PTTG1及其結(jié)合因子PBF在皮膚病中的研究進(jìn)展

沈霽陽(yáng) 李 偉 滿孝勇 鄭 敏

?

·綜述·

PTTG1及其結(jié)合因子PBF在皮膚病中的研究進(jìn)展

沈霽陽(yáng) 李 偉 滿孝勇 鄭 敏

垂體瘤轉(zhuǎn)化基因1(PTTG1)及其結(jié)合因子PBF在腫瘤發(fā)展、侵襲中發(fā)揮重要作用，是腫瘤預(yù)后指標(biāo)之一。近年研究表明：PTTG1和PBF在炎癥性皮膚病及皮膚惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。本文就PTTG1及PBF在皮膚病中的研究進(jìn)展作一綜述。

PTTG1； 安全素； PBF； 銀屑??； 腫瘤

1 PTTG1及 PBF概述

1.1 PTTG1簡(jiǎn)介 垂體瘤轉(zhuǎn)化基因1(PTTG1)：又名安全素(securin)，最早在1997年由小鼠垂體瘤細(xì)胞中分離得到，后被歸為安全素家族的一員[1]，定位于5q33.3[2]。

PTTG1作為一種參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)的多功能蛋白可誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化[3]。目前已知PTTG1在細(xì)胞活動(dòng)中所發(fā)揮的作用有：參與細(xì)胞周期由中期轉(zhuǎn)化至晚期的過(guò)程[4]，抑制姐妹染色單體的分離進(jìn)而導(dǎo)致非整倍體的形成[5]；通過(guò)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)誘導(dǎo)血管形成[6]；通過(guò)c-myc[7]的活化和/或通過(guò)與p53的特異性相互作用阻斷轉(zhuǎn)錄，從而阻止p53誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[8]。近來(lái)多項(xiàng)研究表明PTTG1可作為增殖性皮膚疾病的標(biāo)記物之一[9]。

1.2 PBF簡(jiǎn)介 PTTG1結(jié)合因子(PTTG1 binding factor， PBF)：又名PTTG1IP(pituitary tumor-transforming 1 interacting protein)，是一條由180個(gè)氨基酸形成的肽鏈，廣泛表達(dá)于正常人體組織[10]。PBF基因位于21q22.3，長(zhǎng)24 kb，包含6個(gè)外顯子。PTTG1與PBF的結(jié)合區(qū)域位于其C-端，與PBF對(duì)應(yīng)于第123-154個(gè)氨基酸[10]。PBF既能通過(guò)促進(jìn)PTTG1的核定位，還具有與PTTG1相似的轉(zhuǎn)化能力。PBF過(guò)表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞中，提示PBF基因本身就是一個(gè)原癌基因[11-13]。Stratford等[13]將穩(wěn)定表達(dá)PBF的NIH3T3注入裸鼠可誘導(dǎo)腫瘤形成，這提示PBF在體內(nèi)的致癌能力。Chien等[10]在PBF的C端附近發(fā)現(xiàn)雙分型核定位信號(hào)(bipartite NLS)，提示PBF可能屬于核蛋白。在COS-7細(xì)胞中，HA-PBF(hemagglutinin-tagged PBF)主要定位于細(xì)胞核，在細(xì)胞質(zhì)中也有顯著染色。突變的NLS主要將PBF的表達(dá)轉(zhuǎn)移至核周和細(xì)胞質(zhì)。這證明PBF的核定位需要NLS。GFP-PTTG(green fluorescent protein-tagged, PTTG)主要定位于細(xì)胞質(zhì)中，同時(shí)也有部分定位于細(xì)胞核中。然而，HA-PBF的共轉(zhuǎn)染導(dǎo)致了GFP-PTTG的核易位。而變異的NLS無(wú)法實(shí)現(xiàn)該效應(yīng)。這意味著PBF實(shí)現(xiàn)PTTG1的核轉(zhuǎn)位必須具備完整的NLS。

1.3 PTTG1與PBF的相互作用 PBF的表達(dá)與PTTG1的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。Stratford等[13]發(fā)現(xiàn)： PTTG1過(guò)表達(dá)顯著上調(diào)原代人類甲狀腺細(xì)胞和PTTG-null HCT116結(jié)腸腫瘤細(xì)胞內(nèi)PBF表達(dá)。野生型PTTG1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的NIH3T3細(xì)胞也呈PBF表達(dá)上調(diào)。相反，PBF穩(wěn)定細(xì)胞株中，PTTG1的表達(dá)未顯著激活。NIH3T3經(jīng)高水平PBF或PTTG穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后，均出現(xiàn)細(xì)胞增殖。PTTG1的突變形式既不能刺激PBF mRNA的表達(dá)，也不能與PBF相互作用，因此無(wú)法誘導(dǎo)細(xì)胞增殖。

Ishikawa等[6]對(duì)COS-7細(xì)胞行體外熒光測(cè)定發(fā)現(xiàn)：PTTG1可通過(guò)增強(qiáng)子特異效應(yīng)上調(diào)FGF-2表達(dá)。但單獨(dú)應(yīng)用PTTG1的上調(diào)作用極為有限；PBF過(guò)表達(dá)對(duì)FGF-2的增強(qiáng)子活性也沒(méi)有上調(diào)作用。然而，PTTG1和PBF的共表達(dá)可誘導(dǎo)FGF-2增強(qiáng)子活性增強(qiáng)3倍以上。說(shuō)明PBF對(duì)PTTG1轉(zhuǎn)錄活化FGF-2的過(guò)程是必需的。PBF可能增強(qiáng)了PTTG1的血管新生效應(yīng)。

2 PTTG1/PBF在皮膚病中的研究

2.1 正常角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)的PTTG1表達(dá)呈細(xì)胞周期依賴性調(diào)節(jié) PTTG1表達(dá)于基底細(xì)胞和基底周邊角質(zhì)形成細(xì)胞，定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)，說(shuō)明基底層周邊的部分角質(zhì)形成細(xì)胞依然具有增殖能力[4，14]。Ishitsuka等[4]分別在高鈣(0.12 mM)和低鈣(0.05 mM)條件下培養(yǎng)新生小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞(NMKs)。高鈣條件下的NMKs會(huì)經(jīng)歷細(xì)胞周期終止和細(xì)胞終末分化[15]的鈣轉(zhuǎn)換(calcium switch)現(xiàn)象。免疫印跡和實(shí)時(shí)定量PCR顯示：與高鈣條件下培養(yǎng)的未分化角質(zhì)形成細(xì)胞相比，低鈣條件下培養(yǎng)的未分化角質(zhì)形成細(xì)胞在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平上PTTG1的表達(dá)均被上調(diào)。表明PTTG1的細(xì)胞周期依賴性調(diào)節(jié)與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。

2.2 PTTG1可改變?nèi)祟惤琴|(zhì)形成細(xì)胞形成的上皮 Ishitsuka等[4]以HaCaT細(xì)胞和正常人類角質(zhì)形成細(xì)胞(NHKs)為模型，用小鼠PTTG1和神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體(NGFR)構(gòu)建PTTG1組成性表達(dá)模型；僅包含NGFR序列的介質(zhì)作為對(duì)照組；在蛋白質(zhì)水平上檢測(cè)外源性PTTG1的表達(dá)。用對(duì)抗PTTG1的shRNA慢病毒載體抑制HaCaT細(xì)胞和NHKs內(nèi)的外源性PTTG1；編碼亂序shRNA的載體作為陰性對(duì)照；以層狀角質(zhì)形成細(xì)胞形成的上皮樣結(jié)構(gòu)評(píng)價(jià)增殖能力。組成性PTTG1表達(dá)組產(chǎn)生的表皮樣上皮厚于對(duì)照組，而PTTG1缺失導(dǎo)致更薄的上皮形成。說(shuō)明PTTG1改變了來(lái)源于角質(zhì)形成細(xì)胞的表皮樣上皮的厚度，且對(duì)于角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖有重要影響。

PTTG1過(guò)表達(dá)抑制2D和3D培養(yǎng)的人角質(zhì)形成細(xì)胞的3D培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞能模擬生理?xiàng)l件下的分化模式。Ishitsuka等[4]以角質(zhì)形成細(xì)胞早期分化標(biāo)志物K1(K，角蛋白)、K10和K14、PTTG1的特異性抗體對(duì)3D培養(yǎng)的HaCaT細(xì)胞和NHKs行免疫染色；用分化終末期標(biāo)記物兜甲蛋白(loricrin)的特異性抗體對(duì)NHKs行免疫染色。 發(fā)現(xiàn)：HaCaT細(xì)胞內(nèi)PTTG1組成性過(guò)表達(dá)引起K1和K10陽(yáng)性層厚度減小而未分化層厚度增加，NHKs未分化層厚度增加而兜甲蛋白染色層沒(méi)有明顯的變化。提示過(guò)量的PTTG1特別抑制早期分化，而PTTG1缺失對(duì)人類角質(zhì)形成細(xì)胞分化無(wú)顯著效應(yīng)。以編碼小鼠PTTG1的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染NMKs。NMKs細(xì)胞經(jīng)"鈣轉(zhuǎn)換"誘導(dǎo)分化后顯示：在mRNA和蛋白質(zhì)水平上，K1和K10表達(dá)均顯著降低。提示PTTG1也抑制了2D條件下的正常角質(zhì)形成細(xì)胞早期分化。

2.3 PTTG1誘導(dǎo)的增殖效應(yīng)由cyclin B1，CDK1和c-Myc介導(dǎo) Ishitsuka等[4]通過(guò)免疫印跡法測(cè)定內(nèi)源性細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果顯示：PTTG1過(guò)表達(dá)的HaCaT細(xì)胞，NHKs和NMKs均有cyclin B1，周期蛋白依賴性激酶1(CDK1)和c-Myc的上調(diào)。表達(dá)于G2/M期的cyclin B1與CDK1形成“有絲分裂促進(jìn)因子”復(fù)合物。該復(fù)合物促進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程。這些被上調(diào)的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白可能通過(guò)加快細(xì)胞周期進(jìn)程，使得增殖增強(qiáng)并抑制早期分化。而PTTG1缺失的HaCaT細(xì)胞和NHKs的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)下調(diào)。PTTG1過(guò)表達(dá)的NHKs內(nèi)表達(dá)于S/G2期的cyclin A顯著上調(diào)，PTTG1缺失則引起cyclin A下調(diào)。而高度表達(dá)于G1期的cyclin D1沒(méi)有出現(xiàn)類似變化。提示PTTG1主要調(diào)節(jié)出現(xiàn)于G2/M期的內(nèi)源性細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)水平。由mRNA水平上測(cè)定發(fā)現(xiàn)：高鈣培養(yǎng)的PTTG1過(guò)表達(dá)NMKs內(nèi)PTTG1連同cyclin B1、CDK1表達(dá)同步顯著降低。提示外源性PTTG1蛋白的穩(wěn)定調(diào)節(jié)與細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換中這些上調(diào)的蛋白質(zhì)相關(guān)。

3 PTTG1/PBF在銀屑病中的研究

Zhang等[16]通過(guò)多級(jí)復(fù)制研究(multistage replication study)以擴(kuò)展他們之前的全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS)。該多級(jí)復(fù)制研究的樣本囊括了8312例中國(guó)銀屑病患者、12 919名中國(guó)正常人和3293例德美兩國(guó)銀屑病患者、4188名德美兩國(guó)正常人和254個(gè)美國(guó)核心家庭。該研究確定了包括PTTG1在內(nèi)的6個(gè)銀屑病易感基因位點(diǎn)，并發(fā)現(xiàn)PTTG1與中國(guó)漢族人口的銀屑病發(fā)病有顯著的關(guān)聯(lián)性(P=2.7×10-3)。第二級(jí)復(fù)制同樣顯示PTTG1與漢族人群的銀屑病發(fā)病有獨(dú)立相關(guān)性。Yang等[17]對(duì)362例關(guān)節(jié)病型銀屑病，585例尋常型銀屑病和1128例控制組行基因型分析。發(fā)現(xiàn)PTTG1與關(guān)節(jié)病型銀屑病有顯著的關(guān)聯(lián)性(OR=1.4，P=1.22×10-3)。

3.1 銀屑病表皮內(nèi)PTTG1的表達(dá)增強(qiáng) Cai等[9]通過(guò)免疫熒光發(fā)現(xiàn)：正常表皮內(nèi)，PTTG1主要位于基底層角質(zhì)形成細(xì)胞，約10%的基底層角質(zhì)形成細(xì)胞含有PTTG1；在銀屑病表皮細(xì)胞內(nèi)，大量PTTG1不僅存在于基底層角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)，還存在于基底層上角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)，其中約30%～40%的細(xì)胞表達(dá)PTTG1。正常表皮細(xì)胞和銀屑病表皮細(xì)胞內(nèi)PTTG1與β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)的相對(duì)比值分別為25.77±13.66和136.7±29.75(P<0.01)。在正常表皮細(xì)胞和銀屑病表皮細(xì)胞內(nèi)PTTG1均定位于細(xì)胞質(zhì)中；在HaCaT細(xì)胞內(nèi)，PTTG1主要定位于分裂后期的細(xì)胞質(zhì)中。

Ishitsuka等[18]對(duì)正常表皮細(xì)胞(n=6)和銀屑病表皮細(xì)胞(n=12)行免疫熒光和免疫組化。將PTTG1的表達(dá)水平結(jié)合Ki67、初始分化標(biāo)記物K10、終末分化標(biāo)記物中間絲相關(guān)蛋白(filaggrin，F(xiàn)LG)在正常表皮、交界區(qū)(n=10)、皮損區(qū)(n=12)三組細(xì)胞中進(jìn)行比較。結(jié)果表明：在正常表皮和交界區(qū)，PTTG1表達(dá)于基底角質(zhì)形成細(xì)胞和基底周邊角質(zhì)形成細(xì)胞，定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。PTTG1和Ki67有共存趨勢(shì)，提示PTTG1的細(xì)胞周期依賴性表達(dá)[19]。在皮損區(qū)，PTTG1表達(dá)增強(qiáng)，且PTTG1陽(yáng)性角質(zhì)形成細(xì)胞數(shù)目增多，甚至基底層周邊以上的角質(zhì)形成細(xì)胞也顯示強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)性。Ki67陽(yáng)性的角質(zhì)形成細(xì)胞數(shù)目同樣增加。另一方面，與邊界區(qū)、正常區(qū)相比，皮損區(qū)的K10和FLG表達(dá)水平顯著降低。以上發(fā)現(xiàn)提示，PTTG1與表皮過(guò)度增殖和分化缺陷的皮膚病有關(guān)。

3.2 角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)PTTG1的表達(dá)由EGFR介導(dǎo)的增殖信號(hào)誘導(dǎo) 表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖受到以表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)的表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)配位體[20,21]為代表的多種介質(zhì)調(diào)節(jié)。這些配位體的過(guò)量產(chǎn)生是銀屑病等慢性炎癥性疾病的典型特點(diǎn)[22]。Ishitsuka等[18]以不同劑量的EGF和TGF-α分別刺激NMKs和NHKs。WST1增殖測(cè)定法表明EGF和TGF-α上調(diào)PTTG1表達(dá)。實(shí)時(shí)定量PCR顯示：EGF和TGF-α可誘導(dǎo)PTTG1 mRNA表達(dá)，且該誘導(dǎo)效應(yīng)呈劑量依賴性。這些結(jié)果提示PTTG1的表達(dá)受EGFR介導(dǎo)的增殖信號(hào)誘導(dǎo)。

3.3 PTTG1與TNF-α通過(guò)正反饋循環(huán)抑制角質(zhì)形成細(xì)胞分化 TNF-α過(guò)度表達(dá)于銀屑病表皮，通過(guò)激活轉(zhuǎn)錄因子參與增殖、分化等細(xì)胞活動(dòng)[23]，在銀屑病的病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用?？筎NF-α治療可以緩解銀屑病表皮分化異常[24,25]。Ishitsuka等[18]通過(guò)免疫印跡和實(shí)時(shí)定量PCR分析PTTG1過(guò)表達(dá)NHKs內(nèi)的TNF-α表達(dá)水平，結(jié)果顯示PTTG1過(guò)表達(dá)NHKs內(nèi)TNF-α水平上調(diào)。ELISA顯示：PTTG1過(guò)表達(dá)上調(diào)TNF-α分泌水平。這些結(jié)果都提示角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)PTTG1過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)TNF-α生成。隨后用不同劑量TNF-α的培養(yǎng)基培養(yǎng)NMKs，用免疫印跡法和實(shí)時(shí)定量PCR分析上述NMKs內(nèi)PTTG1的表達(dá)程度，發(fā)現(xiàn)TNF-α對(duì)PTTG1表達(dá)的誘導(dǎo)水平呈劑量相關(guān)性。以上發(fā)現(xiàn)強(qiáng)烈提示銀屑病表皮中PTTG1過(guò)表達(dá)促進(jìn)TNF-α生成，TNF-α本身對(duì)PTTG1的表達(dá)具有誘導(dǎo)作用，即PTTG1和TNF-α之間存在正反饋循環(huán)。

Ishitsuka等[18]以不同濃度TNF-α的高鈣培養(yǎng)基誘導(dǎo)NMKs和NHKs分化。免疫印跡法和實(shí)時(shí)定量PCR顯示：NMKs內(nèi)，K1、K10、兜甲蛋白呈現(xiàn)TNF-α劑量依賴性的表達(dá)水平降低；NHKs內(nèi)，K1、K10、FLG、兜甲蛋白mRNA的表達(dá)水平在存在TNF-α的情況下均降低。提示TNF-α抑制角質(zhì)形成細(xì)胞分化。因此，PTTG1在銀屑病表皮內(nèi)的增強(qiáng)表達(dá)可通過(guò)與TNF-α相互作用導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)節(jié)和分化異常。

3.4 銀屑病表皮內(nèi)PTTG1過(guò)表達(dá)涉及cyclin A和 B1蛋白質(zhì)表達(dá)增加 Ishitsuka等[18]以免疫印跡法比較PTTG1過(guò)表達(dá)NHKs和銀屑病表皮細(xì)胞內(nèi)的cyclin A和B1的表達(dá)模式，結(jié)果顯示：NHKs內(nèi)PTTG1的過(guò)表達(dá)顯著上調(diào)cyclin A和B1。以cyclin A和B1陽(yáng)性角質(zhì)形成細(xì)胞數(shù)量為指標(biāo)評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)：與交界區(qū)(n=10)、正常組(n=6)相比，cyclin A和B1陽(yáng)性角質(zhì)形成細(xì)胞數(shù)量在皮損區(qū)(n=12)內(nèi)顯著上升，而在交界區(qū)和正常組之間沒(méi)有顯著差異。這些發(fā)現(xiàn)提示銀屑病表皮內(nèi)PTTG1過(guò)表達(dá)涉及到cyclin A 和 B1蛋白質(zhì)的表達(dá)增加，并可能導(dǎo)致細(xì)胞周期的異常調(diào)節(jié)。

Cai等[9]將細(xì)胞行細(xì)胞周期同步化處理。未經(jīng)任何處理的原代培養(yǎng)細(xì)胞大多數(shù)顯示PTTG1在細(xì)胞質(zhì)中有不同程度的表達(dá)，高PTTG1角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)cyclin B1的表達(dá)相應(yīng)增高，而低PTTG1角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)未見(jiàn)cyclin B1信號(hào)。處于G1和S期的銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有或僅有極少量的PTTG1和cyclin B1信號(hào)。Cyclin B1在G2期升高，在M期達(dá)到峰值。PTTG1在G2期和M期均有表達(dá)。PTTG1表達(dá)的高峰值與cyclin B1表達(dá)的高峰值、M期核多型現(xiàn)象最高水平相關(guān)。PTTG1和cyclin B1同時(shí)高表達(dá)于M期銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞，且有空間一致性。說(shuō)明處于細(xì)胞周期不同時(shí)相的銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)，PTTG1的表達(dá)與cyclin B1相關(guān)。

3.5 PTTG1可通過(guò)上調(diào)VEGF促進(jìn)銀屑病的發(fā)生 銀屑病表皮細(xì)胞增殖加快和皮膚炎癥浸潤(rùn)均伴隨新生血管大量形成。新生血管在銀屑病發(fā)病早期即已出現(xiàn)，且在皮損消退后消失[26-28]。人類角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)所有五種VEGF受體(VEGFR)，包括VEGFR1-3和共受體神經(jīng)纖毛蛋白1-2(NRP1-2)[28]。銀屑病患者皮損區(qū)細(xì)胞內(nèi)VEGF顯著高于正常皮膚[29]。銀屑病患者血清內(nèi)的VEGF水平高于正常人群，且VEGF的水平與銀屑病臨床嚴(yán)重程度成正比[30]。Akman等[31]報(bào)道了一例同時(shí)患有結(jié)腸癌和銀屑病的患者在經(jīng)貝伐單抗治療結(jié)腸癌一個(gè)半月后，銀屑病也得到了顯著緩解。在隨后為期3個(gè)月的隨訪中，該患者即使沒(méi)有接受治療，銀屑病也沒(méi)有復(fù)發(fā)。Schonthaler等[32]用抗VEGF抗體G6-31處理銀屑病樣皮膚改變的小鼠后，小鼠的疾病活動(dòng)被顯著抑制，真皮內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)顯著減少。提示抗VEGF治療能夠修復(fù)銀屑病樣病變皮膚。說(shuō)明VEGF在銀屑病的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮重要的作用，阻斷VEGF可能是銀屑病治療的研究前景之一。研究人員先后發(fā)現(xiàn)VEGF在銀屑病的病理機(jī)制中發(fā)揮如下作用：(1)促進(jìn)新生血管形成，從而為銀屑病表皮細(xì)胞過(guò)度增殖及新生血管形成提供基礎(chǔ)[27,29,30,33]；(2)在正常表皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)VEGFRs后，研究人員意識(shí)到銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生的VEGF不僅通過(guò)旁分泌，還可能通過(guò)自分泌發(fā)揮作用[28,34]；(3)在正常皮膚和培養(yǎng)的人角質(zhì)形成細(xì)胞中，細(xì)胞內(nèi)皮質(zhì)激素受體(GR)定位于細(xì)胞核內(nèi)；在銀屑病角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)，GR則定位于細(xì)胞質(zhì)。Man等[35]發(fā)現(xiàn)VEGF可抑制人角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)GR的細(xì)胞核定位，且這一過(guò)程需要p53參與。

近年來(lái)，PTTG1在多個(gè)實(shí)驗(yàn)中被證實(shí)可通過(guò)誘導(dǎo)VEGF促進(jìn)血管生成從而促進(jìn)細(xì)胞增殖。Minematsu等[36]發(fā)現(xiàn)，垂體腺瘤內(nèi)PTTG1水平顯著高于正常垂體組織；免疫組化雙染顯示PTTG1和VEGF共存于很多PTTG1陽(yáng)性細(xì)胞內(nèi)；垂體腺瘤VEGF水平、血管數(shù)量與PTTG1水平顯著相關(guān)。McCabe等[37]發(fā)現(xiàn)，在無(wú)功能垂體腺瘤中，PTTG1過(guò)表達(dá)顯著上調(diào)了VEGF mRNA和蛋白質(zhì)水平(3.2倍，P<0.05，n=81)。他們的體外實(shí)驗(yàn)顯示， PTTG1過(guò)表達(dá)上調(diào)了胚胎神經(jīng)元NT2(2.7倍，P<0.001，n=8)細(xì)胞和MCF-7乳腺癌細(xì)胞(1.9倍，P=0.03，n=10)、絨毛膜癌JEG-3細(xì)胞(P=0.0002，n=8)內(nèi)的VEGF水平。Hamid等[3]以PTTG1 cDNA轉(zhuǎn)染人胚胎腎細(xì)胞(HEK293)后將轉(zhuǎn)染后的HEK293注射入腫瘤。他們發(fā)現(xiàn)，經(jīng)PTTG1 cDNA轉(zhuǎn)染的腫瘤的VEGF分泌水平顯著升高。此外，還有實(shí)驗(yàn)表明PTTG1過(guò)表達(dá)顯著上調(diào)子宮肌瘤細(xì)胞[38]、甲狀腺腫瘤細(xì)胞[39]內(nèi)VEGF mRNA 水平。

PTTG1與VEGF在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的相互關(guān)系仍需進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)

PTTG1參加多種細(xì)胞活動(dòng)，可能通過(guò)調(diào)節(jié)TNF-α、cyclin A、cyclin B1、VEGF、p53等參與銀屑病等皮膚病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。期待更多PTTG1/PBF的深入研究，提高相關(guān)皮膚病的治療效果，并為多種皮膚病，尤其是增殖性皮膚病的治療、預(yù)后判斷提供新的選擇。

[1] Zou H, McGarry TJ, Bernal T, et al. Identification of a vertebrate sister-chromatid separation inhibitor involved in transformation and tumorigenesis[J]. Science,1999,285(5426):418-422.

[2] Sun L, Cheng DH, Wang ZX, et al. Association analyses identify six new psoriasis susceptibility loci in the Chinese population[J]. Nat Genet,2010,42(11):1005-1009.

[3] Hamid T, Malik MT, Kakar SS. Ectopic expression of PTTG1/securin promotes tumorigenesis in human embryonic kidney cells[J]. Mol Cancer,2005,4(1):3.

[4] Ishitsuka Y, Kawachi Y, Taguchi S, et al. Pituitary tumor-transforming gene 1 enhances proliferation and suppresses early differentiation of keratinocytes[J]. J Invest Dermatol,2012,132(7):1775-1784.

[5] Yu R, Heaney AP, Lu W, et al. Pituitary tumor transforming gene causes aneuploidy and p53-dependent and p53-independent apoptosis[J]. J Biol Chem,2000,275(47):36502-36505.

[6] Ishikawa H, Heaney AP, Yu R, et al. Human pituitary tumor-transforming gene induces angiogenesis[J]. J Clin Endocrinol Metab,2001,86(2):867-874.

[7] Pei L. Identification of c-myc as a down-stream target for pituitary tumor-transforming gene[J]. J Biol Chem,2001,276(11):8484-8491.

[8] Bernal JA, Luna R, Espina A, et al. Human securin interacts with p53 and modulates p53-mediated transcriptional activity and apoptosis[J]. Nat Genet,2002,32(2):306-311.

[9] Cai SQ, Dou TT, Wi L, et al. Involvement of pituitary tumor transforming gene 1 in psoriasis, seborrheic keratosis, and skin tumors[J]. Discov Med,2014,18(101):289-299.

[10] Chien W, Pei L. A novel binding factor facilitates nuclear translocation and transcriptional activation function of the pituitary tumor-transforming gene product[J]. J Biol Chem,2000,275(25):19422-19427.

[11] McCabe CJ, Khaira JS, Boelaert K, et al. Expression of pituitary tumour transforming gene (PTTG) and fibroblast growth factor-2 (FGF-2) in human pituitary adenomas: relationships to clinical tumour behaviour[J]. Clin Endocrinol (Oxf),2003,58(2):141-150.

[12] Watkins RJ, Read ML, Smith VE, et al. Pituitary tumor transforming gene binding factor: a new gene in breast cancer[J]. Cancer Res,2010,70(9):3739-3749.

[13] Stratford AL, Boelaert K, Tannahill LA, et al. Pituitary tumor transforming gene binding factor: a novel transforming gene in thyroid tumorigenesis[J]. J Clin Endocrinol Metab,2005,90(7):4341-4349.

[14] Zanet J, Freije A, Ruiz M, et al. A mitosis block links active cell cycle with human epidermal differentiation and results in endoreplication[J]. PLoS One,2010,5(12):e15701.

[15] Rothnagel JA, Greenhalgh DA, Gagne TA, et al. Identification of a calcium-inducible, epidermal-specific regulatory element in the 3'-flanking region of the human keratin 1 gene[J]. J Invest Dermatol,1993,101(4):506-513.

[16] Zhang XJ, Huang W, Yang S, et al. Psoriasis genome-wide association study identifies susceptibility variants within LCE gene cluster at 1q21[J]. Nat Genet,2009,41(2):205-210.

[17] Yang Q, Liu H, Qu L, et al. Investigation of 20 non-HLA (human leucocyte antigen) psoriasis susceptibility loci in Chinese patients with psoriatic arthritis and psoriasis vulgaris[J]. Br J Dermatol,2013,168(5):1060-1065.

[18] Ishitsuka Y, Kawachi Y, Maruyama H, et al. Pituitary tumor transforming gene 1 induces tumor necrosis factor-alpha production from keratinocytes: implication for involvement in the pathophysiology of psoriasis[J]. J Invest Dermatol,2013,133(11):2566-2575.

[19] Ramos-Morales F, Dominguez A, Romero F, et al. Cell cycle regulated expression and phosphorylation of hpttg proto-oncogene product[J]. Oncogene,2000,19(3):403-409.

[20] Carpenter G, Lembach KJ, Morrison MM, et al. Characterization of the binding of 125-I-labeled epidermal growth factor to human fibroblasts[J]. J Biol Chem,1975,250(11):4297-4304.

[21] Massague J. Epidermal growth factor-like transforming growth factor. I. Isolation, chemical characterization, and potentiation by other transforming factors from feline sarcoma virus-transformed rat cells[J]. J Biol Chem,1983,258(22):13606-13613.

[22] Mascia F, Mariani V, Girolomoni G, et al. Blockade of the EGF receptor induces a deranged chemokine expression in keratinocytes leading to enhanced skin inflammation[J]. Am J Pathol,2003,163(1):303-312.

[23] Aggarwal BB, Gupta SC, Kim JH. Historical perspectives on tumor necrosis factor and its superfamily: 25 years later, a golden journey[J]. Blood,2012,119(3):651-665.

[24] Kim BE, Howel MD, Guttman-Yassky E, et al. TNF-alpha downregulates filaggrin and loricrin through c-Jun N-terminal kinase: role for TNF-alpha antagonists to improve skin barrier[J]. J Invest Dermatol,2011,131(6):1272-1279.

[25] DonettiE, Gualerzi A, Ricceri F, et al. Etanercept restores a differentiated keratinocyte phenotype in psoriatic human skin: a morphological study[J]. Exp Dermatol,2012,21(7):549-551.

[26] Ng YS, Krilleke D, Shima DT. VEGF function in vascular pathogenesis[J]. Exp Cell Res,2006,312(5):527-537.

[27] Schon MP, Boehncke WH. Psoriasis[J]. N Engl J Med,2005,352(18):1899-1912.

[28] Man XY, Yang XH, Cai SQ, et al. Expression and localization of vascular endothelial growth factor and vascular endothelial growth factor receptor-2 in human epidermal appendages: a comparison study by immunofluorescence[J]. Clin Exp Dermatol,2009,34(3):396-401.

[29] Detmar M, Brown LF, Claffey KP, et al. Overexpression of vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor and its receptors in psoriasis[J]. J Exp Med,1994,180(3):1141-1146.

[30] Bhushan M, McLaughlin B, Weiss JB, et al. Levels of endothelial cell stimulating angiogenesis factor and vascular endothelial growth factor are elevated in psoriasis[J]. Br J Dermatol,1999,141(6):1054-1060.

[31] Akman A, Yilmaz E, Mutlu H, et al. Complete remission of psoriasis following bevacizumab therapy for colon cancer[J]. Clin Exp Dermatol,2009,34(5):e202-204.

[32] Schonthaler H, Huggenberger BR, Wculek SK, et al. Systemic anti-VEGF treatment strongly reduces skin in flammation in a mouse model of psoriasis[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2009,106(50):21264-21269.

[33] Griffiths CE, Barker JN. Pathogenesis and clinical features of psoriasis[J]. Lancet,2007,370(9583):263-271.

[34] Yang XH, Man XY, Cai SQ, et al. Expression of VEGFR-2 on HaCaT cells is regulated by VEGF and plays an active role in mediating VEGF induced effects[J]. Biochem Biophys Res Commun,2006,349(1):31-38.

[35] Man XY, Li W, Chen JQ, et al. Impaired nuclear translocation of glucocorticoid receptors: novel findings from psoriatic epidermal keratinocytes[J]. Cell Mol Life Sci,2013,70(12):2205-2220.

[36] Minematsu T, Suzuki M, Sanno N, et al. PTTG overexpression is correlated with angiogenesis in human pituitary adenomas[J]. Endocr Pathol,2006,17(2):143-153.

[37] McCabe CJ, Boelaert K, Tannahill LA, et al. Vascular endothelial growth factor, its receptor KDR/Flk-1, and pituitary tumor transforming gene in pituitary tumors[J]. J Clin Endocrinol Metab,2002,87(9):4238-4244.

[38] Tsai SJ, Lin SJ, Cheng YM, et al. Expression and functional analysis of pituitary tumor transforming gene-1 [corrected] in uterine leiomyomas[J]. J Clin Endocrinol Metab,2005,90(6):3715-3723.

[39] Kim DS, Franklyn JA, Boelaert K, et al. Pituitary tumor transforming gene (PTTG) stimulates thyroid cell proliferation via a vascular endothelial growth factor/kinase insert domain receptor/inhibitor of DNA binding-3 autocrine pathway[J]. J Clin Endocrinol Metab,2006,91(11):4603-4611.

(收稿：2016-10-09)

Update of PTTG1 and its binding factor PBF in dermatology

SHENJiyang,LIWei,MANXiaoyong,ZHENGMin.

DepartmentofDermatology,theSecondAffiliatedHospitalofZhejiangUniversitySchoolofMedicine,Hangzhou310009,China

Correspondingauthor:ZHENGMin,E-mail:minz@zju.edu.cn

Pituitary transforming gene 1(PTTG1) and its binding factor PBF play an important role in tumor development and invasion. They are regarded as tumor prognostic indicators. In recent years, many reports show that PTTG1 and PBF are also involve in the inflammatory skin diseases and skin cancers. The update of PTTG1 and PBF in dermatology is reviewed in this article.

PTTG1; securin; PBF; psoriasis; tumor

浙江省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(編號(hào)：2013TD02) 國(guó)家自然青年科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)：81301382) 2016年中華醫(yī)學(xué)會(huì)-歐萊雅中國(guó)人健康皮膚/毛發(fā)研究項(xiàng)目(編號(hào)：H2016131401)

浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院皮膚科，杭州， 310009

鄭敏，E-mail：minz@zju.edu.cn