動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)樣品的采集技術(shù)

陳 巖

(遼寧省沈陽(yáng)市沈北新區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧沈陽(yáng) 110000)

動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)樣品的采集技術(shù)

陳 巖

(遼寧省沈陽(yáng)市沈北新區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧沈陽(yáng) 110000)

樣品的采集作為動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷工作的基礎(chǔ)，采集樣品的時(shí)機(jī)以及樣品的處理、保存、運(yùn)送等都會(huì)制約著對(duì)疫病監(jiān)測(cè)和診斷結(jié)果的實(shí)效性。本文主要分析了我國(guó)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)樣品采集的難點(diǎn)以及針對(duì)不同檢測(cè)對(duì)象的樣品采集要義。

動(dòng)物 疫病 監(jiān)測(cè) 樣品 采集

1 動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)樣品采集的難點(diǎn)

1.1 養(yǎng)殖場(chǎng)管理工作者防疫意識(shí)不強(qiáng)

在實(shí)踐的采集過(guò)程中，存在一部分的養(yǎng)殖從業(yè)者對(duì)畜禽免疫抗體監(jiān)測(cè)意識(shí)不高。由于養(yǎng)殖者害怕出現(xiàn)采血應(yīng)激而引發(fā)畜禽的生產(chǎn)性能的降低，也有甚者有些管理工作者害怕因?yàn)椴裳l(fā)生致死現(xiàn)象，一般情況下，應(yīng)激反應(yīng)較大的動(dòng)物會(huì)造成應(yīng)激死亡。通常體現(xiàn)在不配合畜禽采血這一方面，另一方面，由于國(guó)家對(duì)采血后的養(yǎng)殖戶也沒(méi)有采取經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償措施。鑒于此，如今采血需要依托當(dāng)?shù)毓ぷ髡叩拿孀踊蛘呦嚓P(guān)村防疫員的人情才能夠真正得以實(shí)施，現(xiàn)如今已經(jīng)發(fā)生為了采血工作順利舉行必須直接購(gòu)買或者出錢補(bǔ)償農(nóng)戶畜禽的情況。在一定程度上，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的認(rèn)定主體不明，界限還不清晰，依據(jù)國(guó)家以及地方相關(guān)的監(jiān)測(cè)實(shí)施意見(jiàn)規(guī)定需要進(jìn)一步加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，包括了種豬場(chǎng)、規(guī)模場(chǎng)、人工輸精站等方面，但是相關(guān)省市縣所認(rèn)定的種豬場(chǎng)、規(guī)模場(chǎng)、人工輸精站等疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)還未真正的掌握監(jiān)測(cè)要義，甚至有些只是虛設(shè)的場(chǎng)戶，出現(xiàn)完成手續(xù)后畜禽出欄或者還未購(gòu)進(jìn)畜禽，造成在省定點(diǎn)的場(chǎng)中疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)難以采集到所要求的樣品，再者因?yàn)橛械膱?chǎng)由于未能得到國(guó)家對(duì)規(guī)模場(chǎng)的補(bǔ)助，出現(xiàn)不積極配合采樣工作的情況。

1.2 畜禽散養(yǎng)比重大

現(xiàn)如今，在我國(guó)農(nóng)村家庭中，散養(yǎng)動(dòng)物還是畜禽生產(chǎn)為主，包括了豬、羊、牛、雞、鴨等常見(jiàn)的家禽。鑒于此，農(nóng)村散養(yǎng)畜禽免疫抗體監(jiān)測(cè)作為動(dòng)物防疫工作的關(guān)鍵組成部分，針對(duì)農(nóng)村散養(yǎng)畜禽免疫抗體監(jiān)測(cè)還需要進(jìn)一步全面落實(shí)，然而完善農(nóng)村散養(yǎng)畜禽免疫抗體監(jiān)測(cè)任務(wù)還非常艱巨。出現(xiàn)了各種各樣的問(wèn)題，包括了很大部分的家庭畜禽沒(méi)有足夠的圈舍，致使對(duì)鴨進(jìn)行采血時(shí)只能在有圈舍戶展開。據(jù)相關(guān)的研究調(diào)查表明，超過(guò)70%以上的農(nóng)村動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)樣品的采集工作需要在農(nóng)村散戶中進(jìn)行，而這些農(nóng)村散養(yǎng)戶本身就較為分散，造成采樣面廣，再加之這些地方本身就交通不便，難以大而全面的獲得監(jiān)測(cè)樣本。

1.3 專業(yè)技術(shù)人員不足

血樣的采集工作需要具有一定的專業(yè)技術(shù)人員，在熟練采樣技術(shù)的基礎(chǔ)上，才能一針見(jiàn)血，既能夠節(jié)省時(shí)間，又可以獲得畜主對(duì)該項(xiàng)工作的認(rèn)可與肯定。比如：針對(duì)一些禽類翅內(nèi)側(cè)腋下展開靜脈采血工作而言，一般會(huì)在針頭拔出后產(chǎn)生出血現(xiàn)象，極易發(fā)生血腫，短時(shí)間內(nèi)也難以及時(shí)恢復(fù)，極易引發(fā)畜主的反感情緒。針對(duì)牛采血工作而言，則需要在樁子里展開，然而目前我國(guó)農(nóng)村大部分地區(qū)還未真正滿足該條件，再加之畜主的不配合，從而造成了采樣工作者的人身安全無(wú)法確保。而針對(duì)大規(guī)模樣品的采集來(lái)說(shuō)，需要緊緊依靠鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)監(jiān)所工作者，不容置疑的是存在一部分的鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)監(jiān)所工作者認(rèn)為監(jiān)測(cè)采樣工作并不是他們的本職工作，往往對(duì)監(jiān)測(cè)采樣工作保有抵觸的情緒，不愿親自采樣。

2 針對(duì)不同檢測(cè)對(duì)象的樣品采集

2.1 用于檢測(cè)病毒的樣品

一般情況下，需要在動(dòng)物病初體溫升高期間對(duì)病毒檢驗(yàn)的組織樣品進(jìn)行采集，通常采集的是組織臟器及糞便等樣品，并且將采集的組織樣品進(jìn)行密封滅菌，貼上標(biāo)簽，進(jìn)行冷藏，再送檢。若是在中途所花費(fèi)的時(shí)間較長(zhǎng)，則需要展開凍結(jié)，再接著運(yùn)送。另一種方法則是把組織塊浸泡于pH值為7.4上下的乳汁液中，同時(shí)在每毫升乳汁液內(nèi)添加鏈霉素、青霉素各1000IU，接著放至冷藏瓶中進(jìn)行送檢。如果采集的是血液樣品，則需要進(jìn)行抗凝血處理。在實(shí)際進(jìn)行采血前，需要在真空采血管或者一些其他容器中，依據(jù)每10ml血液配以0.1%肝素1ml的要求，而針對(duì)豬來(lái)說(shuō)，是從前腔靜脈用注射器抽取或者進(jìn)行真空采血，在用量少的情況下，也能由耳靜脈抽取，而一般家禽由翅靜脈抽取，而像馬、牛、羊而言，一般是由尾靜脈或者頸靜脈進(jìn)行真空采血[1]。

2.2 用于檢測(cè)細(xì)菌的樣品

選取剛剛死亡或者發(fā)病典型的整個(gè)動(dòng)物作為送實(shí)驗(yàn)室作細(xì)菌檢驗(yàn)的樣品。如果不方便也可以進(jìn)行無(wú)菌采集組織樣品，再送至實(shí)驗(yàn)室，也可以在現(xiàn)場(chǎng)運(yùn)用接種棒展開無(wú)菌操作取肝臟與血樣等樣品接種至血平板。切記所采集的組織樣品不得添加任何物質(zhì)，同時(shí)立即放至密閉的滅菌塑料袋中或者滅菌容器中，貼好標(biāo)簽后，接著放至冷藏的較大容器中，立即送檢[2]。

2.3 用于病理組織學(xué)檢驗(yàn)的樣品

一般情況下，用于病理組織學(xué)檢驗(yàn)的組織樣品第一步就需要確保新鮮，在采樣的過(guò)程中，通常選取的是病變最顯著以及最典型的部位，也需要連同部分健康組織進(jìn)行采集。把采集的組織切成長(zhǎng)寬 1～2 cm 大小、厚約0.5 cm的組織塊，同時(shí)馬上于95%酒精或 4%中性甲醛緩沖液內(nèi)進(jìn)行浸泡、固定。所需要的固定液要超過(guò)組織塊體積的10倍，若是難以在2 d內(nèi)送出檢驗(yàn)，則需要在通過(guò)24 h 固定之后，將固定液進(jìn)行更換，接著進(jìn)行密封，貼好貼標(biāo)簽，立即送檢。

2.4 用于血清學(xué)檢驗(yàn)的樣品

使用一次性采血器或者一次性注射器，通過(guò)畜禽靜脈抽取血液3 mL，同時(shí)添至采血器內(nèi)，貼好標(biāo)簽后，在室溫靜置直至凝固，再送檢，同時(shí)盡快將經(jīng)離心分離或者自然析出的血清吸出。需要在4℃上下的溫度中進(jìn)行保存，如果時(shí)間較長(zhǎng)才能檢驗(yàn)，則需要凍結(jié)保存，切記不可反復(fù)凍融，否則將制約抗體效價(jià)。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在實(shí)際的動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)工作中，對(duì)動(dòng)物樣品進(jìn)行采集、送檢以及展開實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被作為開展動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的一種關(guān)鍵方法?，F(xiàn)如今，動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)工作正面臨著機(jī)遇與挑戰(zhàn)，這就需要?jiǎng)游镆卟”O(jiān)測(cè)人員進(jìn)一步強(qiáng)化思維層次，進(jìn)行開拓創(chuàng)新，滿足實(shí)際工作的需要。

[1]宋衛(wèi)華.淺談動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)樣品采集、運(yùn)送、保存應(yīng)注意的問(wèn)題[J].科技致富向?qū)В?013，8（16）：47-48.

[2]陳培賽，李文瑞.畜禽樣品采集數(shù)量和群體免疫抗體合格率標(biāo)準(zhǔn)探討[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2014，39（5）：85-86.