膦大豆體內(nèi)莽草酸含量及產(chǎn)量的影響[J]. 雜草科學,2014,2(1):78-82.

    [18] 劉吉燾,狄佳春,陳旭升. 草甘膦誘導抗草甘膦棉花花藥中激素和游離氨基酸含量的變化[J]. 分子植物育種,2014,12(3):530-536.

    [19] 孟慶忠,王貴春,李國榮,等. 草甘膦作為棉花殺雄劑應用研究初報[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學,2010,49(11):2 706-2 708.

    [20] Baur J R. Effect of Glyphosate on Auxin Transport in Corn and Cotton Tissues[J]. Plant Physiol., 1979, 63(5): 882-886.

    [21] 李小艷,許 晅,李桂俊. 赤霉素對草甘膦的增效作用及其作用機制[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學學報,2013,36(3):36-40.

    [22] Gaitonde M K, Gord M W. A Microchemical Method for the Detection and Determination of Shikimic Acid [J]. Biol Chem, 1958, 230(2): 1 043-1 050.

    [23] 婁遠來,鄧淵鈺,沈晉良. 甲磺隆和草甘膦對空心蓮子草乙酰乳酸合酶活性和莽草酸含量的影響[J]. 植物保護學報,2005,32(2):185-188.

    [24] 王 迪. 抗草甘膦野生大豆資源篩選鑒定及抗性機理研究[D]. 河北:河北科技師范學院,2014.

    [25] 陳建華,曹 陽,李昌珠,等. 板栗內(nèi)源激素的高效液相色譜測定方法[J]. 中南林學院學報,2004,24(5):39-41.

    [26] 馬有寧,陳銘學. 植物內(nèi)源激素預處理方法與色譜檢測技術的研究進展[J]. 中國農(nóng)學通報,2011,27(3):15-19.

    [27] 蘇少泉. 草甘膦述評[J]. 農(nóng)藥,2005,44(4):145-149.

    [28] Bellaloui N, Reddy K N, Zablotowicz R M, et al. Simulated glyphosate drift influences nitrate assimilation and nitrogen fixation in non-glyphosate-resistant soybean.[J]. Journal of Agricultural & Food Chemistry, 2006, 54(9): 3 357-3 364.

    [29] Reddy K N, Ding W, Zablotowicz R M, et al. Biological responses to glyphosate drift from aerial application in non-glyphosate-resistant corn[J]. Pest Management Science, 2010, 66(10): 1 148-1 154.

    [30] 楊治峰,張振玲. 草甘膦生殖發(fā)育毒性的研究進展[J]. 環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學,2013,30(2):154-156.

    [31] 原向陽,郭平毅,張麗光. 不同時期噴施草甘膦對大豆生理指標的影響[J]. 中山大學學報,2009,48(2):90-94.

    [32] 楊鑫浩. 大豆對草甘膦耐受性檢測方法研究[D]. 北京:中國農(nóng)業(yè)科學院,2014.

    [33] 卜貴軍. 草甘膦對大豆葉片生理和形態(tài)結構的影響[D]. 哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學,2009.

    [34] Peleg Z, Blumwald E. Hormone balance and abiotic stress tolerance in crop plants[J]. Current Opinion in Plant Biology, 2011, 14(3): 290-295.

    猜你喜歡
    草甘膦激素
    讓小鎮(zhèn)綠起來
    直面激素,正視它的好與壞
    寧波第二激素廠
    絕經(jīng)治療,該怎么選擇激素藥物
    法國擬2020年廢除草甘膦的使用
    備孕需要查激素六項嗎
    禁用草甘膦或?qū)е罗r(nóng)民雜草防除成本增加
    絕經(jīng)治療,該怎么選擇激素藥物
    草甘膦生產(chǎn)廢水治理技術探討
    甲狀腺激素與腦卒中后抑郁發(fā)病的關系
    亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产精品熟女久久久久浪| 99热6这里只有精品| 老女人水多毛片| 欧美最新免费一区二区三区| 成人国产麻豆网| 黑人猛操日本美女一级片| 色视频在线一区二区三区| 毛片女人毛片| 亚洲三级黄色毛片| 久久久亚洲精品成人影院| 97超视频在线观看视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 97在线人人人人妻| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久久久精品久久久久真实原创| 天天躁日日操中文字幕| 啦啦啦啦在线视频资源| 日本黄色日本黄色录像| 视频区图区小说| 久久99热这里只频精品6学生| 国产精品国产三级国产专区5o| 在线观看免费视频网站a站| 免费观看av网站的网址| 一级片'在线观看视频| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美高清性xxxxhd video| 国产毛片在线视频| 日本av免费视频播放| 国产高清国产精品国产三级 | 国产亚洲5aaaaa淫片| 夫妻午夜视频| 久久精品国产亚洲网站| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产 一区精品| 一级二级三级毛片免费看| 久久精品夜色国产| 国产成人一区二区在线| 免费观看a级毛片全部| 天堂8中文在线网| 久久精品国产亚洲网站| 欧美人与善性xxx| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品人妻熟女av久视频| 久久av网站| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 夫妻午夜视频| 麻豆乱淫一区二区| 在线播放无遮挡| 久久久午夜欧美精品| 激情五月婷婷亚洲| 成人二区视频| 黄色日韩在线| 亚洲自偷自拍三级| 在现免费观看毛片| 青春草视频在线免费观看| 国产精品一区二区性色av| 在线观看三级黄色| 少妇 在线观看| 赤兔流量卡办理| 久久精品人妻少妇| 久久久久人妻精品一区果冻| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 色综合色国产| 99久久中文字幕三级久久日本| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 91精品国产九色| 国产成人freesex在线| 最黄视频免费看| 欧美zozozo另类| 亚洲精品国产av蜜桃| www.av在线官网国产| 少妇被粗大猛烈的视频| 日本一二三区视频观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 日本av免费视频播放| 久久青草综合色| 亚洲av不卡在线观看| 国产在线视频一区二区| 日本vs欧美在线观看视频 | av黄色大香蕉| 永久免费av网站大全| 九色成人免费人妻av| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产精品99久久久久久久久| 欧美bdsm另类| 99久国产av精品国产电影| 欧美一级a爱片免费观看看| av在线蜜桃| 日韩av免费高清视频| 国产精品一区www在线观看| 久久久精品免费免费高清| 国产黄色免费在线视频| 超碰av人人做人人爽久久| 国产一级毛片在线| 性高湖久久久久久久久免费观看| 精品午夜福利在线看| 亚洲精品日本国产第一区| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲真实伦在线观看| 色视频在线一区二区三区| 亚洲av不卡在线观看| 久久女婷五月综合色啪小说| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| av网站免费在线观看视频| 九色成人免费人妻av| 最近的中文字幕免费完整| 91狼人影院| 少妇被粗大猛烈的视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产有黄有色有爽视频| av一本久久久久| 热re99久久精品国产66热6| 99国产精品免费福利视频| 日韩中字成人| 久久久色成人| kizo精华| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲国产精品成人久久小说| 看免费成人av毛片| 亚洲自偷自拍三级| 三级国产精品片| 国产成人freesex在线| 亚洲国产av新网站| 乱系列少妇在线播放| 国产毛片在线视频| 十分钟在线观看高清视频www | 超碰97精品在线观看| 色综合色国产| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产91av在线免费观看| 我的老师免费观看完整版| 亚洲内射少妇av| 韩国高清视频一区二区三区| 九九在线视频观看精品| 激情 狠狠 欧美| 香蕉精品网在线| 免费av不卡在线播放| 亚州av有码| 狂野欧美激情性bbbbbb| 少妇的逼水好多| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲不卡免费看| 国产成人a区在线观看| 日韩国内少妇激情av| 街头女战士在线观看网站| 亚洲国产欧美人成| 久久韩国三级中文字幕| 大香蕉97超碰在线| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久婷婷青草| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 成人午夜精彩视频在线观看| 欧美区成人在线视频| 精品久久久久久久久亚洲| 有码 亚洲区| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲人成网站在线播| 国产伦精品一区二区三区四那| 精品熟女少妇av免费看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久精品性色| 亚洲久久久国产精品| 99久久精品热视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产成人一区二区在线| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品一二三区在线看| 熟女av电影| 国产精品久久久久久久电影| tube8黄色片| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产成人一区二区在线| 国产av精品麻豆| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲精品一二三| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 中文字幕免费在线视频6| 男人添女人高潮全过程视频| 色网站视频免费| 日韩精品有码人妻一区| 国产精品精品国产色婷婷| 精品一区二区三区视频在线| 最近最新中文字幕大全电影3| 三级经典国产精品| 久久国产乱子免费精品| 国产精品精品国产色婷婷| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久久久国产网址| 久久久精品94久久精品| 亚洲人成网站高清观看| 26uuu在线亚洲综合色| 在线 av 中文字幕| h日本视频在线播放| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲国产高清在线一区二区三| 成人影院久久| tube8黄色片| 黄片无遮挡物在线观看| 国产精品一区www在线观看| 亚洲中文av在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久 成人 亚洲| 美女中出高潮动态图| 3wmmmm亚洲av在线观看| 五月天丁香电影| 久久久久国产网址| 青春草亚洲视频在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美bdsm另类| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲欧美日韩东京热| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产在线一区二区三区精| freevideosex欧美| 在线 av 中文字幕| 插逼视频在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲人成网站高清观看| 久久久成人免费电影| 国产乱来视频区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 美女福利国产在线 | 亚洲精品色激情综合| 超碰97精品在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲国产精品国产精品| 精品人妻视频免费看| 亚洲四区av| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 熟妇人妻不卡中文字幕| 免费人妻精品一区二区三区视频| 我要看黄色一级片免费的| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲国产精品一区三区| 国产 一区 欧美 日韩| 中文天堂在线官网| 3wmmmm亚洲av在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产亚洲91精品色在线| 国产 一区 欧美 日韩| av专区在线播放| 91久久精品电影网| 久久久久人妻精品一区果冻| 午夜精品国产一区二区电影| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 街头女战士在线观看网站| 我要看日韩黄色一级片| 高清毛片免费看| 国产精品.久久久| 各种免费的搞黄视频| 国产精品久久久久久av不卡| 日本黄色片子视频| 亚洲最大成人中文| 一边亲一边摸免费视频| 成人无遮挡网站| 一级爰片在线观看| 久久久午夜欧美精品| av在线播放精品| 成人二区视频| 岛国毛片在线播放| 五月玫瑰六月丁香| 国产亚洲一区二区精品| 看十八女毛片水多多多| 亚洲精品色激情综合| 麻豆乱淫一区二区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 美女内射精品一级片tv| 国产 一区 欧美 日韩| 国产精品一区二区性色av| 久久久久人妻精品一区果冻| 成年免费大片在线观看| 99re6热这里在线精品视频| 美女主播在线视频| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 午夜视频国产福利| 精品人妻视频免费看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久精品国产亚洲av天美| 最近中文字幕2019免费版| 中国国产av一级| 联通29元200g的流量卡| 精品午夜福利在线看| av线在线观看网站| 亚洲欧洲国产日韩| 一级av片app| 午夜福利高清视频| 亚洲av免费高清在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 黄色配什么色好看| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲性久久影院| 亚洲欧洲日产国产| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美精品国产亚洲| 国产久久久一区二区三区| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美国产精品一级二级三级 | 免费看av在线观看网站| 波野结衣二区三区在线| 少妇的逼好多水| 一级黄片播放器| www.av在线官网国产| 国产精品三级大全| 国产视频内射| 亚洲欧美日韩东京热| 99久久精品热视频| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲精品aⅴ在线观看| 搡老乐熟女国产| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 中文字幕免费在线视频6| 高清黄色对白视频在线免费看 | 99久久综合免费| 亚洲丝袜综合中文字幕| 视频区图区小说| 香蕉精品网在线| 中文欧美无线码| 麻豆乱淫一区二区| 国产黄频视频在线观看| 久久99热6这里只有精品| 久久精品人妻少妇| 久久人人爽人人片av| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 久久99热这里只频精品6学生| 中国美白少妇内射xxxbb| 多毛熟女@视频| 国产免费又黄又爽又色| 各种免费的搞黄视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产精品蜜桃在线观看| 少妇丰满av| 特大巨黑吊av在线直播| 26uuu在线亚洲综合色| 欧美成人精品欧美一级黄| 日本与韩国留学比较| 日韩一区二区三区影片| 蜜臀久久99精品久久宅男| 免费黄色在线免费观看| 久久99精品国语久久久| 国产亚洲最大av| 亚洲va在线va天堂va国产| 18+在线观看网站| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产 精品1| 亚洲无线观看免费| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一区二区av电影网| 免费黄色在线免费观看| 国产av精品麻豆| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 色5月婷婷丁香| 国产精品av视频在线免费观看| 国产成人aa在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品三级大全| 成年av动漫网址| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 毛片一级片免费看久久久久| 少妇的逼水好多| 91精品国产九色| 少妇高潮的动态图| 国产精品三级大全| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲精品自拍成人| 毛片一级片免费看久久久久| 久久久欧美国产精品| 街头女战士在线观看网站| 91精品伊人久久大香线蕉| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 一级毛片电影观看| 色5月婷婷丁香| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜 | 国产亚洲最大av| 欧美高清成人免费视频www| 伦理电影免费视频| 91狼人影院| 久久久久久久精品精品| 看十八女毛片水多多多| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 高清欧美精品videossex| 永久网站在线| 精品人妻熟女av久视频| 一区二区三区精品91| 99热这里只有是精品在线观看| av在线观看视频网站免费| 欧美丝袜亚洲另类| 精品久久久久久久久亚洲| 亚洲人成网站在线播| 久久久成人免费电影| 在线观看人妻少妇| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 午夜视频国产福利| 视频中文字幕在线观看| 成人免费观看视频高清| 午夜福利影视在线免费观看| 国产免费一级a男人的天堂| a 毛片基地| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品国产三级国产专区5o| 日本av免费视频播放| 亚洲国产成人一精品久久久| 一级毛片 在线播放| 欧美一级a爱片免费观看看| 色哟哟·www| 18+在线观看网站| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲最大成人中文| 精品久久久精品久久久| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久久久性生活片| 日本午夜av视频| 亚洲图色成人| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久久精品免费免费高清| 18禁在线播放成人免费| 三级经典国产精品| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产乱人视频| 亚洲成人一二三区av| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲国产欧美人成| 国产探花极品一区二区| 亚洲国产最新在线播放| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲国产av新网站| 国产淫语在线视频| 天堂8中文在线网| 久久久久久久久久久免费av| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久久午夜欧美精品| 欧美 日韩 精品 国产| 日本vs欧美在线观看视频 | 中文天堂在线官网| 欧美丝袜亚洲另类| 日韩制服骚丝袜av| 久久婷婷青草| 亚洲精品久久午夜乱码| 在线天堂最新版资源| 人妻少妇偷人精品九色| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲国产精品国产精品| 色哟哟·www| 亚洲久久久国产精品| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 成人毛片a级毛片在线播放| 韩国高清视频一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲第一av免费看| 一级二级三级毛片免费看| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品熟女久久久久浪| 日本爱情动作片www.在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 男女下面进入的视频免费午夜| 日韩三级伦理在线观看| 91久久精品国产一区二区三区| 18+在线观看网站| 最近最新中文字幕免费大全7| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 少妇人妻精品综合一区二区| 女人久久www免费人成看片| 色视频在线一区二区三区| 久久鲁丝午夜福利片| 男男h啪啪无遮挡| 国产av精品麻豆| 大香蕉97超碰在线| 永久网站在线| av女优亚洲男人天堂| 1000部很黄的大片| 春色校园在线视频观看| 国产av精品麻豆| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产成人一区二区在线| 亚洲内射少妇av| 国产在线男女| 99九九线精品视频在线观看视频| 中文资源天堂在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 国产高清国产精品国产三级 | 在线观看国产h片| 亚洲久久久国产精品| 午夜福利视频精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩欧美精品免费久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 一区二区三区免费毛片| 亚洲最大成人中文| 天堂8中文在线网| 久久久久久久久久成人| 高清不卡的av网站| 欧美最新免费一区二区三区| 能在线免费看毛片的网站| 亚洲av日韩在线播放| 色婷婷久久久亚洲欧美| 91久久精品电影网| 最近2019中文字幕mv第一页| 22中文网久久字幕| 国产美女午夜福利| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产免费福利视频在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 精品熟女少妇av免费看| 在线 av 中文字幕| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 成年免费大片在线观看| 亚洲天堂av无毛| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 97超视频在线观看视频| 男女无遮挡免费网站观看| 十分钟在线观看高清视频www | 欧美3d第一页| 91aial.com中文字幕在线观看| 成人二区视频| 亚洲美女黄色视频免费看| 91精品国产九色| 日本wwww免费看| 亚洲图色成人| 日韩大片免费观看网站| 国产高清三级在线| 七月丁香在线播放| 青春草视频在线免费观看| 男女边吃奶边做爰视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | av在线观看视频网站免费| 成年免费大片在线观看| 日韩中字成人| 久久久久久久久久久丰满| 亚州av有码| 性色av一级| 国产精品无大码| 中文字幕制服av| 国产成人免费观看mmmm| 黄色欧美视频在线观看| 久久久精品94久久精品| 欧美激情国产日韩精品一区| 美女福利国产在线 | 精品久久国产蜜桃| 尾随美女入室| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 高清午夜精品一区二区三区| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久久亚洲精品成人影院| 欧美丝袜亚洲另类| 少妇丰满av| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲国产欧美人成| 久久av网站| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 夫妻性生交免费视频一级片| 大香蕉97超碰在线| 日韩av不卡免费在线播放| 美女高潮的动态| 亚洲怡红院男人天堂| 少妇精品久久久久久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产午夜精品一二区理论片| 视频中文字幕在线观看| 亚洲av二区三区四区| 日本欧美国产在线视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 免费看日本二区| 美女国产视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 日韩av不卡免费在线播放| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品伦人一区二区| 精品人妻视频免费看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 尾随美女入室| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | xxx大片免费视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美区成人在线视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| 久久人人爽人人爽人人片va| 麻豆成人av视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 热re99久久精品国产66热6| 国内揄拍国产精品人妻在线| 免费看日本二区| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产av一区二区精品久久 | 纯流量卡能插随身wifi吗| 精品久久久久久电影网| 一级爰片在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 人妻制服诱惑在线中文字幕|