規(guī)模豬場肥豬偽狂犬病毒感染的血清學(xué)診斷與分析

王 銳，方 超，柴強(qiáng)強(qiáng)，李潤成

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南長沙410128）

規(guī)模豬場肥豬偽狂犬病毒感染的血清學(xué)診斷與分析

王 銳，方 超，柴強(qiáng)強(qiáng)，李潤成※

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南長沙410128）

文章對湖南衡陽某規(guī)模豬場肥豬表現(xiàn)疑似偽狂犬病毒感染的病例進(jìn)行了血清學(xué)診斷。采集了不同臨床表現(xiàn)豬群的血清，進(jìn)行偽狂犬病毒野毒（gE）抗體檢測。結(jié)果顯示：4份出現(xiàn)發(fā)病癥狀1～2天的豬血清gE抗體檢測為陰性，8份出現(xiàn)發(fā)病癥狀4～6天的豬血清中5份gE抗體檢測為陽性，3份為可疑。另有4份發(fā)病并康復(fù)的豬血清和4份同群未發(fā)病的豬血清gE抗體檢測均為陽性。通過采取針對偽狂犬病毒的緊急措施將該豬場疫情控制在發(fā)病流行初期，減少了豬場損失，為血清學(xué)方法在偽狂犬病毒疫情診斷中的運(yùn)用提供了參考數(shù)據(jù)。

肥豬；偽狂犬病毒；豬偽狂犬??；血清學(xué)診斷

豬偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（PRV）感染引起的豬場常見傳染病，豬和鼠是PRV的主要宿主和傳染源，可通過消化道、生殖道、皮膚黏膜以及飛沫、母乳等接觸傳播[1]。PRV感染能導(dǎo)致新生仔豬發(fā)熱、腦脊髓炎癥狀和急性死亡，生長豬、育肥豬呼吸道癥狀，種豬繁殖障礙[2,3]，其臨床癥狀與感染豬只的年齡階段、感染途徑、感染毒株的毒力和豬只免疫水平等相關(guān)[4]。該病常呈隱形感染，感染豬體可長期帶毒和排毒，在養(yǎng)殖密度較大的地區(qū)多發(fā)，給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。目前，通過疫苗免疫和gE抗體檢測逐步淘汰陽性豬只，是凈化豬場或局部地區(qū)PR的常用和有效手段，因此對豬群的PRV免疫和感染情況進(jìn)行正確判斷具有重要的意義[5,6]。

1 臨床癥狀

2015年4月，湖南衡陽某約400頭母豬的規(guī)模豬場的肥豬欄舍中，有10多頭肥豬表現(xiàn)體溫升高（41℃左右），體表發(fā)紅，精神沉郁，不同程度的呼吸癥狀，伴有打噴嚏、厭食等。畜主最初懷疑為豬丹毒，對發(fā)病豬使用青霉素治療未見好轉(zhuǎn)，后懷疑為附紅細(xì)胞體病，用磺胺類藥物配合多西環(huán)素治療，也未見好轉(zhuǎn)。發(fā)病豬在出現(xiàn)明顯臨床癥狀后4～6天，有逐漸康復(fù)的跡象，但在豬群中也存在疫病逐步蔓延的情況。

2 血清偽狂犬病毒gE抗體檢測

根據(jù)豬群發(fā)病表現(xiàn)及畜主反映，懷疑存在偽狂犬病毒感染的可能，從4頭出現(xiàn)發(fā)病癥狀1～2天的生豬（血清編號1～4）、8頭出現(xiàn)發(fā)病癥狀1～2天的生豬（血清編號5～12）、4頭發(fā)病康復(fù)的生豬（血清編號13～16）、4頭與發(fā)病豬同群但臨床表現(xiàn)正常的生豬（血清編號17～20）采集血液并標(biāo)號，用IDEXX公司生產(chǎn)的ELISA試劑盒檢測偽狂犬病毒gE抗體。結(jié)果見表1、圖1。由表1和圖1可見，剛發(fā)病的生豬偽狂犬病毒gE抗體均為陰性，發(fā)病后5～6天的生豬偽狂犬病毒gE抗體均處于陰性與陽性的臨界值附近，部分個體已轉(zhuǎn)為陽性，而發(fā)病康復(fù)豬偽狂犬gE抗體在臨界值附近，但均已變?yōu)殛栃?，同群臨床表現(xiàn)正常豬均已存在較高gE抗體水平。

表1 偽狂犬病毒g E抗體檢測結(jié)果

圖1 不同來源血清偽狂犬病毒g E抗體檢測結(jié)果

3 分析與討論

當(dāng)前,規(guī)模豬場普遍使用的偽狂犬病毒疫苗為gE基因缺失疫苗，免疫后生豬不會產(chǎn)生針對gE蛋白的抗體，所以通過檢測生豬是否存在gE蛋白的抗體可判定生豬近期內(nèi)是否有感染過偽狂犬病毒野毒[7,8]。

根據(jù)該豬場發(fā)病豬臨床癥狀及不同類型生豬血清gE抗體檢測結(jié)果，基本可以確定該場的病豬為PRV野毒感染。同時、建議豬場立即隔離臨床發(fā)病生豬，給哺乳仔豬進(jìn)行全群滴鼻普免偽狂犬疫苗，保育豬、肥豬、后備母豬肌肉注射一次偽狂犬疫苗，所有種豬在配種前再加強(qiáng)免疫1次?；究刂屏说囊卟〉倪M(jìn)一步蔓延。此外，本文還對該次病例進(jìn)行了藍(lán)耳、流感病毒的檢測，結(jié)果均為陰性。因此可以確定該次豬場發(fā)病主要由偽狂犬病毒感染引起。

通過血清學(xué)檢測不同臨床表現(xiàn)生豬血清gE抗體對于臨床上偽狂犬病毒的診斷具備方便快捷的優(yōu)勢，尤其是針對當(dāng)前往往是肥豬首先感染發(fā)病的流行特點(diǎn)而言[9]，可以快速的鎖定病原，采取針對性的緊急防制措施，這對于控制疫病的大范圍影響具有很重要的作用。采集剛發(fā)病、發(fā)病有5～6天、發(fā)病康復(fù)、同群正常豬的血液，目的是針對生豬偽狂犬病毒感染后抗體產(chǎn)生的規(guī)律而言，剛發(fā)病的生豬一般抗體尚未升起、而發(fā)病有5～6天的生豬群應(yīng)該正處于抗體剛產(chǎn)生的階段，康復(fù)豬則應(yīng)該已變?yōu)榭贵w陽性，至于同群正常豬則要么尚未感染，處于抗體陰性階段、要么在很早一段時間已經(jīng)感染，只是當(dāng)時沒有表現(xiàn)出明顯的臨床發(fā)病癥狀（偽狂犬病毒感染大豬、在飼養(yǎng)管理和季節(jié)氣候好的情況下，不一定會表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀）[10]，抗體水平已上升到較高的水平。結(jié)果如果符合預(yù)期的規(guī)律則可以診斷正在發(fā)病的豬群存在PRC野毒感染。因此，臨床上gE抗體檢測配合gB抗體檢測對于鑒別診斷豬群是否感染PRV野毒具有一定的優(yōu)勢。

PR的凈化主要是通過使用PRV-gE基因缺失疫苗與gE-ELISA抗體鑒別檢測來進(jìn)行的。在歐美等國家和地區(qū)，已經(jīng)應(yīng)用該方法成功控制或凈化了該病。豬場應(yīng)通過對豬群抗體水平定期監(jiān)測，適時補(bǔ)免PRV基因工程疫苗和相應(yīng)的鑒別診斷ELISA檢測，逐步淘汰感染豬，擴(kuò)大健康豬群從而完成進(jìn)行PR的凈化，與此同時還要加強(qiáng)其他疫病特別是豬瘟、藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病等免疫抑制性疫病的免疫和監(jiān)測[6,10]。

除上述防制措施以外，養(yǎng)殖場還應(yīng)該加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激因素，提高豬群的免疫水平，保持環(huán)境衛(wèi)生，嚴(yán)格定期消毒，做好驅(qū)鼠滅鼠工作，慎重對待外來引種等等[8-10]。嚴(yán)格做好上述的防制措施，一定能控制直至凈化根除PRV感染的流行和爆發(fā)。

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S855.3

A

1006-4907（2016）02-0022-03

10.3969/j.issn.1006-4907.2016.02.011

2016-02-18

※通訊作者：李潤成。