趙巨峰+毛磊+劉承+馮華君+高秀敏
摘要: 光學(xué)顯微成像中,光學(xué)物鏡、電子成像等對(duì)顯微圖像質(zhì)量的影響較大,容易形成退化,導(dǎo)致獲取的顯微圖像細(xì)節(jié)不夠清晰。結(jié)合數(shù)碼顯微成像的具體需求,提出一種后處理細(xì)節(jié)增強(qiáng)處理方法。分析了數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)的退化過程,強(qiáng)調(diào)了光學(xué)退化等帶來的模糊細(xì)節(jié)的效應(yīng)。一方面,利用尺寸變化的雙窗口,可以框定凸顯不同尺寸的細(xì)節(jié)信息,實(shí)現(xiàn)局部信息的分析;另一方面,利用局部窗口內(nèi)極大值與極小值分析,并與原圖信息比對(duì)以獲取細(xì)節(jié)圖像。兩者綜合,最終實(shí)現(xiàn)細(xì)節(jié)的增強(qiáng)。測試實(shí)驗(yàn)表明,該方法能夠很好地適用于數(shù)碼顯微成像系統(tǒng),運(yùn)行速度快,增強(qiáng)效果好。以視覺清晰度指標(biāo)、灰度平均梯度與拉普拉斯算子和指標(biāo)作衡量,增強(qiáng)后評(píng)價(jià)指標(biāo)提升的平均百分比分別為20.9%、71.2%與81.8%。
關(guān)鍵詞: 顯微圖像; 細(xì)節(jié)增強(qiáng); 局部窗口; 極值
中圖分類號(hào): TN 911 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A doi: 10.3969/j.issn.1005-5630.2016.05.006
文章編號(hào): 1005-5630(2016)05-0407-05
引 言
數(shù)碼顯微成像技術(shù)是觀察微觀世界的有利工具之一[1],但在成像過程中,經(jīng)常存在一些退化因素,導(dǎo)致最終的顯微圖像細(xì)節(jié)模糊。在對(duì)焦最佳時(shí),這種模糊主要是物鏡的光學(xué)退化引入的,也有成像電路等因素的共同作用。這種固有缺陷的存在,以及人們對(duì)高質(zhì)量圖像信息獲取的需求,都促使研究者致力于如何有效提升細(xì)節(jié)信息的工作,即細(xì)節(jié)增強(qiáng)技術(shù)。
顯微圖像細(xì)節(jié)增強(qiáng)技術(shù),在硬件上需要提升物鏡的成像能力,提高采集成像電路的信噪比,但考慮到成本等因素,都難以付諸實(shí)踐,最佳的方式是利用軟件算法的形式作為補(bǔ)償。在算法實(shí)現(xiàn)細(xì)節(jié)增強(qiáng)方面,有研究者認(rèn)為是去模糊工作,將其作為一個(gè)反卷積的過程。研究者們?cè)O(shè)計(jì)了諸多模型與方法,比如代數(shù)去模糊法(最小二乘等),統(tǒng)計(jì)法模型(貝葉斯模型法、馬爾科夫隨機(jī)場等),分析模型(基于各種變分的思路),還包括一些綜合多特征優(yōu)勢的混合模型[2-3]。為了更好地獲得顯微去模糊圖像的數(shù)學(xué)解,常常把反卷積問題轉(zhuǎn)化為能量最小化問題,最普通的策略就是使用最優(yōu)化理論與迭代方法求解,如RL等方法。但反卷積的方法首先需要點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)的估計(jì),其次是計(jì)算時(shí)間相對(duì)較長,作為軟件后處理的方式可能會(huì)耽誤整個(gè)成像過程。細(xì)節(jié)增強(qiáng),主要是邊緣區(qū)域,因此有研究者應(yīng)用共焦空間微分顯微鏡系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了在獲得樣品共焦顯微圖像的同時(shí)直接獲取對(duì)應(yīng)的邊緣增強(qiáng)顯微圖像,且圖像分辨率與對(duì)比度較高[4]。有作者將顏色轉(zhuǎn)移技術(shù)應(yīng)用到顯微圖像的顏色增強(qiáng)上,實(shí)現(xiàn)了顯微圖像的彩色化達(dá)到顏色增強(qiáng)的效果[5]。這些方法的效果好,但計(jì)算速度有待進(jìn)一步提升。因此,為實(shí)現(xiàn)顯微圖像細(xì)節(jié)增強(qiáng),本文主要考慮非反卷積式的快速細(xì)節(jié)增強(qiáng)的方法,以配合整個(gè)數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)的工作。
對(duì)于數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)中細(xì)節(jié)增強(qiáng)后處理算法,高對(duì)比的細(xì)節(jié)增強(qiáng)、高效率的運(yùn)行能力是關(guān)鍵。針對(duì)這個(gè)問題,本文結(jié)合具體的數(shù)碼顯微鏡,提出一種基于局部窗口與極值的細(xì)節(jié)增強(qiáng)方法,解決細(xì)節(jié)模糊的問題。
1 數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)
數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)按功能可分為光學(xué)部分、硬件電路部分和軟件算法部分。光學(xué)部分即顯微物鏡,其主要作用是使被觀察物體成像,使得其可用于人眼觀察或者電子目鏡CMOS感光;硬件部分即電子目鏡,一般采用CMOS器件,其主要作用在于將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),并以數(shù)字方式將圖像記錄保存;軟件算法部分一方面實(shí)現(xiàn)圖像和視頻的顯示,另一方面對(duì)圖像存在的失真與退化進(jìn)行校準(zhǔn)、補(bǔ)償?shù)纫缘玫轿矬w真實(shí)的圖像。如圖1所示的數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)的典型構(gòu)架,圖中顯微鏡為寧波永新光學(xué)股份有限公司所產(chǎn)的液晶數(shù)碼顯微鏡,是本文方法的應(yīng)用與實(shí)驗(yàn)對(duì)象。系統(tǒng)要求細(xì)節(jié)增強(qiáng)效果明顯,且運(yùn)行速度在1 s以下。
由于成像系統(tǒng)的缺陷,所獲取的顯微圖像難免細(xì)節(jié)有所模糊。而數(shù)碼顯微系統(tǒng)具有功能強(qiáng)大的處理器與軟件集成系統(tǒng),使得有機(jī)會(huì)用算法補(bǔ)償提升細(xì)節(jié),實(shí)現(xiàn)顯微圖像細(xì)節(jié)的增強(qiáng),以便于后期的數(shù)據(jù)分析。本文旨在通過單幅圖像的數(shù)據(jù),構(gòu)建圖像的局部窗口范圍內(nèi)極值優(yōu)選方法,實(shí)現(xiàn)細(xì)節(jié)的增強(qiáng),彌補(bǔ)硬件上的缺憾。
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
應(yīng)用于顯微成像系統(tǒng)的本方法具有一些參數(shù),窗口L1的尺寸初始選擇為[9,13,17],對(duì)應(yīng)L2的尺寸為[5,9,13]。 利用三套雙窗口系統(tǒng),獲得最終的增強(qiáng)結(jié)果。
顯微圖像的仿真與實(shí)拍實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如圖3所示。圖3中,第一行(a)(b)(c)為原圖,第二行(d)(e)(f)為增強(qiáng)的結(jié)果。其中,圖(a)為仿真顯微灰度圖(來自百度圖片),圖(b)(c)為novel (sw82)拍攝實(shí)物(椴樹年輪切面與木本雙子葉植物莖橫切),(d)(e)(f)分別為對(duì)應(yīng)的增強(qiáng)結(jié)果。在實(shí)拍實(shí)驗(yàn)中,采用的物鏡為永新所產(chǎn)的novel (sw82),電子目鏡CMOS分辨率為2 048×1 536,像元尺寸為2.2 μm,圖像為彩色,實(shí)驗(yàn)物體對(duì)象包括木本雙子葉植物莖橫切和椴樹年輪切面。由于實(shí)拍圖像尺寸太大,本文截取了圖像的部分內(nèi)容作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的展示。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察,經(jīng)過本文方法的處理,細(xì)節(jié)層次得到增強(qiáng),對(duì)比相對(duì)提升,實(shí)現(xiàn)了較好地效果。另外,根據(jù)計(jì)算速度監(jiān)測,對(duì)于2 048×1 536的圖像,本方法計(jì)算時(shí)間約為0.5 s,完全適用于永新光學(xué)的顯微成像系統(tǒng)。
此外,為衡量細(xì)節(jié)增強(qiáng)的程度,引入了三種圖像客觀評(píng)價(jià)方法,包括結(jié)合視覺注意機(jī)制與邊緣展寬衡量的顯微圖像清晰度評(píng)價(jià)方法[6],簡稱為視覺清晰度法;灰度平均梯度GMG(Gray Mean Gradient)法與拉普拉斯算子和LS(Laplacian Sum)法[6]。視覺清晰度法越小越好,灰度平均梯度GMG與拉普拉斯算子和LS越大越好。對(duì)于原圖與細(xì)節(jié)增強(qiáng)圖的客觀評(píng)價(jià)結(jié)果如表1所示。相比于原圖,增強(qiáng)后的結(jié)果的視覺清晰度指標(biāo)更低,GMG與LS指標(biāo)更高,表明增強(qiáng)結(jié)果非常有效。以原圖作為基準(zhǔn),以視覺清晰度指標(biāo)、GMG與LS指標(biāo)作衡量,通過本文方法的增強(qiáng),評(píng)價(jià)指標(biāo)提升的平均百分比分別為20.9%、71.2%與81.8%,也從一定程度上說明了細(xì)節(jié)增強(qiáng)的有效性。
4 結(jié) 論
本文針對(duì)顯微成像系統(tǒng)成像退化補(bǔ)償?shù)囊?,提出使用雙窗口局部極值的手段實(shí)現(xiàn)顯微圖像細(xì)節(jié)的增強(qiáng)方法。根據(jù)數(shù)碼光學(xué)顯微鏡固有的細(xì)節(jié)模糊的缺陷,一方面考慮了細(xì)節(jié)增強(qiáng)方法的效果要求,另一方面是方法的高效運(yùn)行速度,鑒于數(shù)碼顯微系統(tǒng)的強(qiáng)大處理器與軟件集成能力,提出使用局部雙窗口去提取不同尺寸的細(xì)節(jié),并用極值的選擇加強(qiáng)亮細(xì)節(jié)與暗細(xì)節(jié)區(qū)域的對(duì)比,最終快速實(shí)現(xiàn)細(xì)節(jié)的對(duì)比增強(qiáng)。通過實(shí)驗(yàn),給出了仿真與實(shí)拍數(shù)據(jù)的結(jié)果,利用客觀評(píng)價(jià)手段論證了細(xì)節(jié)增強(qiáng)的有效性,且運(yùn)行速度皆滿足顯微成像系統(tǒng)要求。未來,更多的工作需要投入到參數(shù)的自適應(yīng)選擇上。目前認(rèn)為自適應(yīng)參數(shù)有兩個(gè)重點(diǎn):一是對(duì)不同場景數(shù)據(jù)的訓(xùn)練,得出經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù),而后自動(dòng)判別選擇相應(yīng)參數(shù);二是可根據(jù)大量數(shù)據(jù)獲取普適應(yīng)的初始參數(shù),而后根據(jù)具體的應(yīng)用場景設(shè)計(jì)收斂公式實(shí)現(xiàn)參數(shù)的最優(yōu)化。
參考文獻(xiàn):
[1] 李艷軍,左洪福,吳振鋒,等.顯微觀測技術(shù)的新進(jìn)展及其應(yīng)用[J].光學(xué)儀器,2002,24(2):37-42.
[2] RICHARDSON W H.Bayesian-based iterative method of image restoration[J].Journal of the Optical Society of America,1972,62(1):55-59.
[3] CHAN T F,WONG C K.Total variation blind deconvolution[J].IEEE Transactions on Image Processing,1998,7(3):370-375.
[4] 吳麗如,唐志利,吳泳波,等.應(yīng)用共焦空間微分顯微鏡獲取邊緣增強(qiáng)顯微圖像[J].光學(xué)學(xué)報(bào),2014,34(3):317001.
[5] 朱美嬌.低對(duì)比度顯微圖像的顏色增強(qiáng)方法研究[D].杭州:浙江理工大學(xué),2014.
[6] 趙巨峰,毛磊,劉承,等.視覺注意機(jī)制與邊緣展寬衡量相結(jié)合的顯微成像清晰度評(píng)價(jià)[J].光子學(xué)報(bào),2015,44(7):711002.