原發(fā)性開(kāi)角型青光眼房水蛋白含量的檢測(cè)及其與中醫(yī)證型關(guān)系的研究

彭俊，李建超,2*，姚小磊，曾志成，徐劍，江冰，彭抿，彭清華*

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長(zhǎng)沙410007；2.湖南省郴州市第一人民醫(yī)院眼科，湖南郴州420000；3.湖南省桂陽(yáng)縣人民醫(yī)院眼科，湖南郴州430000；4.中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院眼科，湖南長(zhǎng)沙410006；5.湖南省長(zhǎng)沙星沙人民醫(yī)院眼科，湖南長(zhǎng)沙410600）

原發(fā)性開(kāi)角型青光眼房水蛋白含量的檢測(cè)及其與中醫(yī)證型關(guān)系的研究

彭俊1，李建超1,2*，姚小磊1，曾志成3，徐劍3，江冰4，彭抿5，彭清華1*

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長(zhǎng)沙410007；2.湖南省郴州市第一人民醫(yī)院眼科，湖南郴州420000；3.湖南省桂陽(yáng)縣人民醫(yī)院眼科，湖南郴州430000；4.中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院眼科，湖南長(zhǎng)沙410006；5.湖南省長(zhǎng)沙星沙人民醫(yī)院眼科，湖南長(zhǎng)沙410600）

目的探討原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者眼房水蛋白含量的改變及其與中醫(yī)辨證分型之間的關(guān)系。方法采用溴甲酚綠比色法對(duì)128例128只眼原發(fā)性開(kāi)角型青光眼和64例64只眼老年性白內(nèi)障患者的房水蛋白進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果開(kāi)角型青光眼疾病分類各組及中醫(yī)證型(肝郁氣滯證、痰濕犯目證、肝腎陰虛證)各組均表現(xiàn)為房水白蛋白和總蛋白含量增高,與老年性白內(nèi)障組相比,各組均有非常顯著性差異(P＜0.01)。開(kāi)角型青光眼疾病分類組間比較及中醫(yī)證型組間比較,房水白蛋白和總蛋白含量亦均有顯著性差異(P＜0.05)或非常顯著性差異(P＜0.01)。結(jié)論原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者的血-房水屏障功能遭到破壞,房水的粘度增加,房水淤積于眼內(nèi)。

青光眼；開(kāi)角型；房水蛋白；肝郁氣滯證；痰濕犯目證；肝腎陰虛證

既往研究表明：正常人眼中房水蛋白含量極少,約為0.05～0.2 g/L,為人血漿蛋白的1/400～1/300。房水蛋白含量的增高與否,是衡量眼中血-房水屏障功能是否遭到破壞的一個(gè)重要指征。當(dāng)各種原因致血-房水屏障遭到破壞時(shí),可使房水蛋白含量明顯高于正常眼的水平。本課題組曾對(duì)原發(fā)性閉角型青光眼房水蛋白含量的進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)其與中醫(yī)證型關(guān)系的進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)閉角型青光眼疾病分類各組及中醫(yī)證型各組均表現(xiàn)為房水白蛋白和總蛋白含量增高，其疾病分類組間比較及中醫(yī)證型組間比較,房水白蛋白和總蛋白含量亦均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)[1]。為了探討原發(fā)性開(kāi)角型青光眼及其中醫(yī)證型之間房水蛋白含量,對(duì)來(lái)自湖南省郴州市第一人民醫(yī)院、湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院、湖南省桂陽(yáng)縣人民醫(yī)院、中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院、長(zhǎng)沙星沙人民醫(yī)院眼科的128例不同證型原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者的房水蛋白進(jìn)行了測(cè)定,并與本組青光眼患者年齡相匹配的年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者64例的房水蛋白進(jìn)行了對(duì)照研究。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

原發(fā)性開(kāi)角型青光眼（簡(jiǎn)稱開(kāi)青組）128例，既往無(wú)眼部手術(shù)及外傷史。其中男73例，女55例；年齡31～53歲，平均年齡（41.31±8.21）歲。中醫(yī)辨證為肝郁氣滯證56例，痰濕犯目證37例，肝腎陰虛證35例。年齡相關(guān)性白內(nèi)障組(白內(nèi)障組)64例64只眼,為無(wú)眼壓增高及前部色素膜炎癥的年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者。其中男35例,女29例,年齡42～75歲,平均年齡(56.72±10.83)歲。

1.2 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)

原發(fā)性急性開(kāi)角型青光眼的診斷標(biāo)準(zhǔn)以趙堪興、楊培增主編高等醫(yī)藥院校8版教材《眼科學(xué)》[2]為準(zhǔn)。中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《中醫(yī)臨床診療術(shù)語(yǔ)—證候部分》[3]和彭清華主編全國(guó)中醫(yī)藥行業(yè)“十二五”規(guī)劃教材《中醫(yī)眼科學(xué)》（第9版）[4]等制訂。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)眼部并發(fā)癥者均可納入。所有單位參與研究人員均經(jīng)統(tǒng)一培訓(xùn)，并制定相關(guān)操作流程。所有符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的初選患者，均經(jīng)同一復(fù)核人再次確認(rèn)其證候類型后方可納入，確保辨證準(zhǔn)確性。具體辨證標(biāo)準(zhǔn)如下。

1.3.1 肝郁氣滯證眼部癥狀：（1）目珠微脹；（2）眼珠變硬(眼壓＜5.33 kPa)；（3）瞳神散大；（4）視力下降。全身癥狀：（1）情志不舒；（2）脅痛；（3）心煩口苦；（4）脈弦。具備眼部和全身癥狀各2項(xiàng)即可。

1.3.2 痰濕犯目證眼部癥狀：（1）頭目微脹；（2）眼珠變硬(眼壓＜5.33 kPa)；（3）瞳神散大；（4）視物昏蒙。全身癥狀：（1）頭昏眩暈；（2）惡心欲嘔；（3）舌淡苔白膩；（4）脈滑。具備眼部癥狀2項(xiàng)和全身癥狀3項(xiàng)即可。

1.3.3 肝腎陰虛證眼部癥狀：（1）頭目微脹；（2）瞳神散大；（3）眼珠變硬(眼壓＜5.33 kPa)；（4）視力下降。全身癥狀：（1）頭暈失眠；（2）腰膝酸軟無(wú)力；（3）舌紅少苔；（4）脈細(xì)沉無(wú)力。具備眼部和全身癥狀各2項(xiàng)即可。排除標(biāo)準(zhǔn)：雖符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，有嚴(yán)重心腦血管疾病，不能耐受手術(shù)的患者均被排除。

1.4 房水蛋白測(cè)定方法

開(kāi)角型青光眼患者均于行抗青光眼手術(shù)之前、年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者均于行白內(nèi)障超聲乳化+人工晶體植入手術(shù)之前采集房水。在2%利多卡因局部麻醉下,在角膜上緣內(nèi)1 mm鼻側(cè)或顳側(cè)透明角膜處，用1 mL皮試針從切口刺入前房,緩慢抽吸房水0.2～0.3 mL,置小試管內(nèi),封口并送檢,測(cè)定房水總蛋白和白蛋白。每例患者只采集1只眼的房水。房水總蛋白測(cè)定采用雙縮脲法,房水白蛋白測(cè)定采用溴甲酚綠比色法。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組患者房水蛋白含量的比較

開(kāi)角型青光眼患者的房水蛋白含量與年齡相關(guān)性白內(nèi)障組相比,均表現(xiàn)為房水白蛋白和總蛋白的增高，均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=26.21，P＜0.01)和(t= 26.21，P＜0.01)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者房水蛋白含量的比較(±s)

表1 兩組患者房水蛋白含量的比較(±s)

注：與白內(nèi)障組比較,**P＜0.01。

組別開(kāi)青組白內(nèi)障組眼數(shù)（只）128 64白蛋白（g/L）1.586±0.247** 0.728±0.122總蛋白（g/L）5.861±0.467** 3.546±0.326

2.2 開(kāi)角型青光眼中醫(yī)證型間房水蛋白的比較

開(kāi)角型青光眼中醫(yī)證型肝郁氣滯、痰濕犯目、肝腎陰虛3組與年齡相關(guān)性白內(nèi)障對(duì)照組相比,均表現(xiàn)為房水白蛋白和總蛋白的增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01)；中醫(yī)各證型組間房水白蛋白和總蛋白相互比較,其中以痰濕犯目證增加的幅度最大,肝郁氣滯證次之,肝腎陰虛證最小。其中白蛋白肝郁氣滯證和痰濕犯目證比較(t=3.63，P＜0.01)、肝郁氣滯證與肝腎陰虛證比較（t=2.31，P＜0.05）、痰濕犯目證與肝腎陰虛證比較（t=6.05，P＜0.01），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)?？偟鞍赘斡魵鉁C和痰濕犯目證比較(t=2.43，P＜0.05)、肝郁氣滯與肝腎陰虛比較（t= 3.71，P＜0.01）、痰濕犯目證與肝腎陰虛證比較（t= 6.63，P＜0.01），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

3 討論

房水來(lái)自血液,但由于眼前節(jié)存在血-房水屏障，可限制較大分子物質(zhì)自血液進(jìn)入房水，因此房水蛋白含量極少。但當(dāng)眼外傷、虹膜睫狀體炎或作虹膜切除等內(nèi)眼手術(shù)后，由于血-房水屏障遭到一時(shí)性破壞，使屏障的通透性增強(qiáng),房水蛋白含量即可數(shù)倍或數(shù)十倍的增多[5]。因此，許多學(xué)者均認(rèn)為房水蛋白含量是判斷血-房水屏障有無(wú)破壞的重要指標(biāo)。

表2 開(kāi)角型青光眼中醫(yī)證型組間房水蛋白的比較±s)

表2 開(kāi)角型青光眼中醫(yī)證型組間房水蛋白的比較±s)

注：與白內(nèi)障組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與痰濕犯目證組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01，與肝腎陰虛證比較○P＜0.05，○○P＜0.01。

組別肝郁氣滯證痰濕犯目證肝腎陰虛證白內(nèi)障組眼數(shù)（只）56 37 35 64白蛋白（g/L）1.537±0.264*△△○1.725±0.212** 1.412±0.227*△△0.728±0.122總蛋白（g/L）5.643±0.502*△○○5.872±0.342** 5.261±0.437*△△3.546±0.326

尤毓陸等報(bào)告原發(fā)性閉角型青光眼50例50只眼的房水蛋白含量，其總蛋白含量的均值為5.89 g/L，總蛋白和白蛋白含量的最低值和最高值均高出正常值數(shù)倍甚至數(shù)十倍[6]，與本課題組對(duì)原發(fā)性閉角型青光眼患者的觀察結(jié)果[1-7]相近。本文對(duì)原發(fā)性開(kāi)角型青光眼房水蛋白的觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)，開(kāi)角型青光眼患者的房水白蛋白和總蛋白含量均顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者與原發(fā)性閉角型青光眼一樣，其血—房水屏障亦遭受明顯破壞。

周金子等[8]研究發(fā)現(xiàn)，采用放射免疫分析法(RIA)檢測(cè)檢測(cè)青光眼患者房水中β淀粉樣蛋白(β-AP)的含量，并與白內(nèi)障患者進(jìn)行對(duì)照，結(jié)果青光眼組β-AP1-42的含量為(3.0540±1.0828)pg/mL，白內(nèi)障組含量為(2.3667±1.1067)pg/mL,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。王玲等[9]通過(guò)給激光虹膜切除術(shù)后動(dòng)物口服前列腺素合成抑制劑進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)術(shù)后其眼壓升高值及房水蛋白含量均較不給服用前列腺素合成抑制劑的低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。因而認(rèn)為組織合成釋放前列腺素是血-房水屏障破壞的主要原因。王金華等[10]應(yīng)用激光閃光細(xì)胞檢測(cè)儀測(cè)量抗青光眼術(shù)后白內(nèi)障超聲乳化吸出及人工晶體植入術(shù)后的房水的平均閃輝值，反應(yīng)房水蛋白濃度及血—房水屏障破壞程度。

原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者在血管內(nèi)皮，血小板功能及血流量等方面發(fā)生改變外[11-12]，其房水蛋白含量的顯著增加，是由于眼血-房水屏障破壞，使屏障的通透性增強(qiáng)，血漿蛋白易于通過(guò)睫狀突上皮層進(jìn)入前、后房，而使房水蛋白含量增高，并使房水膠體滲透壓增高和房水粘度增加，小梁網(wǎng)的濾過(guò)功能障礙進(jìn)一步促使房水排出小梁網(wǎng)阻力增加,眼壓更加增高。

從原發(fā)性開(kāi)角型青光眼中醫(yī)辨證分型組間房水蛋白檢測(cè)來(lái)分析，開(kāi)角型青光眼肝郁氣滯、痰濕犯目、肝腎陰虛各證型組房水白蛋白和總蛋白均明顯高于對(duì)照組。房水蛋白的增加,提示房水的粘度增加，房水淤積于眼內(nèi)。說(shuō)明原發(fā)性開(kāi)角型青光眼不論其中醫(yī)病理機(jī)理如何,均存在房水(神水)淤積于眼內(nèi)的病理特點(diǎn)，這種病變特點(diǎn)的嚴(yán)重程度在原發(fā)性開(kāi)角型青光眼3證型組中呈現(xiàn)痰濕犯目證＞肝郁氣滯證＞肝腎陰虛證的趨勢(shì)。

在本項(xiàng)研究中，為測(cè)定原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者房水中蛋白含量，選擇了年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者作為正常對(duì)照組進(jìn)行比較。通過(guò)對(duì)64例64只眼年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者房水蛋白含量的測(cè)定，其房水總蛋白均值為(3.546±0.326)g/L，白蛋白均值為(0.728±0.122)g/L，均高于正常人房水蛋白含量。但是與本研究年齡相對(duì)較輕的原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者的房水蛋白含量相比，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上卻仍有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。同樣能說(shuō)明原發(fā)性開(kāi)角型青光眼患者的血-房水屏障功能明顯減退而出現(xiàn)障礙。因此，可以認(rèn)為血—房水屏障功能狀況，除受年齡影響外，原發(fā)性開(kāi)角型青光眼疾病本身是影響血—房水屏障功能的重要因素。

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（本文編輯 李 杰）

Study on the Relationship Between the Contents of Aqueous Humor Protein in Patients with Primary Open Angle Glaucoma and the TCM Syndrome Types

PENG Jun1,LI Jianchao1,2*,YAO Xiaolei1,ZENG Zhicheng3,XU Jian3,JIANG Bing4,PENG Min5,PENG Qinghua1*
（1.The First Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese Medicine,Changsha,Hunan 410007,China;2.Chenzhou First People's Hospital of Hunan,Chenzhou,Hunan 420000,China;3.Guiyang People's Hospital of Hunan,Chenzhou,Hunan 430000,China;4.Xiangya Second Hospital,Central South University,Changsha,Hunan 410006,China;5.Xingsha People's Hospital of Hunan,Changsha,Hunan 410600,China）

ObjectiveTo explore the relationship between the protein content in aqueous humor of patients with primary open angle glaucoma and the TCM Syndrome Types.MethodsThe aqueous humor protein in 128 cases of primary open angle glaucoma and 34 cases of senile cataract patients was measured by bromocresol green colorimetric method.ResultsThe aqueous humor albumin and total protein were increased from open angle glaucoma disease classification groups and the TCM syndrome types(liver depression and Qi stagnation syndrome,phlegm-damp invading the eyes syndrome,liver-kidney Yin deficiency syndrome),compared with the age-related cataract group,each group was statistically significant(P＜0.01).There were significant differences in the levels of albumin and total protein in the patients with open angle glaucoma and TCM syndrome types(P＜0.05 or P＜0.01).ConclusionThe blood aqueous barrier function in patients with primary open angle glaucoma was destroyed,the viscosity of aqueous humor increased,and the aqueous humor was deposited in the eyes.

glaucoma;openangletype;aqueoushumorprotein;liverdepressionandQistagnationsyndrome; phlegm-damp invading the eyes syndrome;liver-kidney Yin deficiency syndrome

R276.7

A

10.3969/j.issn.1674-070X.2016.12.008

2016-08-01

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81273807，81403437）；教育部博士學(xué)科點(diǎn)基金資助項(xiàng)目（20124323110006）；湖南省自然科學(xué)基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目（11JJ2050）；湖南省教育廳科研基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目（06A052，10A094）；湖南省研究生創(chuàng)新基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目（CX2013A013）；中醫(yī)診斷學(xué)國(guó)家重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放基金重點(diǎn)項(xiàng)目（2014-06）；湖南省高層次衛(wèi)生人才“225”工程培養(yǎng)項(xiàng)目資助；國(guó)家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)眼科學(xué)重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目；湖南省中醫(yī)五官科學(xué)重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目。

彭俊，男，醫(yī)學(xué)碩士、醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合眼科研究。

*彭清華，男，二級(jí)教授，主任醫(yī)師，博士研究生導(dǎo)師，E-mail：pqh410007@126.com；李建超，男，醫(yī)學(xué)博士，主任醫(yī)師，E-mail：jianchaoli@163.com。