中藥多組分緩釋制劑體外釋放評價體系的研究進展Δ

張美敬，劉志宏，房盛楠，2，余 越，2，王天宇，3，薛丹平，4，田雪梅，5，宋洪濤#（.福州總醫(yī)院藥學科，福州 350025；2.福建醫(yī)科大學藥學院，福州 35008；3.廈門大學醫(yī)學院，福建廈門 3602；4.福建中醫(yī)藥大學藥學院，福州 35008；5.沈陽藥科大學生命科學與生物制藥學院，沈陽 0000）

中藥多組分緩釋制劑體外釋放評價體系的研究進展Δ

張美敬1，2＊，劉志宏1，房盛楠1，2，余 越1，2，王天宇1，3，薛丹平1，4，田雪梅1，5，宋洪濤1#（1.福州總醫(yī)院藥學科，福州 350025；2.福建醫(yī)科大學藥學院，福州 350108；3.廈門大學醫(yī)學院，福建廈門 361102；4.福建中醫(yī)藥大學藥學院，福州 350108；5.沈陽藥科大學生命科學與生物制藥學院，沈陽 110000）

目的：為找到更適合中藥多組分的評價方法提供思路。方法：以“中藥多組分”“體外釋放”“同步釋藥”“多指標”“Synchronized”“Release in vitro”“TCM multicomponent”“Multi-index”等為關鍵詞，組合查詢2004年1月－2016年6月在PubMed、Elsevier、SpringerLink、中國知網、萬方、維普等數據庫中的相關文獻，對中藥已知成分作為評價指標、中藥指紋圖譜在藥物體外釋放中的應用，以及中藥化合物組、吸波面積法、質量權重系數法等方法在中藥多組分緩釋制劑體外釋放中的應用進行綜述。結果與結論：共檢索到相關文獻210篇，其中有效文獻42篇。對于成分復雜的中藥制劑，溶出度的測定選擇其中某種已知的指標成分進行；選擇中藥組分制劑中的一種或幾種藥效成分的釋放度作為評價指標，可反映中藥組分制劑中特定成分的釋放特征；以指紋圖譜相關峰為指標，可更全面地評價中藥多組分緩釋制劑的體外釋放行為；選擇中藥多組分制劑中的幾種有效成分并結合中藥制劑的指紋圖譜進行評價中藥多組分制劑的釋藥行為，既可反映多個成分的含量變化，又可反映中藥復方整體的含量變化；基于中藥化合物組的整體譜特征，采用卡爾曼濾波法，計算獲得溶出介質中化合物的含量，能很好地反映中藥多組分的釋藥行為；吸波面積法能考察中藥所有成分的釋放情況，對復方藥物溶出度及體內藥動學的研究有指導意義；質量權重法可為中藥組分的整體性研究提供參考，但必須明確各成分在整體組分中所占的質量權重系數才能整合反映整體性質。

多指標定量；多組分；指紋圖譜；釋放度；溶出度

近年來，中藥緩釋制劑的研究日漸增多，其中中藥單體化合物緩釋制劑與一般化學藥緩釋制劑的制備與評價方法基本相同。但由于中藥組分制劑富含多個組分，成分復雜，各成分含量較低，在研制中藥緩釋制劑過程中，面臨的問題依然很多。因此，中藥緩釋制劑研究的難點與熱點主要集中于中藥多組分緩釋制劑的研究。目前中藥多組分制劑體外釋放性能的評價和生物利用度評價研究還較為薄弱，也未形成體系[1-4]。筆者以“中藥多組分”“體外釋放”“同步釋藥”“多指標”“Synchronized”“Release in vitro”“TCM multicomponent”“Multi-index”等為關鍵詞，組合查詢2004年1月－2016年6月在PubMed、Elsevier、SpringerLink、中國知網、萬方、維普等數據庫中的相關文獻。結果，共檢索到相關文獻210篇，其中有效文獻42篇?，F對中藥已知成分作為評價指標、中藥指紋圖譜在藥物體外釋放中的應用，以及中藥化合物組、吸波面積（AUAWC）法、質量權重系數法等方法在中藥多組分緩釋制劑體外釋放中的應用進行綜述，以期為找到更適合中藥多組分的評價方法提供思路。

1 中藥已知成分作為評價指標

1.1 單一成分作為評價指標

對于成分復雜的中藥制劑，溶出度的測定選擇其中某種已知的指標成分進行[5]。宋宏新等[6]以貫葉連翹提取物中的金絲桃素在不同時間點的累積釋放度作為評價指標，優(yōu)化了貫葉連翹提取物凝膠骨架片的處方。Xu WJ等[7]以丹酚酸B作為指標成分，考察丹參酸微孔滲透泵片在不同時間的累積釋放度。Li XD等[8]通過以附子理中滲透泵片的甘草苷為檢測指標，制備得到14 h的累積釋放度大于95%，且有較好的零級釋放趨勢（r＝0.972 2）的泡騰型滲透泵片。

1.2 幾種成分作為評價指標

鄭金鳳等[9]采用高效液相色譜（HPLC）法，以丹參中的水溶性成分丹參酮B和脂溶性成分丹參酮ⅡA作為指標成分，研究這2種成分在不同時間的累積釋放度，最終得到這2種指標成分體外釋放度具有相似性，12 h的累積釋放度在90%左右。Xie YC等[10]制備了以水飛薊素中的各有效成分水飛薊亭、花旗松素、異水飛薊賓和水飛薊賓作為評價指標的水飛薊素固體分散體滲透泵片，該滲透片水飛薊素的各有效成分24 h釋放率都在90%以上，且呈零級釋放特性。

選擇中藥組分制劑中的一種或幾種藥效成分的釋放度作為評價指標，此方法無疑能夠簡單、快速地反映中藥組分制劑中特定成分的釋放特征，但無法呈現中藥各個組分相互協(xié)同的整體性及其多層次、多靶點發(fā)揮藥效的特點，其結果往往不夠全面和客觀。

2 中藥指紋圖譜在藥物體外釋放中的應用

中藥的指紋圖譜逐漸被更多學者用于中藥整體成分的研究，這樣除了測定少數已知的一種或幾種成分，對未知成分對中藥整體釋放的影響也可以進行研究，因此能夠更科學地評價中藥組分制劑的釋放性能[11]。

2.1 指紋圖譜特征峰用于中藥組分制劑的體外釋放度評價

有學者提出，中藥多種成分均勻分布在緩釋制劑中，由于這些成分受到制劑工藝條件和處方因素的影響是相同的，所以各種成分的釋放行為不同主要取決于其理化性質的差異。在一般情況下，藥物分子本身的差異和其色譜行為的差異是固定不變的。因此，這些成分之間的峰面積可能存在一定的相關性，可以選定一個對照峰（對照品易得、穩(wěn)定性好），通過數學方法求出對照峰與其他指紋峰的相關性方程，從而求出其他指紋峰的相對含量和釋放度[12]。張偉等[13]采用HPLC指紋圖譜結合相似因子（f2）法探討雷公藤胃漂浮緩釋微丸膠囊中多組分的釋藥行為，通過測定該膠囊不同時間的體外釋放指紋圖譜，以雷公藤內酯醇作為對照峰，分別計算出其他指紋峰與對照峰面積的線性相關方程（r＞0.951），從而求出其他指紋峰的相對釋放量，繪制釋放曲線，同時采用相似因子法定量評價其釋藥行為。結果，以雷公藤內酯醇釋放度作為對照，各指紋峰成分均為50≤f2≤100，故認為所有指紋峰成分與雷公藤內酯醇的體外釋放度相似。李俊松等[14]用HPLC技術測定白芍總苷緩釋微丸體外釋放介質的指紋圖譜，選擇芍藥苷為對照峰，分別計算出其他指紋峰與對照峰面積的線性相關方程（R2＞0.95），從而得到相對釋放度。結果，芍藥緩釋微丸中其他效應指紋峰與芍藥苷釋藥過程分別符合Higuchi和Ritger-Peppas釋藥模型。因此，白芍總苷緩釋微丸的體外釋放行為可以用指紋圖譜效應相關峰為指標來進行評價。闞麗莉等[15]通過對陳白清肝微丸體外釋放的指紋圖譜分析，選擇柚皮苷為對照峰，分別求出其他指紋峰與對照峰面積的線性相關方程，得到其他指紋峰的相對釋放度。因此，以指紋圖譜相關峰為指標，可以更加全面地評價中藥多組分緩釋制劑的體外釋放行為。

2.2 多指標定量指紋圖譜用于中藥組分制劑的體外釋放度評價

多指標指紋圖譜即選擇中藥多組分制劑中的幾種有效成分并結合中藥制劑的指紋圖譜進行中藥多組分制劑的釋藥行為評價，既可以反映多個成分的含量變化，又可以反映中藥復方整體的含量變化。劉清飛等[16]采用HPLC建立了復方降壓緩釋片的指紋圖譜，分別以蘆丁、刺槐素、木犀草素以及黃酮類成分的指紋圖譜為指標進行體外釋放度的評價；采用面積加和法，以峰面積的總和為指標，計算不同時間的累積釋放度，得出各指標成分與指紋圖譜的體外釋放度。劉文等[17]采用HPLC建立左金胃漂浮緩釋片各個時間點及全溶樣品的指紋圖譜，分別以小檗堿、吳茱萸次堿和吳茱萸內酯以及22個特征峰的體外釋放度為指標評價左金胃漂浮緩釋片的體外釋放行為，結果小檗堿的釋藥行為與制劑相似，而與吳茱萸內酯及吳茱萸次堿不一致。

3 中藥化合物組在中藥多組分緩釋制劑體外釋放中的應用

近年來，有學者建立了以中藥多組分整體為對象的化合物組（即多組分釋放動力學中中藥制劑可釋放/溶出并檢測到的全部化合物）釋放/溶出動力學理論[18-23]，基于中藥化合物組的整體譜特征，采用卡爾曼濾波法，計算獲得溶出介質中化合物的含量。該方法符合中醫(yī)藥的整體觀念，能很好地反映中藥多組分的釋藥行為。傅丹丹等[24]采用卡爾曼濾波法，考察銀翹解毒片經高溫、高濕、強光處理后的物質組釋藥動力學特征及其同步性。將銀翹解毒片經單因素處理后，再按藥典要求測定釋放度，與物質組標準譜相比較，釋放度樣本的紫外掃描光譜經卡爾曼濾波后，計算得到各樣本的物質組釋放度，并繪制釋放曲線；再結合Matlab軟件將物質組釋放數據轉化成與濃度相關的顏色信息，就能可視化地評價銀翹解毒片物質組釋放的特征及同步性。凌昳等[25]應用中藥物質組學釋放動力學理論，研究銀翹解毒丸的緩釋動力學及其同步性。以紫外吸收光譜法結合卡爾曼濾波法對銀翹解毒丸物質組進行定量，分別測定整丸及切割的不同劑量的釋放度，獲得銀翹解毒丸的物質組釋放動力學特征。以取樣間隔釋放的物質組學特征增量等參數為指標，就能可視化地評價中藥物質組釋放的同步性。吳佳佳等[26]應用中藥物質組學釋放動力學理論，研究桂枝茯苓丸的緩釋動力學及其同步性。以紫外吸收光譜法結合卡爾曼濾波法對桂枝茯苓丸物質組進行定量，測定不同時間的釋放度，獲得桂枝茯苓丸的物質組釋放動力學特征，就能可視化地評價中藥物質組釋放的同步性。中藥化合物組為傳統(tǒng)劑型的評價和給藥系統(tǒng)的設計提供了釋放動力學的方法學基礎，此方法具有一定的新意，但目前尚處于探索階段。

4 AUAWC法在中藥多組分緩釋制劑體外釋放中的應用

目前對于測定中藥中整體成分溶出度的方法鮮有報道，有學者提出AUAWC法來解決中藥多組分整體成分溶出的問題[27]。AUAWC法是將紫外-可見分光光度法在一定波長范圍內進行掃描所得的AUAWC與中藥中所有成分的總藥物濃度成線性關系（由吸光度的加和性結合比爾-朗伯定律可得）的思路，應用于研究中藥多成分的混合總藥物濃度的體外釋放特性，通過測得的不同時間點中藥多組分制劑樣品的AUAWC，即可求出該時間點制劑的累積釋放度，繪制累積釋放度曲線。因此，AUAWC法能考察中藥所有成分的釋放情況，對復方藥物溶出度及體內藥動學的研究具有指導意義。楊真真等[28]通過AUAWC法對白花蛇舌草腸溶膠囊中多個成分體外釋放度進行測定，同時采用HPLC法分別測定白花蛇舌草腸溶膠囊中豆甾醇、槲皮素、齊墩果酸等單一成分的體外釋放特性，把這2種方法的結果進行分析和比較。結果，用AUAWC法測得的混合總藥物不同時間的累積釋放量與用HPLC法測得的豆甾醇、槲皮素、齊墩果酸三者藥物累積釋放量之和接近。賴宏強等[29-30]利用AUAWC法對川芎組分片整體成分溶出度進行考察并研究了川穹組分片的體內外相關性，建立AUAWCHPLC結合法測定川芎組分片中整體成分和單個成分溶出度。結果，AUAWC法測得的川芎組分片中整體成分的溶出行為與HPLC法測得的單個成分之和的溶出行為相似。大鼠灌胃川芎組分藥液后的藥-時曲線符合一室模型，川芎組分片的體外累積溶出度與體內累積吸收百分率有較好的相關性，即川芎組分片的體外溶出度試驗能夠反映體內藥物的吸收過程[31]。胡悅等[32]建立AUAWC-HPLC結合法測定白花蛇舌草組分膠囊中整體成分和單個成分槲皮素、齊墩果酸和豆甾醇的溶出度，測定不同時間點白花蛇舌草的總釋放度與各個成分的溶出度，開展整體成分和單個成分溶出度的比較，結果表明2種方法具有較好的一致性。AUAWC-HPLC結合法可用于具有成分組學特征的中藥組分、有效部位等中藥復方的體外評價，具有較好的實用性，可為復雜中藥體內外評價體系的建立提供基礎。

5 質量權重系數法在中藥多組分緩釋制劑體外釋放中的應用

采用紫外-可見分光光度法直接測定或采用加和值（即中藥多組分的整體性質用組分中的多個成分性質值累加）的方法[33-35]，來檢驗中藥多組分的整體釋藥行為不合理。因為加和法雖然考慮到了中藥組分的整體性，但卻忽視了各個成分間的不同權重值，而中藥組分各成分的配比關系決定了中藥多組分的藥效。同樣，組分中各成分的質量權重系數會直接影響組分的整體性質。對此有學者提出質量權重系數法（表示某一指標項在指標項系統(tǒng)中的重要程度）來研究中藥組分的性質[36-38]。劉丹等[39-41]采用HPLC并結合質量分數權重法對銀杏黃酮組分及銀杏內酯組分進行溶解性及油水分配系數的研究，并將測得結果與直接加和法進行比較。結果表明，質量分數權重系數整合表征中藥組分性質更為科學合理。同時，將此思路延用于中藥組分制劑的體外釋藥評價，采用質量權重系數法整合銀杏內酯組分和整合溶出曲線，其分析結果不僅與文獻報道一致，而且也與實際一致。嚴紅梅等[42]采用HPLC并以質量權重系數法和藥效貢獻率相結合的方法對丹酚酸組分的油水分配系數進行了整合表征，整合的結果即為丹酚酸組分整體的油水分配系數。質量權重法可以為中藥組分的整體性研究提供一定的參考，但必須明確各成分在整體組分中所占的質量權重系數才能整合反映整體性質，為中藥復方緩釋制劑的體內外評價提供了新的思路，但在中藥多組分制劑中的應用也有一定局限性，還需要進一步研究。

6 結語

目前，中藥緩釋制劑主要集中于中藥有效部位和復方中藥緩釋制劑的研究。由于中藥有效成分復雜，其制劑的體內外評價也較復雜，僅以一個或幾個指標成分進行評價，有較大的片面性和局限性，這也進一步增加了中藥緩釋制劑開發(fā)的難度。同時，中藥成分復雜、理化性質差異較大，各成分含量較低，中藥中的各成分只有在體內同時釋放，同時作用于靶點部位，才能達到各成分互相協(xié)同的作用，發(fā)揮其多層次、多靶點綜合療效的優(yōu)勢。

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R284；R943

A

1001-0408（2017）10-1408-04

2016-06-19

2016-08-11）

（編輯：余慶華）

福建省自然科學基金資助項目（No.2015J01491）

＊碩士研究生。研究方向：藥物新劑型和制劑新技術。電話：0591-22859972。E-mail：15859178020@163.com

#通信作者：主任藥師，博士生導師。研究方向：藥物新劑型和制劑新技術。電話：0591-22859459。E-mail：sohoto@vip.163.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.10.30