于國(guó)升,胡孟娟,邢荷巖,曹洪戰(zhàn),蘆春蓮
(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,河北 保定 071000;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,江蘇 南京 210095)
俗話說“母豬好,好一窩;公豬好,好一坡”。優(yōu)良品種的種公豬對(duì)后代的影響至關(guān)重要。因此,公豬精液質(zhì)量的好壞對(duì)整個(gè)豬場(chǎng)的生產(chǎn)效益具有舉足輕重的作用。人工授精所使用的精液是經(jīng)過人工操作采取公豬的精液加以處理而得。而在此過程中,種公豬、采精技術(shù)、采精人員以及精液的實(shí)驗(yàn)室操作是影響精液品質(zhì)的關(guān)鍵因素。在種公豬的選擇和飼養(yǎng)管理、采精及精液處理過程中技術(shù)人員要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。
公豬的好壞直接影響精液品質(zhì)。在保證種公豬健康的前提下,影響公豬精液品質(zhì)的因素有很多,包括品種、年齡、飼養(yǎng)管理、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境溫度和采精頻率等。
不同品種的公豬繁殖性能存在很大差異,同時(shí)在精液品質(zhì)方面也有很大差異。而精液品質(zhì)的好壞是人工授精的關(guān)鍵,直接影響母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù),進(jìn)而直接影響整個(gè)豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。Ciereszko研究了大白豬、皮特蘭和杜洛克(DC)3個(gè)品種對(duì)精液品質(zhì)及精子蛋白活性影響,結(jié)果表明3個(gè)品種間精液品質(zhì)存在差異[1]。Smital利用了3 319頭,271 547次公豬的采精記錄,來評(píng)價(jià)8個(gè)品種的精液特性,其結(jié)果為:從精液量、精子數(shù)目和活力3項(xiàng)評(píng)價(jià)精液品質(zhì),結(jié)果是長(zhǎng)白最好,DC最差[2]。聶文軍等選取健康的2歲左右、體重相似的公豬30頭,其中皮杜豬(PD)、長(zhǎng)白豬(L)、大白豬(Y)各10頭,采用手握采精法,采精時(shí)用一層過濾紙除去副性腺等物,研究品種對(duì)豬精液品質(zhì)的影響。經(jīng)過對(duì)比研究得出皮杜雜交豬采精量明顯高于長(zhǎng)白和大白豬,說明雜交品種在采精量方面表現(xiàn)出雜種優(yōu)勢(shì)[3]。因此,在生產(chǎn)中對(duì)種公豬的選擇不僅要根據(jù)當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)需求進(jìn)行選擇,對(duì)于品種的選擇也是不可忽視的。
在實(shí)際生產(chǎn)中,種公豬的使用年限一般為2~3年,精液品質(zhì)隨年齡的增長(zhǎng)會(huì)逐漸降低。劉成達(dá)等對(duì)6頭大白種公豬于8月齡至5歲期間進(jìn)行了3 890次人工采精,研究不同年齡對(duì)公豬精液品質(zhì)的影響,結(jié)果表明在不同生長(zhǎng)階段公豬精液密度和采精量不同,其中9月齡至4歲期間,精子密度最佳[4]。但在實(shí)際生產(chǎn)中,可根據(jù)本場(chǎng)種公豬的健康狀況、使用年限、精液質(zhì)量、配種率、產(chǎn)仔數(shù)和定期的抗體水平檢測(cè)(如可通過精液傳染的豬藍(lán)耳病等)結(jié)果等進(jìn)行綜合評(píng)定,及時(shí)淘汰不合格種公豬,去劣選優(yōu),進(jìn)而保證高品質(zhì)的精液供應(yīng)。
科學(xué)良好的飼養(yǎng)管理對(duì)取得好的精液品質(zhì)至關(guān)重要。前人在養(yǎng)殖生產(chǎn)上總結(jié)了四個(gè)字:養(yǎng)、防、檢、治(養(yǎng)即加強(qiáng)飼養(yǎng)管理;防即防疫滅病,防患于未然;檢即檢查群體,抗體檢測(cè);治即有病早治,合理治療)。由此可見飼養(yǎng)管理的重要性。對(duì)于種公豬的管理,必須專人負(fù)責(zé)管理,同時(shí)身兼采精技術(shù)員(打造良好的人豬信任關(guān)系,避免應(yīng)激)。在平時(shí)應(yīng)建立健全的免疫制度,定期進(jìn)行檢疫檢測(cè),完善衛(wèi)生消毒方案。養(yǎng)成良好的工作總結(jié)習(xí)慣,及時(shí)發(fā)現(xiàn)并妥善處理問題。
目前,成年種公豬的飼養(yǎng)以單欄飼養(yǎng)為主。單欄飼養(yǎng)可以減少外界干擾,杜絕相互爬跨和自淫惡習(xí),提供安靜的生長(zhǎng)環(huán)境,保持食欲正常,節(jié)省飼料[5]。為種公豬創(chuàng)造良好的生活環(huán)境,除提供寬敞明亮的豬舍外,還應(yīng)配備完整的供電、供水、通風(fēng)以及保溫和降溫等設(shè)備。種公豬舍的溫度一般在17~21 ℃較為適宜,超過27 ℃就要采取降溫措施,超過30 ℃將造成永久性死精。夏天高溫對(duì)種公豬生產(chǎn)性能有顯著影響,導(dǎo)致公豬食欲不振,性欲下降,公豬精液品質(zhì)下降,出現(xiàn)死精、少精、無精等情況。關(guān)于高溫對(duì)種公豬生產(chǎn)性能的影響有較多報(bào)道,都證明高溫會(huì)導(dǎo)致精液質(zhì)量下降[6-9]。
要保證種公豬舍內(nèi)空氣質(zhì)量良好,衛(wèi)生干凈清潔,種公豬活動(dòng)區(qū)域地面經(jīng)久耐用,并有良好的防滑作用。另外,還應(yīng)保證種公豬有適量充足的運(yùn)動(dòng),生產(chǎn)實(shí)踐表明,適量的運(yùn)動(dòng)不僅有利于種公豬身體健康更有利于提升種公豬精液品質(zhì)。劉開元在總結(jié)不同病例下的種公豬在恢復(fù)運(yùn)動(dòng)后的精液品質(zhì)的變化,總結(jié)出運(yùn)動(dòng)對(duì)公豬性欲和精液品質(zhì)都起著至關(guān)重要的作用[10]。其次,在日常的飼養(yǎng)管理和采精過程中,應(yīng)注意創(chuàng)造良好的人豬關(guān)系。非特殊情況下不準(zhǔn)打罵種公豬,避免出現(xiàn)性抑制。調(diào)教種公豬要有耐心,但有些種公豬具有攻擊性,應(yīng)注意個(gè)人的人身安全。
在日常飼養(yǎng)管理中,應(yīng)根據(jù)種公豬的體況合理及時(shí)調(diào)整日糧。種公豬體況不能過肥,應(yīng)控制在一定范圍,否則會(huì)影響利用年限甚至增加攻擊性。此外,還應(yīng)經(jīng)常檢查精液品質(zhì),根據(jù)精液品質(zhì)的優(yōu)劣調(diào)整營(yíng)養(yǎng)、運(yùn)動(dòng)和利用強(qiáng)度,以保證種公豬的健康和提高受胎率。
營(yíng)養(yǎng)為動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育所必需。養(yǎng)種公豬的目的是為了配種,營(yíng)養(yǎng)是維持種公豬生命活動(dòng)、產(chǎn)生精子和保持旺盛配種能力的物質(zhì)基礎(chǔ)。不同品種,不同生長(zhǎng)發(fā)育階段的種公豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求不同。種公豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的需求比較特殊,故在種公豬飼料選擇方面,應(yīng)選擇大公司生產(chǎn)的種公豬專用料,而不是用母豬料、仔豬料或者育肥料替代。營(yíng)養(yǎng)不均衡會(huì)影響種公豬健康,降低精液品質(zhì)。
飼喂種公豬應(yīng)定時(shí)定量,每次不易太飽,飼料體積也不宜過大,應(yīng)以精料為主。李光軒研究認(rèn)為,營(yíng)養(yǎng)過?;蛘哌^低都會(huì)使種公豬精液品質(zhì)下降,且種公豬合理的營(yíng)養(yǎng)供給應(yīng)以中上等膘為宜[11]。此外,還要根據(jù)本場(chǎng)生產(chǎn)情況和種公豬的使用強(qiáng)度進(jìn)行合理的飼喂。如對(duì)體重100 kg或180日齡后的種公豬實(shí)行限飼管理,飼喂量在3 kg/d,成年種公豬約2.5 kg/d。蛋白質(zhì)對(duì)精液的數(shù)量與品質(zhì)、精子活力與壽命都有很大影響,精液中干物質(zhì)占5%,其中蛋白質(zhì)為3.7%。因此,種公豬日糧中必須提供優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)飼料,尤其是在配種旺季更不可忽視[10],在配種旺季,日糧中添加1~2枚雞蛋能保持種公豬旺盛的體力。特別是利用強(qiáng)度大的種公豬還要注意日糧額外添加約25 mg/kg維生素E和生物素。
由于夏季溫度較高,影響種公豬的采食量,要注意夏季飼料供應(yīng),可在氣溫較低的早上或傍晚進(jìn)行飼喂。為提高采食量和防止剩余飼料霉變,可增加飼喂次數(shù)和減少飼喂量。在平時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制飼料質(zhì)量,防止混入有毒物質(zhì)和霉變,造成不必要的損失。
采精頻率由單位時(shí)間內(nèi)獲得最多的有效精子數(shù)決定。不同月齡采精頻率不同,如8~1 2月齡每周1次,1 2~1 8月齡5 d一次,18月齡以上一周兩次,更重要的是固定采精頻率。即使有些種公豬的精液不做配種用,也應(yīng)每周采精1次,以保持種公豬性欲和精液的質(zhì)量。
采精是精液處理的第一步也是重要一步,采精前的準(zhǔn)備工作和采精過程中的操作將對(duì)精液品質(zhì)造成巨大影響。如果準(zhǔn)備不妥當(dāng),技術(shù)操作不恰當(dāng),將會(huì)造成精液品質(zhì)嚴(yán)重下降,造成資源浪費(fèi)并且對(duì)公豬日后的采精也會(huì)造成不利影響。
采精前需要進(jìn)行對(duì)種公豬的選擇,實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備等以保證在最有效的時(shí)間內(nèi)采取精液并完成精液的稀釋,使精液在外接觸時(shí)間最短,盡量減少外界環(huán)境對(duì)精液的不利影響。
1)采精種公豬的準(zhǔn)備:根據(jù)當(dāng)天精液需要情況,確定用于采精種公豬的品種、耳號(hào),并嚴(yán)格按照采精頻率確定采精豬只。如果種公豬體表有太多臟物,需事先沖洗干凈并擦干體表水漬,避免采精時(shí)混入精液殺死精子。
2)實(shí)驗(yàn)室:一般精液實(shí)驗(yàn)室中主要儀器有空調(diào)(保持室溫21~23 ℃)、恒溫水浴鍋(36 ℃)、顯微鏡加熱板(38 ℃)、恒溫箱(38 ℃)以及17 ℃恒溫冰箱(儲(chǔ)藏剩余精液)等。在精液稀釋時(shí)為了使外界對(duì)精液的影響最小,要在采精前至少提前30 min打開各種電器提前進(jìn)行準(zhǔn)備。調(diào)節(jié)至溫度和濕度,以適應(yīng)精液稀釋的條件。
3)稀釋液:精液經(jīng)人工采精后需要用專業(yè)的稀釋液進(jìn)行稀釋,稀釋液也將直接影響后期精液的質(zhì)量。配制精液稀釋液應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。稀釋液最好在配制好60 min以后使用,盡量不要超過48 h。使用前1 h將配置好的稀釋液,置于在水浴鍋中預(yù)熱至35 ℃,以保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)混合均勻和達(dá)到適宜的稀釋溫度。
采精是一項(xiàng)非常重要并且很有技術(shù)含量的工作,技術(shù)員技術(shù)的嫻熟程度將對(duì)采精量和精液品質(zhì)有很大影響。在人工采精操作中應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
1)在操作中采精員一手帶雙層手套,另一手持已事先準(zhǔn)備好的采精杯,用于收集精液;將待采精的種公豬趕至采精欄。采精員擠出種公豬包皮積尿(避免采集時(shí)混入尿液殺死精子)后應(yīng)脫去外層手套,避免受污染的外層手套直接接觸公豬陰莖。
2)一般最初射出的少量(5~10 mL)精液和射精時(shí)的精清不接取,一般公豬分2~3個(gè)階段將濃精液射出,直到公豬射精完畢,射精過程歷時(shí)5~10 min。在采精期間禁止人為地終止射精,防止以后出現(xiàn)性抑制,造成采精量下降。
3)要注意避免包皮液、尿液混入到射出精液中。在采精過程中包皮液會(huì)沿著陰莖流下來混入精液中,殺死精子。為避免這個(gè)問題,可以用紙巾纏繞在陰莖上或讓集精杯位置高于包皮部位。
精液實(shí)驗(yàn)室是精液處理的場(chǎng)所,也是精液稀釋完成前接觸時(shí)間最長(zhǎng)的地方。實(shí)驗(yàn)室操作是精液處理的最重要環(huán)節(jié)。人工授精的過程就是人工授精技術(shù)員模仿公豬自然交配的過程。所以,要求人工授精技術(shù)員熟悉精子生產(chǎn)的自然過程,以便能夠在人工授精時(shí)盡可能地模仿這個(gè)過程。人工授精站實(shí)驗(yàn)室是精液檢查、處理、貯存的場(chǎng)所,為了生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的、符合輸精要求的精液,一定把好質(zhì)量關(guān),保證出站的每一份精液的活力不低于80%。因此,實(shí)驗(yàn)室日常工作需要注意以下幾點(diǎn)細(xì)節(jié):1)所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人工授精器材(精液袋等)都必須進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。因?yàn)槌鍪廴斯な诰鞑牡匿N售員往往會(huì)帶著器材去不止一個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)銷售,人工授精器材存在很大的生物安全問題。2)防止化學(xué)制劑殺死精子。實(shí)驗(yàn)室以及采精室內(nèi)不準(zhǔn)吸煙;不準(zhǔn)使用肥皂等類洗滌用品;不準(zhǔn)使用化學(xué)滅蚊蟲試劑(日常消毒工作可用酒精代替)。3)物品器皿的清洗消毒方法。采精器皿和精液稀釋器皿,以及采精手套均采用一次性物品。4)稀釋液的配制、精液檢查、稀釋和分裝一定按照人工授精操作規(guī)程進(jìn)行。5)在公豬射精結(jié)束后,應(yīng)在最短時(shí)間內(nèi)送至精液實(shí)驗(yàn)室。此時(shí)應(yīng)除去濾紙,不要帶入實(shí)驗(yàn)室,避免污染精液和實(shí)驗(yàn)室。為保證實(shí)驗(yàn)室溫度恒定和生物安全,實(shí)驗(yàn)室精液傳送門最好用雙扇門的小窗口。打開外端窗口放進(jìn)采精杯,然后關(guān)閉窗口,再讓實(shí)驗(yàn)室人員打開實(shí)驗(yàn)室端窗口取出精液進(jìn)行稀釋。采精欄與實(shí)驗(yàn)室之間的傳遞口的兩側(cè)窗只有在傳遞物品時(shí)才能按先后順序開啟使用。
采精后應(yīng)立即檢查精液的質(zhì)量,精液稀釋前后檢查項(xiàng)目不同。一般來說,原精的常用檢查項(xiàng)目主要有顏色、氣味、密度和初始活力、畸形率等。精液稀釋后檢查的項(xiàng)目主要有稀釋后的密度和活力、貯存后的活力和某些情況下混合精液的活力。
正常精液顏色呈乳白或淺灰白,精子密度越高,色澤愈濃,其透明度愈低。若帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液,若帶有淡紅色或紅褐色是含有血液。這樣的精液應(yīng)被舍棄,且向獸醫(yī)尋找原因。豬精液略帶腥味,如有異常氣味,應(yīng)被廢棄。此外,還需進(jìn)行精液活力檢查和精子密度等多項(xiàng)檢查,如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)棄之不用,并查找原因,避免造成嚴(yán)重?fù)p失。最后,認(rèn)真填寫種公豬精液品質(zhì)檢查記錄表,以便查找解決日后的相關(guān)問題。
精液稀釋的操作看似簡(jiǎn)單,卻往往是最容易造成精液品質(zhì)下降的關(guān)鍵步驟。在進(jìn)行稀釋操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行稀釋,并注意以下細(xì)節(jié):1)精液采集后應(yīng)盡快稀釋,原精貯存時(shí)間不能超過15 min。不能稀釋未經(jīng)品質(zhì)檢查或檢查不合格(活力0.8以下)的精液。在稀釋精液前,測(cè)量精液和稀釋液溫度兩者溫度相差不要超過±1 ℃;2)稀釋時(shí),將稀釋液沿盛精液的杯(瓶)壁或玻璃棒緩慢加入到精液中,然后輕輕搖動(dòng)或用消毒玻璃棒攪拌,使之混合均勻。稀釋為2~3次稀釋,先倍比(1∶1)稀釋,穩(wěn)定5~10 min后再稀釋成最終倍數(shù)。稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查,如果稀釋前后活力無明顯變化,即可進(jìn)行分裝與保存。如果活力下降,說明稀釋液的配制或稀釋操作有問題,不宜使用,并應(yīng)查明原因加以改進(jìn)。3)混合精液:研究表明混合精液可增加母豬受胎率及產(chǎn)仔數(shù)[12]。新鮮精液首先按1∶1稀釋,根據(jù)精子密度和混合精液的量記錄需加入稀釋液的量,將部分稀釋后精液放入水浴鍋保溫,重復(fù)收集2~3頭公豬品質(zhì)優(yōu)秀精液,將所要混精的精液置于足夠大的容器,加入剩余部分稀釋液,混均后進(jìn)行分裝。
調(diào)好精液分裝機(jī),根據(jù)生產(chǎn)的需要量,將精液分裝至精液袋或瓶,盡量排盡袋內(nèi)空氣防止震蕩。精液分裝完畢記錄標(biāo)簽后應(yīng)立即放入17 ℃精液保存恒溫箱貯藏,也可將精液瓶或袋用毛巾包嚴(yán)直接放入17 ℃精液保存恒溫箱內(nèi)。
目前,精液貯存最佳的方法是將其貯存在溫度設(shè)置在17 ℃的恒溫箱中。稀釋后的精液在貯存期間會(huì)沉淀、聚集,所以在使用前應(yīng)將精液搖勻后再使用。精子在短效稀釋液中可保存3 d、中效稀釋液中可保存4~6 d、長(zhǎng)效稀釋液中可保存7~9 d;稀釋的精液在貯存2~3 d后,有效精子數(shù)將會(huì)減少,因此在使用前需要檢查精液的活力,以確保使用的精液活力大于80%。無論何種稀釋液保存的精液,應(yīng)盡快用完。
時(shí)間超過1 h的精液運(yùn)輸應(yīng)置于保溫較好的裝置內(nèi),如車載17 ℃恒溫箱,如運(yùn)輸時(shí)間低于0.5 h可用雙層泡沫箱。精液運(yùn)輸過程中避免強(qiáng)烈震動(dòng)。
精液的收集、儲(chǔ)存、稀釋和運(yùn)輸?shù)冗^程都必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程,避免精液受到污染,導(dǎo)致精液質(zhì)量下降。除了規(guī)范實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)室操作外,最終還需要具有熟練技能和高度責(zé)任心的技術(shù)員,因?yàn)闊o論是從種豬的選擇與飼養(yǎng)管理,還是精液的采集與稀釋和高品質(zhì)精液的獲得都需要技術(shù)人員操作。
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